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ROL DEL LABORATORIO EN EL DIAGNOSTICO ENTOMOLOGICO. PORQUE COLECTAR INSECTOS
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PORQUE COLECTAR INSECTOS No es la intención promover la colecta (y por lo tanto la muerte) de los insectos, sino de hacerla cuando sea necesaria para alcanzar los fines de estudio que se persiguen, colectando y preservando a los organismos adecuadamente y de la mejor manera posible. Para el estudio de los insectos es necesario primero su identificación taxonómica (Steyskal et al., 1986) y a partir de ella generar cualquier otro tipo de conocimiento, ya que sin ésta, todo lo que podamos decir quedará en el aire.
Preservación de insectos La preservación consiste en mantener a los ejemplares colectados en las mejores condiciones posibles para su estudio. Los insectos pueden ser preservados en tres formas, en líquido, en preparaciones y en seco. Al igual que con las técnicas de colecta, la elección de cada uno de los métodos de preservación depende de los fines y posibilidades de cada investigación.
Insumos de laboratorio 1. Alcoholes graduales y absoluto 2. Alfileres entomológicos 3. Gabinetes entomológicos 4. Cajas entomológicas 5. Cámara húmeda 6. Colorante 7. Cristales de fenol 8. Cubreobjetos 9. Embudo 10. Goma entomológica, barniz para uñas o pegamento transparente 11. Hidróxido de sodio o hidróxido de potasio 12. Microviales de plástico 13. Balsamo de Canada 14. Naftalina 15. Pinzas entomológicas 16. Placa rectangular de cartoncillo o de acetato 17. Portaobjetos 18. Acetato de etilo 19. Tubos o viales de vidrio 20. Lactofenol 21. Creosota de la Haya
TRANSPORTACION Y ENVIO DE MUESTRA • El transporte de muestras larvarias será en tubos de vidrio o plástico con tapón a rosca para evitar que se derrame el líquido preservador que siempre será alcohol al 70%, NUNCA serán enviadas en agua por que se descomponen los ejemplares.
ADULTOS • En el caso de ejemplares adultos en seco se usarán cajas pastilleras de metal o plástico, previamente preparadas. • Por ningún motivo se utilizará ningún medio líquido para su preservación ya que se desprenden de su cuerpo las escamas que le dan el patrón de coloración característico de cada especie
No se colocarán no más de 25 ejemplares, distribuidos de tal forma que no se tallen entre sí y evitar en lo posible que pierdan las escamas que recubren su cuerpo, en cada caja dependiendo del tamaño de la misma. • Se usara repelentes de hongos naftalina o para-diclorobenceno mezclado con un agente desecante, sílica gel, para evitar el desarrollo de hongos que destruyan el material.
Datos de colecta: su importancia y utilidad Los ejemplares de insectos recolectados deben incluir una serie de datos mínimos que permitan la elaboración de diversos tipos de estudios, desde listas taxonómicas hasta revisiones sistemáticas y estudios biogeográficos. Estos datos son: localidad de colecta, coordenadas geográficas del sitio de colecta, altitud, tipo de vegetación, sustrato donde se colectó el ejemplar o método de colecta utilizado, fecha de colecta y nombre del o los colectores.
Bioseguridad e Infraestructura Las pruebas que realiza el Laboratorio de Entomología para la identificación taxonómica de vectores corresponden al Nivel de Bioseguridad 1, teniendo en cuenta: • El uso de mandiles y vestuario • Aplicación de las Técnicas de laboratorio estándar y normas de higiene personal En el caso de la Evaluación de la Susceptibilidad y Resistencia de mosquitos a los insecticidas y cría y mantenimiento de mosquitos corresponden al Nivel de Bioseguridad 2, teniendo en cuenta: • El uso de guantes (Protección de manos y brazos) • Uso de respirador descartable (protección ocular y protección respiratoria) • Uso de mandiles y vestuario • Campana extractora de humos • Aplicación de Técnicas de laboratorio estándar y normas de higiene personal • Inmunización previa del personal • Desinfección de instrumentos y superficies
Equipos e instrumentos • Los equipos e instrumentos del laboratorio de entomología deben estar inmersos en un programa de mantenimiento y contar con su historial respectivo conforme lo establece el PRT-CNSP-002 (Mantenimiento Preventivo y Correctivo de Equipos de Laboratorio). • Los registros se manejan y conservan en el laboratorio de entomología, conforme lo establece el PRA-CNSP-006 (Control de Registros del Sistema de Gestión de la Calidad). Materiales e insumos • Los materiales e insumos a ser usados en el Laboratorio de Entomología deben ser registrados, controlados y manejados según lo establece el PRA-CNSP-014 (Manipulación y Conservación de Materiales e Insumos) y el ITA-CNSP- 006 (Registro de Materiales e Insumos). • Los registros se manejan y conservan en el Laboratorio de Entomología, conforme lo establece el PRA-CNSP-006 (Control de Registros del Sistema de Gestión de la Calidad).
PRE ANALISIS, ANALISIS Y POST ANALISIS PRE – ANALISIS • La fase Pre – Analítica desde la recepción de la muestra en el INS hasta la recepción de la misma en el laboratorio de entomología se lleva a cabo conforme lo establece el PRT-CNSP-001 (Recepción y Conservación de Muestras Biológicas en la Etapa de Pre-Análisis). • Los registros se manejan y conservan en el laboratorio de entomología, conforme lo establece el PRA-CNSP-006 (Control de Registros del Sistema de Gestión de la Calidad). ANALISIS • Conservación de muestras antes del análisis (Identificación taxonómica) • Las muestras de mosquitos adultos son conservadas a temperatura ambiente, en cajas pequeñas entre láminas delgadas de papel toalla o montadas en alfileres entomológicos. • Las muestras de larvas de mosquitos, pulgas adultas y lutzomyias adultas son conservadas a temperatura ambiente en frascos conteniendo etanol de 70% o montadas en bálsamo de Canadá. • Las muestras de triatominos ninfas y adultos son conservadas a temperatura ambiente en cajitas de cartón protegidas entre capas de algodón.
Rhodnius sp Panstrongylus sp Triatoma sp
POST ANALISIS Emisión de resultados • Los resultados serán escritos en la base de datos del programa ACCESS y luego serán impresos y enviados a la Dirección respectiva Disposición final de la muestras • Una vez terminado el proceso de análisis las muestras se conservan en el laboratorio según lo establecido en el PRT-CNSP-006. Archivo de registros • Se utilizará el formulario XXX-PRT-CNSP-007 para registrar el control de calidad interno.
MUCHAS GRACIAS jvalle@ins.gob.pe