1 / 61

1. laboratorijas darbs. Buferšķīdumi, vides pH, enzimātiskās reakcijas.

Studiju kurss Bioloģija (biologiem). Bloks Ievads š ūnas bioloģijā - dzīvības ķīmija. 1. laboratorijas darbs. Buferšķīdumi, vides pH, enzimātiskās reakcijas. Māris Lazdiņš LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra. Mācību materiāli.

archibald-richter
Download Presentation

1. laboratorijas darbs. Buferšķīdumi, vides pH, enzimātiskās reakcijas.

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Studiju kurssBioloģija (biologiem) Bloks Ievads šūnas bioloģijā - dzīvības ķīmija 1. laboratorijas darbs. Buferšķīdumi, vides pH, enzimātiskās reakcijas. Māris Lazdiņš LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  2. Mācību materiāli http://priede.bf.lu.lv/grozs/Mikrobiologijas/Maris/Visp_Biol/ LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  3. Darba drošība laboratorijā Veselības stāvoklis Nedrīkst strādāt: - slims, ar sliktu pašsajūtu; - ar lielu nogurumu; - ādas bojājumiem uz rokām. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  4. I = U R Darba drošība laboratorijā Elektrība - elektroiekārtas un šķīdumi, - ūdens krāni un elektropievadi. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  5. Darba drošība laboratorijā E l e k t r ī b a LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  6. Darba drošība laboratorijā Ķīmiskie savienojumi var būt bīstami dažādos veidos - uz traukiem, fasējumiem jābūt uzrakstam, - ja nepieciešams, brīdinošai piktogrammai. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  7. - korozīvi, neitralizē ar vājas skābes (etiķskābe) vai sārma (NaHCO3) 1-3% šķīdumu. - bīstami videi, Darba drošība laboratorijā Ķīmiskie savienojumi - sprāgstoši (eksplozīvi), (DDT, freons, smago metālu sāļi, polihlorētie bifenil-savienojumi) LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  8. Darba drošība laboratorijā Ķīmiskie savienojumi - indīgi (toksiski), LD50 (organisms, iedarbības veids) mg/kg LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  9. Darba drošība laboratorijā VielaOrganisms Iedarbes veids LD50 mg/kg Bottoksīns A cilvēks (provizoriski)Inhalatīvi 0,000003 cilvēks (provizoriski)Orāli 0,00001 KCN žurka Orāli 5,0 cilvēks Orāli 2,9 Akrilamīds žurka Orāli 124,0 žurka Caur ādu 400,0 NaCl žurka Orāli 3 000,0 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  10. Darba drošība laboratorijā VielaOrganisms Iedarbes veids LD50 mg/kg NaCl žurka Orāli 3 000,0 C2H5OH žurka Orāli 7 060,0 NaH2PO4 žurka Orāli 8 290,0 E339(I) pieņemamā deva līdz 70 mg/kg Na2HPO4 žurka Orāli 17 000,0 E339(II) pieņemamā deva līdz 70 mg/kg Saharoze žurka Orāli 29 700,0 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  11. - bīstami veselībai (Xn), kairinoši (Xi) Darba drošība laboratorijā Ķīmiskie savienojumi - indīgi (toksiski), LK50 mg/m3 MPK mg/m3 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  12. - viegli uzliesmojoši, dzēšanai: - smiltis, - CO2, - sega, - ūdens. Darba drošība laboratorijā Ķīmiskie savienojumi - spēcīgi oksidētāji, LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  13. Darba drošība laboratorijā UGUNSDROŠĪBAS PRASĪBAS LU STUDĒJOŠIEM MĀCĪBU UN LABORATORIJU TELPĀS INSTRUKCIJA Nr.UD-8 2.Telpās aizliegts 4.Smēķēt, (izņemot speciāli šim mērķim iekārtotas vietas). 5.Pielietot pirotehniku, sveces, atklātu uguni utt. 6.Atstāt bez uzraudzības tīklā ieslēgtas elektroiekārtas, izņemot ierīces, kuru ekspluatācijas instrukcijā tas atļauts. 7.Izmantot bojātas elektriskās ierīces, rozetes, pagarinātājus u.tml LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  14. Darba drošība laboratorijā UGUNSDROŠĪBAS PRASĪBAS LU STUDĒJOŠIEM MĀCĪBU UN LABORATORIJU TELPĀS INSTRUKCIJA Nr.UD-8 3.Rīcība ugunsgrēka gadījumā 8.Par ugunsgrēku nekavējoties paziņot: 8.1.ugunsdzēsības dienestam pa tālr. 112, norādot adresi un vietu, kur ugunsgrēks ir izcēlies, savu vārdu, uzvārdu un tālruņa numuru; 8.2.Latvijas Universitātes Avārijas dienestam pa tālr. 703-4888; 8.3.ēkas apsardzei, administratoram vai jebkurai LU struktūr- vienības amatpersonai (pa tālruni; nospiežot “uguns trauksmes” pogu; mutiski u.c. veidā); LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  15. Darba drošība laboratorijā UGUNSDROŠĪBAS PRASĪBAS LU STUDĒJOŠIEM MĀCĪBU UN LABORATORIJU TELPĀS INSTRUKCIJA Nr.UD-8 4.Ugunsgrēka dzēšanas noteikumi 10.Evakuācijas laikā novērst panikas rašanās iespēju. 11.Elektroiekārtu (t.sk. datortehnikas) dzēšanai, kas atrodas zem elektriska sprieguma, izmantot tikai pulvera un ogļskābās gāzes ugunsdzēsības aparātus. 12.Ūdensputu aparātus, ugunsdzēsības krānus drīkst izmantot dzēšanai tikai pēc sprieguma atslēgšanas. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  16. Darba drošība laboratorijā UGUNSDROŠĪBAS PRASĪBAS LU STUDĒJOŠIEM MĀCĪBU UN LABORATORIJU TELPĀS INSTRUKCIJA Nr.UD-8 5.Uzvedības noteikumi, ja ugunsgrēka laikā nav iespējams izkļūt no telpas 13.Noblīvēt telpas durvis, lai mazinātu dūmu iekļūšanu tajā, izvietoties pie logiem. 14.Paziņot par savu atrašanās vietu un gaidīt palīdzību no ārpuses. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  17. Darba drošība laboratorijā - bioloģiski bīstams. Stiklu šķembas ir asas! LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  18. Darba drošība laboratorijā Kas jāievēro? - liekām mantām laboratorijā - NĒ, - pārtikas produktu lietošanai - NĒ, - reaģentu nogaršošanai - NĒ, LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  19. Darba drošība laboratorijā Kas jāievēro? - laboratorijas apģērbs, halāts (cimdi, aizsargbrilles u.c.) - personīgā higēna - mazgājam rokas, - ziņojam par kļūmīgām situācijām, - nebāžam rokas, kur galva nelien iekšā. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  20. Darba drošība laboratorijā LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  21. Laboratorijas instrumenti Automātiskās pipetes - ērti strādāt, - vajadzīgais tilpums uzstādams, - šķīdumi saskaras ar mainamu uzgali. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  22. Laboratorijas instrumenti Automātiskās pipetes Mainams uzgalis tilpuma indikators taustiņš šķīduma vadīšanai skrūve tilpuma uzstādīšanai LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  23. Laboratorijas instrumenti Automātiskās pipetes - darba gaita LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  24. P10 ml 10 ml - 2 ml P1000 1000 l - 200 l P200 200 l - 20 l P20 20 l - 2 l Laboratorijas instrumenti Automātiskās pipetes - tilpuma diapazoni Uzgaļi balti zili dzelteni dzelteni LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  25. Laboratorijas instrumenti Automātiskās pipetes - tilpuma uzstādīšana 0 8 4 0 8 4 0 8 4 0 8 4 = 08,4 ml = 840 l = 084 l = 08,4 l P10 ml P1000 P200 P20 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  26. Laboratorijas instrumenti Automātiskās pipetes - ko ievērosim 1) izvēlamies pareizā diapazona pipeti; 2) neaizmirstam uzlikt uzgali; 3) mērot tilpumu ievērosim pirmo atduri; 4) nepārgriezīsim maksimālo un minimālo tilpumu; LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  27. Laboratorijas instrumenti Automātiskās pipetes - ko ievērosim 5) sekosim līdzi mēramajam šķidrumam; 6) lielo tilpumu (10 ml) pipetes nekratīsim; 7) lielo tilpumu (10 ml, 1000 l) pipetes turēsim ± vertikāli. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  28. Laboratorijas instrumenti “Vortex” maisītāji LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  29. Laboratorijas instrumenti Magnetiskie maisītāji LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  30. Laboratorijas instrumenti Elektroniskie svari LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  31. Pie darba ? LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  32. Buferšķīduma pagatavošana • 1. uzdevums. • Pagatavot izejas šķīdumu komplektu fosfātu bufersistēmas veidošanai: • a) 100 ml 0,2 M Na2HPO4 šķīduma un • b) 100 ml 0,2 M NaH2PO4 šķīduma. • (četri studenti / viena galdu rinda kopīgi gatavo vienu izejas šķīdumu komplektu) LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  33. Buferšķīduma pagatavošana • Darba gaita 1. • 1. aprēķina nepieciešamo vielu daudzumu, ja • 0,2 M Na2HPO4 šķīduma gatavošanai tiek izmantots • Na2HPO412H2O • 0,2 M NaH2PO4 šķīduma gatavošanai tiek izmantots • NaH2PO42H2O; LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  34. Buferšķīduma pagatavošana • Darba gaita 1. • 1M šķīdums - 1 litrā šķīduma atrodas 1 mols vielas. • (1 mols = 6,0221023 vielas molekulas) • (Avogadro skaitlis) • a) Jāaprēķina abu vielu mola masa, • b) Jāpārrēķina masa 0,2 moliem • c) No 1 litra jāpārrēķina uz 100 ml (0,1 litru). LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  35. Buferšķīduma pagatavošana • Darba gaita 1. • Elementa Molekulmasa Mola masa • simbols Da g/mol • Na 23,0 23,0 • P 31,0 31,0 • O 16,0 16,0 • H 1,0 1,0 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  36. Buferšķīduma pagatavošana Darba gaita 1. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  37. Buferšķīduma pagatavošana Mērkolba. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  38. Buferšķīduma pagatavošana Kroku filtrs. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  39. Buferšķīduma pagatavošana Kroku filtrs. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  40. Buferšķīduma pagatavošana Kroku filtrs. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  41. Buferšķīduma pagatavošana Kroku filtrs. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  42. Buferšķīduma pagatavošana Elektroniskie svari a) jābūt nolīdzsvarotiem (līmeņrāža burbulis centrā), b) ieslēdzot jānogaida, kamēr rāda 0,00 g, c) taras atskaitīšanai lieto taustiņu "tara" (T) (- spiest, kad rādījums vairs nemainas, - pārliecināties, vai pēc tam svari rāda 0,00 g) LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  43. Pa īstam pie darba ! Uzdevums 1; uzdevums 2 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  44. pH ūdens disociācija: 2 H2O  H3O+ + OH- hidroksonija jons ( H2O  H+ + OH-) hidroksonija jonu koncentrācija tīrā ūdenī = 1,004*10-7 mol/l neitrāls šķīdums   LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  45. pH ( H2O  H+ + OH-) H3O++OH- jonu koncentrācijas saistītas, tāpēc uzrāda tikai vienu - H3O+ (H+) koncentrāciju. pH = - lg[H+] <= molārā koncentrācija Bioloģisko šķīdumu pH parasti ir robežās pH 6 – pH 8 Lietus ūdenim normāli pH 5 - 6, jo tajā šķīst CO2 un veidojas vāja skābe – ogļskābe.  LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  46. pH Ja ūdenim pievieno skābi: HCl  H+ + Cl- H2O  H+ + OH- H+ koncentrācija palielinās  Ja ūdenim pievieno sārmu: NaOH  Na+ + OH- H2O  H+ + OH- H+ koncentrācija samazinās  LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  47. Buferšķīdums (Bufersistēma) šķīdums, kuram ir - noteikts pH, - kas praktiski nemainās - to atšķaidot - vai pievienojot nedaudz skābes vai sārma. Bufersistēmu veido vāja skābe un atbilstošā sāls - konjugētā bāze. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  48. Buferšķīdums H2PO4 - H+ + HPO4 --  Ja pievieno skābi: HCl  H+ + Cl- H2PO4 - H+ + HPO4 --  LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  49. Buferšķīdums H2PO4 - H+ + HPO4 --  Ja pievieno sārmu: NaOH  Na+ + OH- H2PO4 - H+ + HPO4 --  H2O LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  50. pH noteikšana Ar Indikatorpapīrīšiem LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

More Related