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Generalidades del análisis de aspirado de médula ósea. Celularidad. Se puede determinar por: Biopsia (más fidedigno) Aspirado Depende de: Edad del paciente Sitio de donde es tomada la muestra Se expresa como el % de una sección ocupada por tejido hematopoyético.
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Celularidad • Se puede determinar por: • Biopsia (más fidedigno) • Aspirado • Depende de: • Edad del paciente • Sitio de donde es tomada la muestra • Se expresa como el % de una sección ocupada por tejido hematopoyético. • Celularidad puede ser normal entre 20 y 80% (excepto en extremos de la vida).
Necesidad de adecuada profundidad para determinar celularidad
Estadios de la eritropoyesis • Proeritroblastos: • Núcleo grande y redondeado, citoplasma muy basofílico, con zona perinuclear pálida (Golgi). Núcleo granular fino con varios nucléolos. • Eritroblastos tempranos: • Más pequeños y numerosos que proeritrob. N:C menor. Cromatina granular punteada. Sin nucléolo visible. Halo perinuclear.
Estadios de eritropoyesis • Eritroblastos intermedios: • Más pequeños, menor N:C. Citoplasma menos basofílico, moderado agrupamiento de cromatina. • Eritroblastos tardíos: • Más pequeños y numerosos.Levemente más grandes que GR maduros. Menor N:C y más condensación de cromatina.Menos basofilia citoplasmática y tinte rosa (policromatofílico).
Serie eritroide early, intermediate and late erythroblasts and a lymphocyte
Serie eritroide a proerythroblast, intermediate erythroblast, four late erythroblasts, a myelocyte, large and small lymphocytes and a neutrophil
Granulopoyesis • Mieloblasto • Tamaño similar a proeritroblasto, de forma más irregular. Citoplasma ligeramente basofílico. Cromatina difusa y varios nucleólos. Sin gránulos. • Promielocito • Más grandes que mieloblastosy citoplasmamásbasofílico. Núcleo levemente hendido, nucleolado, zona de Golgi y gránulos primarios azurofílicos que son rojos-púrpura.
Granulopoyesis • Mielocito • Más pequeños que promielos. Variables en tamaño. Condensación parcial de cromatina sin nucléolo. Menos basofilia en citoplasma, con gránulos específicos. • Metamielocitos • De 10–12 μm. Núcleo en forma de U. • Bandas. • Granulocitopolimorfonuclear.
Granulopoyesis a myeloblast, three neutrophils and two monocytes
Granulopoyesis a myeloblast and a promyelocyte (centre), a myelocyte (lower right), a metamyelocyte, band forms, a neutrophil and a late erythroblast
Monocitopoyesis • Monocitos derivados de precursor granulocítico/monocítico. • Monoblastos • Más grande que mieloblasto, citoplasma abundante con diversa basofilia y gran núcleo. • Promonocitos • Tamaño similar a promielocitos. Gránulos citoplásmicos y lobulación nuclear.
Monocitopoyesis • Monocitos • Núcleo lobulado y abundante citoplasma levemente basofílico; este puede contener pequeños gránulos azurofílicos (vidrio esmerilado). • Macrófagos • Núcleo irregular, N:C bajo, citoplasma voluminoso, leve basofilia. Núcleos varían dependiendo del estado de maduración.
Monocitopoyesis • Los monocitos y sus precursores son bastante infrecuentes entre células medulares, ya que son liberados rápidamente al torrente sanguíneo. • Los macrófagos (histiocitos) son más abundantes en la médula.
Megacariopoyesis • Megacariocitos sufren endoreduplicaciónal madurar alcanzando de 30–160 μm, con mucha heterogeneidad nuclear. • Pueden clasificarse según ploidía, según características nucleares y citoplasmáticas. • Grupo I: Citop muy basófilo, N:C muy alto. • Grupo II: Citop menos basófilo, N:C menor. • Grupo III: Citop poca basofilia, muchos gránulos azurofílicos. Células maduras, capaz de producir plaquetas y no dividirse más.
Megacariopoyesis • Relación entre ploidía y estado de maduración. • Núcleo de los megacariocitos. • Unidos por hilos de cromatina. • Pocos son no lobulados o multinucleados.
Trombopoyesis • Aumento en la demanda puede aumentar número de ploidíay tamaño celular. • Se debe determinar número y morfología de los megas: • Pueden estar: • Disminuidos • Normales • Hipercelulares • Megacariocitos pueden comer otras células(emperipolesis).
Mastocitos • Derivadas de progenitores mieloides multipotenciales. • Células ovaladas o elongadas, núcleo central, pequeño, redondo u oval. • Citoplasma empacado de gránulos azul oscuro. • Diferentes de basófilos por no tener núcleo lobulado y cromatina más laxa. • Son poco frecuentes.
Osteoblastos y osteoclastos • Osteoblastos: • Mononucleares, núcleo excéntrico, Golgi no adyacente al núcleo, citoplasma basófilo. • Cromatina menos densa que células plasmáticas. • Poco comunes, pero al aparecer generalmente lo hacen en grupos.
Osteoblastos y osteoclastos • Osteoclastos: • Células multinucleadas gigantes. • Núcleos separados claramente. • Citoplasma voluminoso con gránulos azurofílicos. • Más frecuentes en niños.
Linfocitos • T son más maduros. • B son más inmaduros. • Células pequeñas con relación N:C alta y citoplasma escaso levemente basofílico. • Núcleo con leve condensación de cromatina. • Aprox 10% de cél nucleadas (mayoría son CTL).
Células plasmáticas • Raras en M.O. (<1%). • Núcleo excéntrico, citoplasma de moderada basofilia y Golgi prominente. • Condensación gruesa de cromatina. • Ocasionalmente vacuoladas.
Composición celular de M.O. • Influenciado por volumen aspirado. • Conteo ideal de primeras dos gotas de aspirado. • Cambiar de jeringa si se necesitan más análisis. • Debe realizarse conteo celular: • 500 células. • Determinar relación M:E.(influenciado por volumen de aspirado): • Eritropoyesis. • Granulopoyesis.
Interpretación del aspirado • Permite determinar citomorfología. • Se debe tener información del paciente. • Haber analizado sangre periférica. • Permite orientar la histología. • Examinar de 2 a 3 extendidos. • Iniciar a bajo poder e ir aumentando. • Determinar detalladamente número y morfología.
Interpretación del aspirado • Analizar tinción de hierro a bajo poder para visualizar reservas. • Aumentar el poder para hallazgos anormales. • Granulación siderótica. • Sideroblastos.
Reporte del aspirado • Tomar en cuenta detalles clínicos y hemograma. • Incluir: • Celularidad. • Relación M:E. • Descripción de cada línea. • Descripción de reservas de hierro. • Resumen corto con hallazgos significativos con interpretación. • Diferenciar hechos de opiniones.
Artefactos • Inducidos por la biopsia o procesamiento de laboratorio. • Material o tejido extraño. • Consecuencia del daño tisular producido previamente por la biopsia.
Artefactos en la citología • Procesamiento: • Falta de secado antes de fijación y tinción. • Efecto de fuga del citoplasma y mala definición de este. • Almacenamiento prolongado. • Tinte azul oscuro en el extendido. • Mala fijación/tinción.
Elementos extraños Células endoteliales Células epiteliales