190 likes | 352 Views
Imunohistologické vyšetření u peroperační biopsie. Marcela Štecherová FTNsP Praha 4 - Krč Nový Jičín 16.-17.10.2009. Otevření nového, vysoce specializované pracoviště na chirurgické klinice ve FTNsP, které je zaměřeno na vyšetření, operace a následnou léčbu plicních karcinomů.
E N D
Imunohistologické vyšetření u peroperační biopsie Marcela Štecherová FTNsP Praha 4 - Krč Nový Jičín 16.-17.10.2009
Otevření nového, vysoce specializované pracoviště na chirurgické klinice ve FTNsP, které je zaměřeno na vyšetření, operace a následnou léčbu plicních karcinomů. • Naše oddělení navázalo s tímto pracovištěm velice úzkou spolupráci • Rozšířilo spektrum svých vyšetření tímto směrem.
Peroperační vyšetření • Standardně provádíme peroperační vyšetření z tkání odebraných při operaci plic • Tkáň před krájením zmrazíme na -230C • Řezy fixujeme acetonem • A barvíme současně metodami - hematoxylin-eosin a toluidinová modř
Kryostat – Leica • CM 1850 UV • Lampa s UV zářením na dezinfekci vnitřního prostoru kryostatu • TBC
Jestliže lékař diagnostikuje karcinom plic, následuje imunohistochemické vyšetření. • Termínem imunohistochemie označujeme všechny techniky využívající mono nebo polyklonální protilátky, kterými lokalizujeme a vizualizujeme příslušné tkáňové antigeny. Předmětem zkoumání je detekce antigenů sdružených s nádorovými buňkami a možnosti imunohistochemické klasifikace nádoru podle původu
Metoda je nasazována v diagnostice plicních nádorů pouze u nativních vzorků. • Velká opatrnost, zručnost a kvalitní zmrazené řezy • Detekce antigenu protilátkou TTF-1, clone: 8G7G3/1
Stručný popis metody • Kryořezy sušené proudem vzduchu • Fixace acetonem • Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6 • Aplikace Primární protilátky při teplotě 37oC 4 minuty • Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6 • Aplikace sekundární protilátky 4 minuty • Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6 • Vizualizace DAB+ 4 minuty • Mayerůr hematoxylin 10 sekund • Modrání jader, odvodnění, Solakryl • Negativní a pozitivní kontrola
Vyhodnocení preparátu • Pozitivita – téměř vždy se jedná o primární nádor plic • Negativita – podle morfologie se patolog spíše přikloní k tomu, že se jedná o metastázu, převážně z adenokarcinomu
Přínosy pro pacienta • odpadají náročná, zdlouhavá a bolestivá vyšetření • léky jsou ordinovány cíleně a v potřebném množství • v neposlední řadě jsou to i ekonomické výhody