1 / 10

IZOLOVANJE DNK IZ BILJNIH ĆELIJA

IZOLOVANJE DNK IZ BILJNIH ĆELIJA. ŠTA JE DNK?. STRUKTURA MOLEKULA DNK. DNK se sastoji iz dva polinukleotidna lanca koja su obavijena jedan oko drugog u formi dvolančanog heliksa Gradivne jedinice polinukleotidnih lanaca DNK su dezoksiribonukleotidi.

benito
Download Presentation

IZOLOVANJE DNK IZ BILJNIH ĆELIJA

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. IZOLOVANJE DNK IZ BILJNIH ĆELIJA

  2. ŠTA JE DNK?

  3. STRUKTURA MOLEKULA DNK

  4. DNK se sastoji iz dva polinukleotidna lanca koja su obavijena jedan oko drugog u formi dvolančanog heliksa Gradivne jedinice polinukleotidnih lanaca DNK su dezoksiribonukleotidi Kičmu svakog polinukleotidnog lanca DNK čine fosfatni i šećerni ostaci nukleotida i ovi ostaci se naizmenično smenjuju, dok se baze nukleotida projektuju ka unutrašnjosti dvolančanog heliksa i uspostavljaju vodonične veze. Ova struktura DNK označena je kao sekundarna struktura DNK. Primarnu strukturu DNK predstavlja redosled nukleotida u jednom polinukleotidnom lancu.

  5. Dezoksiribonukleotidi su gradivne jedinice (monomeri) DNK. Nukleotid se sastoji iz:1. Fosfatne grupe 2. Šećera 2’-dezoksiriboze, koji ne poseduje -OH grupu vezanu za 2’ C atom3. Jedne od 4 azotne baze: adenin – A, timin - T, guanin - G ili citozin – C.

  6. 2’ dezoksiriboza se glikozidnom vezom povezuje sa bazom fromirajući nukleozid Nukleozid se fosfomonoestarskom vezom povezuje sa fosfornom kiselinom formirajući nukleotid Formiranje polinukleotidnih lanaca DNK

  7. Posledice Watson-Crick-ovog sparivanja baza su:Antiparalelnost DNK lanacaKomplementarnost sekvenci DNK lanaca.

  8. Kako se pakuje molekul DNK

  9. Cilj vežbe: Izolacija DNK iz različitih tipova plodova Materijal: - Luk, kivi, pomorandža, jabuka - Ekstrakcioni rastvor (kašiku NaCl + 5ml deterdženta + destilovana voda) - Filter papir - Levak - Epruvete - Alkohol 96% - Petrol-etar - Blender

  10. Načinrada: Oguliti i iseći 1/3 ploda kivija ili glavice crnog luka i staviti u blender. Zatim dodati 3 ml ekstrakcionog rastvora i sačekati 10ak sekundi. Deterdžent je u stanju da dezintegriše ćelijsku membranu i time se oslobađa DNK iz nukleusa. Dodavanjem ekstrakcionog rastvora se smanjuje površinski napon i povećava permeabilitet membrane. Nakon mlevenja u blenderu, sadržaj preneti na filter papir i dobijenu kašu profiltrirati u epruvetu. Po završenoj filtraciji izvršiti precipitaciju DNK molekula uz stalno mešanje i dodavanje 6 ml alkohola i 3 ml petrol-etra.Alkohol je "zarobio" vlakna, jer se ne rastvaraju u njemu već samo u vodi. DNK se može jasno zapaziti u vidu kraćih ili dužih beličastih niti, a dužina niti zavisi od biljne vrste.

More Related