210 likes | 362 Views
Phénotypes et génotypes de la résistance aux antibiotiques chez Escherichia coli d’origine animale en Tunisie : Multirésistance des isolats aviaires, fond génétique riche et hétérogène
E N D
Phénotypes et génotypes de la résistance aux antibiotiques chez Escherichia coli d’origine animale en Tunisie : Multirésistance des isolats aviaires, fond génétique riche et hétérogène Dhifalli Rym1, Kilani Hajer1, Yolanda Saénz2, Mansouri Riadh1, Mehri Wahib1, Ben Chehida Noureddine1, Abbassi Mohamed Salah1 1Laboratoire de recherche de bactériologie, Institut de la Recherche Vétérinaire de Tunisie, Bab Saadoun, Tunis, Tunisie. 2Unidad de Microbiología Molecular, Centro de Investigación Biomédica de La Rioja, Logroño, Spain
LE TRANSFERT DE LA RESISTANCE Traitements et prophylaxie Médecine vétérinaire Médecine humaine Communauté Additifs dans l’alimentation des animaux Hôpital Agriculture Protection des plantes Environnement Utilisation industrielle
Etude de la résistance aux antibiotiques chez: Volaille, Bovin, Ovin Etude des gènes codant la résistance aux sulfamides et à la tétracycline OBJECTIFS Prévalence et caractérisation des structures des intégrons
Matériel & méthodes Sites de prélèvements
Matériel & méthodes 148 isolats de E. coli Antibiogramme • Isolement sur milieu MacConkey • Identification par Mini Galerie des Entérobactéries et Api20E (Bio-Mérieux) Extraction de l’ADN S R I PCR
3-Détection des gènes de résistance aux antibiotiques: tétracycline : tet(A), tet(B), tet(C) sulfonamides : sul1, sul2, et sul3 4- Etude des intégrons: a- Détection de la présence des integrons de classe 1 et de classe 2 (intI1 + intI2) b- Structures des régions variables des intégrons Cassette de gène Intégrase Promoteur attC qacEΔsul1 amorce anti-sens amorce sens
Matériel & méthodes Relations génétiques des isolats PFGE Digestion enzymatique par XbaI Analyse des pulsotypes selon les critères de Tenover et al, 1995.
Résultats Résistance aux antibiotiques
Résultats Une seule souche productrice de BLSE a été détectée à partir de poulet de chair: Premier cas en Tunisie
Résultats Etude moléculaire d’une collection de 88 isolats
Gènes de résistance détectés en relation avec des phénotypes de résistance tetC 1 31 6 16 1 6 3 3 1
Résultats Prévalence des intégrons • 60/88 (68%): intégrons+ • intI1 : 59 • intI2 : 2 • intI1 + intI2 : 2
Résultats IntI2 dfrA1 sat aadA1 Différents arrangements de gènes cassettes des intégrons de classe 1 Intégron de classe 2 : la structure classique des intégrons classe 2
Résultats Corrélation entre la résistance aux antibiotiques et la présence des intégrons
Résultats Corrélation entre la multirésistance et la présence des intégrons
Résultats Phylogénie : PFGE Grande diversité génétique : Les souches ne sont pas clonale
Conclusion 1- Résistance élevé à : La streptomycine (67,5%), la tétracycline (57,4%), le sulphonamide (46,6%), l’amoxicilline (42%), aux triméthoprime-sulfaméthoxazole (40,5%) et l’acide nalidixique (30,8%) ; 2- La résistance aux antibiotiques est plus importante chez les isolats aviaires que les isolats d’origine bovine et ovine, probablement liée aux pratiques d’élevages intensifs avicoles et à la forte utilisation des antibiotiques dans ce secteur; 3- Association entre présence d’intégrons et multirésistance aux antibiotiques
Perspectives • Etude génétique approfondie d’une collection plus importante ; • Recherche des gènes de virulence pour déterminer la relation virulence-résistance aux antibiotiques ; • Etablissement d’un système de surveillance de la résistance aux antibiotiques en médecine vétérinaire. • Sensibilisation des responsables du secteur avicole par les problèmes de l’antibiorésistance