1 / 23

Mimpi yang Harus Jadi Kenyataan sebagai Wujud Kreasi Anak Negeri

TEKNOLOGI TRANSPLANTASI SEL TESTIKULAR DALAM REKAYASA PRODUKSI TELUR IKAN NILEM MELALUI INDUK PENGGANTI DARI IKAN MAS. Ujang Subhan. Mimpi yang Harus Jadi Kenyataan sebagai Wujud Kreasi Anak Negeri. Rainbow trout juveniles produced by surrogated masu salmon.

hafwen
Download Presentation

Mimpi yang Harus Jadi Kenyataan sebagai Wujud Kreasi Anak Negeri

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. TEKNOLOGI TRANSPLANTASI SEL TESTIKULAR DALAM REKAYASA PRODUKSI TELUR IKAN NILEM MELALUI INDUK PENGGANTI DARI IKAN MAS Ujang Subhan Mimpi yang Harus Jadi Kenyataan sebagai Wujud Kreasi Anak Negeri

  2. Rainbow trout juveniles produced by surrogated masu salmon Donor-derived offspring from inter-species germ-cell transplantation were successfully produced (Takeuchi et al. 2004, Nature) Goro Yoshizaki: Simposium Bioteknol. Akuakul., ICC IPB-Bogor, 14 Agustus 2008.

  3. Primordial Germ Cells oogonia oocyte egg Primordial Germ Cell Sex differentiation 20mm spermatogonia spermatocyte sperm Goro Yoshizaki: Simposium Bioteknol. Akuakul., ICC IPB-Bogor, 14 Agustus 2008.

  4. Spermatogonial stem cells oogonia oocyte egg Primordial Germ Cell Sex differentiation 20mm spermatogonia spermatocyte sperm Goro Yoshizaki: Simposium Bioteknol. Akuakul., ICC IPB-Bogor, 14 Agustus 2008.

  5. Donor-derived offspring from spermatogonial transplantation (Okutsu et al. 2007, Science)

  6. Ikan Nilem Ikan Mas Ukuran induk 200 g > 1500 g Fekunditas sedikit Fekunditas 25% dari bobot tubuh

  7. Ikan mas sebagai Induk pengganti Telur dapat diproduksi lebih banyak Produksitelurlebihterjamin Lebihmenguntungkan Industri Kapiar

  8. Tujuan Penelitian: Spermatogonia Betina Jantan recipients Donor telur Donor sperma Baby fish Benih nilem

  9. Langkah Penelitian: • Karakterisasisel germinal testis ikannilem • Menentukanmetodedisosiasisel germinal • Analisikolonisasisel germinal testis ikannilempada gonad ikanmas (ikanresepien) Penelitian pendukung: • cDNA cloning and expression analysis of vasa-like gene padaikannilem • Marker DNA padaselgonadaldenganmetode PCR

  10. 1. Characterization of testicular germ cells in giant gouramy Spermatogonia Goro Yoshizaki: Simposium Bioteknol. Akuakul., ICC IPB-Bogor, 14 Agustus 2008.

  11. Testis dari ikan gurame ukuran 800 g Vas deferens Spermatid Spermatogonia-B Testis Spermatogonia-A Spermatosit spermatosit spermatid spermatogonia Sel testikular hasil disosiasi Histologi testis, pewarna HE 20 µl

  12. 2. Larutan disosiasi yang digunakan Tujuan penggunaan larutan disosiasi: diperoleh banyak sel spermatogonia dan viabel/hidup • Duajenislarutandisosiasi: • 1. Trypsin-phosphate buffer saline (Tryp-PBS) • 2. Trypsin-phosphate buffer saline/fetal bovine serum/DNase I (Tryp-PBS/FBS/DNase) • Lama inkubasi: 1, 2, 3, 4 dan 5 jam, • Suhuruang, • Trypan blue. Contoh hasil disosiasi pada ikan gurame Sel testikular ikan gurame hasil disosiasi. Tanda panah garis penuh: sel yang viabel; tanda panah garis putus: sel yang mati.

  13. Jumlah dan viabilitas sel testikular ikan gurame hasil disosiasi. • Kesimpulan: • Kedua larutan disosiasi bisa digunakan • Lama inkubasi ≤ 2 jam

  14. 3. Analisis sel donor pada ikan recipient • Tujuan: • Sel donor dapatterkolonisasidalamindividuresipien? • Umurresipiensaattransplantasimempengaruhipersentasekolonisasisel donor? • Sel donor hasildisosiasimenggunakankedualarutandisosiasidapatterkolonisasi? • Tahapan: • Pengembanganmetodeidentifikasisel donor dalamindividuikanresipien • Transplantasisel donor danpemeliharaanikanhasiltransplantasi • Analisiskolonisasi

  15. 3.1. Metode identifikasi sel donor dalam individu resipien: • Sel donor berlabel gen berpendar, green fluorescent protein (GFP); ikan transgenik • Injeksi mRNA GFP-vasa • Sel dilabel PKH26 (sel berwarna merah) • PCR, metode alternatif bila warna PKH26 hilang setelah ikan matang gonad Penelitian Strategis Internasional, DIPA IPB No.: 50/13.24.4/SPK/BG-PSN/2009

  16. Testes of vasa-GFP trout Recipient (non-tg) Intraperitoneal transplantation Testicular cell suspension Goro Yoshizaki: Simposium Bioteknol. Akuakul., ICC IPB-Bogor, 14 Agustus 2008.

  17. 3.1. Metode identifikasi sel donor dalam individu resipien: • Sel donor berlabel gen berpendar, green fluorescent protein (GFP); ikan transgenik • Injeksi mRNA GFP-vasa • Sel dilabel PKH26 (sel berwarna merah) • PCR, metode alternatif bila warna PKH26 hilang setelah ikan matang gonad   Penelitian Strategis Internasional, DIPA IPB No.: 50/13.24.4/SPK/BG-PSN/2009

  18. Cell labeling using PKH26 (Sigma): Disosiasi sel testikular : tripsin 0,5% dalam PBS selama 2 jamDosis PKH26 : 2 µl / 200 μl 

  19. 3.2. Transplantasi • Umur resipien vs. kelangsungan hidup benih ikan nila hasil transplantasi • Sel donor hasil disosiasi dengan larutan berbeda vs. kelangsungan hidup benih ikan hasil transplantasi, dan • Persentase kolonisasi Jarum mikroinjeksi Jarum mikroinjeksi

  20. Kelangsungan hidup benih ikan nila hasil transplantasi dan kontrol • Kelangsungan hidup ikan hasil transplantasi relatif sama

  21. Filter merah Tanpa filter Kontrol Transplantasi 3.3. Analisis kolonisasi sel donor dalam individu resipien Penelitian Strategis Internasional, DIPA IPB No.: 50/13.24.4/SPK/BG-PSN/2009

  22. Persentase kolonisasi sel donor ikan gurame dalam gonad ikan nila NA: belum dianalisis • Kesimpulan: • Sel spermatogonial ikanguramedapatterkolonisasidalam gonad ikannila • Kedualarutandisosiasidapatdigunakandalamdisosiasiseltestikularuntuktransplantasi

  23. TERIMA KASIH & SELAMAT BERKARYA UNTUK NEGERI YANG BERMARTABAT

More Related