620 likes | 880 Views
ΔΙΑΓΝΩΣΗ ΚΑΙ ΘΕΡΑΠΕΙΑ GRAM ΑΡΝΗΤΙΚΩΝ ΚΟΚΚΩΝ. Ομιλητής: ΑΝΤΩΝΗΣ ΚΑΡΑΜΠΟΥΡΝΙΔΗΣ Ειδικευόμενος βιοπαθολόγος ΝΕΠΘ. Συντονίστρια: Δρ. ΑΘΗΝΑ ΚΑΝΣΟΥΖΙΔΟΥ. ΜΗΝΙΓΓΙΤΙΔΟΚΟΚΚΟΣ. ΔΙΑΓΝΩΣΗ ΤΗΣ ΜΗΝΙΓΓΙΤΙΔΟΚΟΚΚΙΚΗΣ ΝΟΣΟΥ. Χαρακτηριστικά συμπτώματα (πετεχειώδες ή αιμορραγικό εξάνθημα)
E N D
ΔΙΑΓΝΩΣΗ ΚΑΙ ΘΕΡΑΠΕΙΑ GRAM ΑΡΝΗΤΙΚΩΝ ΚΟΚΚΩΝ Ομιλητής: ΑΝΤΩΝΗΣ ΚΑΡΑΜΠΟΥΡΝΙΔΗΣ Ειδικευόμενος βιοπαθολόγος ΝΕΠΘ Συντονίστρια: Δρ. ΑΘΗΝΑ ΚΑΝΣΟΥΖΙΔΟΥ
ΔΙΑΓΝΩΣΗ ΤΗΣ ΜΗΝΙΓΓΙΤΙΔΟΚΟΚΚΙΚΗΣ ΝΟΣΟΥ • Χαρακτηριστικά συμπτώματα (πετεχειώδες ή αιμορραγικό εξάνθημα) • Δείκτες φλεγμονής • Παθολογικά ευρύματα κατά την εξέταση του ΕΝΥ • Άμεσο παρασκεύασμα του ιζήματος του ΕΝΥ και του υλικού των πετεχειών • Καλλιέργεια του ΕΝΥ, του ρινοφαρυγγικού επιχρίσματος ή και του αίματος • Αναζήτηση των αντιγόνων του μηνιγγιτιδόκοκκου • Αναζήτηση αντισωμάτων IgM και IgG στον ορό • PCR στο ΕΝΥ ή στο αίμα
ΓΕΝΙΚΕΣ ΕΞΕΤΑΣΕΙΣ ΑΙΜΑΤΟΣ • Γενική αίματος(αύξηση αριθμού λευκών αιμοσφαιρίων με πολυμορφοπυρηνικό τύπο) Χαμηλός αριθμός λευκών αιμοσφαιρίων του αίματος <3.000/μl είναι ενδεικτικό σοβαρής νόσου και κακής έκβασης • ΤΚΕ(αυξημένη) • CRP(αυξημένη)
ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΤΟΥ ΜΗΝΙΓΓΙΤΙΔΟΚΟΚΚΟΥ • ΕΝΥ • Αίμα • Ρινοφαρυγγικό επίχρισμα • Υλικό από δερματική βλάβη (πετέχειες) • Στα παραπάνω δείγματα γίνεται άμεση ανίχνευση του μικροβίου και καλλιέργεια για την απομόνωση του
ΛΗΨΗ ΤΟΥ ENY • Η λήψη πρέπει να γίνεται πριν αρχίσει η χορήγηση αντιβιοτικών • Οσφυονωτιαία παρακέντηση • 2-3 αποστειρωμένα σωληνάρια • Μια ποσότητα σε σωληνάριο που περιέχει θρεπτικό ζωμό • Η εξέταση πρέπει να γίνει αμέσως ή το πολύ σε δύο ώρες • Εάν χρειαστεί ένα σωληνάριο διατηρείται στο ψυγείο για κυτταρολογική εξέταση και ένα άλλο στον κλίβανο
ΓΕΝΙΚΗ ΕΞΕΤΑΣΗ ΤΟΥ ΕΝΥ • Αυξημένος αριθμός κυττάρων με πολυμορφοπυρηνικό τύπο (>5.106 πολυμορφοπύρηνα/l) • Χαμηλός αριθμός λευκοκυττάρων σε ποσοστό 10% στα νεογνά • Αυξημένη πρωτεΐνη (>60mg/dl) • Το λεύκωμα στο ΕΝΥ μπορεί να είναι και μέσα στα φυσιολογικά πλαίσια (αρχικά στάδια μηνιγγίτιδας σε ποσοστό 20%) • Ελαττωμένη γλυκόζη ή γλυκόζη <40% της γλυκόζης του αίματος
ΑΜΕΣΟ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑ ΙΖΗΜΑΤΟΣ ΕΝΥ ΧΡΩΣΗ GRAM • Κυτταροφυγοκέντρηση1200 στροφές 5-10΄ • Φυγοκέντρηση στις 3500 στροφές 20΄ • Παρασκεύασμα από το ίζημα του ΕΝΥ. Στην περίπτωση αυτή είναι καλό να εφαρμόσουμε την τεχνική της «παχείας σταγόνας» • Σε θετικό άμεσο δίνεται αμέσως το αποτέλεσμα στην κλινική με περιγραφικούς όρους, π.χ. Gram αρνητικός διπλόκοκκος
ΑΜΕΣΟ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑ ΕΝΥ - ΧΡΩΣΗ GRAM • Gram (-) καφεοειδείς διπλόκοκκοι ενδοκυττάριοι και εξωκυττάριοι • Το έλυτρο εμφανίζεται ως ευδιάκριτη άλως • Ευαισθησία 75% • Η ευαισθησία εξαρτάται από τη συγκέντρωση των μικροβίων στο ΕΝΥ και από την προηγούμενη λήψη αντιβιοτικών • Στο αίμα σε ασθενείς με κεραυνοβόλο μηνιγγιτιδοκοκκαιμία
ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΤΟΥ ΕΝΥ • Το ίζημα του ΕΝΥ καλλιεργείται στα κατάλληλα θρεπτικά υλικά • Από την ανάπτυξη ακολουθεί ταυτοποίηση • Αντιβιόγραμμα
ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΑΝΤΙΓΟΝΟΥ ΣΤΟ ΕΝΥ • Η ευαισθησία της μεθόδου με latex είναι 61,7% • Σε περιπτώσεις μηνιγγίτιδας με αρνητικό άμεσο και αρνητική καλλιέργεια μπορεί να προσφέρει βοήθεια σε 5-9% των περιπτώσεων • Ανιχνεύονται πολυσακχαρίτες ειδικοί για τις συχνότερες οροομάδες (A, B, C) • Το αντιγόνοοροομάδας Β είναι λιγότερο αντιγονικό • Ίδιο με το αντιγόνο πολυσακχαρίτητης E.coli • Διάγνωση της μηνιγγίτιδας E.coli στα νεογνά
ΑΙΜΟΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ • Επί πυρετού και πριν χορηγηθούν αντιβιοτικά • Στα παιδιά καλλιεργούνται 1-3 ml αίματος • Στους μεγάλους καλλιεργούνται 5-10 ml αίματος • Για την καλλιέργεια αίματος συνήθως χρησιμοποιούνται αυτόματα μηχανήματα (BACTEC)
ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΡΙΝΟΦΑΡΥΓΓΙΚΟΥ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑΤΟΣ • Από τον ίδιο τον ασθενή, όταν χορηγούνται αντιβιοτικά και οι καλλιέργειες του ΕΝΥ και του αίματος είναι αρνητικές • Από τα μέλη του στενού οικογενειακού και φιλικού περιβάλλοντος
ΛΗΨΗ ΡΙΝΟΦΑΡΥΓΓΙΚΟΥ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑΤΟΣ • Λεπτός ρινοφαρυγγικός στυλεός (αλγινικό ασβέστιο) • Λαμβάνεται δείγμα από τον οπισθοφάρυγγα • Τοποθετείται σε κατάλληλο υλικό μεταφοράς Stuart ή Amies
ΥΛΙΚΟ ΑΠΟ ΔΕΡΜΑΤΙΚΕΣ ΒΛΑΒΕΣ ΑΜΕΣΟ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑ • Λήψη δείγματος με απόξεση από τις πετέχειες • Ένεση και αναρρόφηση με σύριγγα ινσουλίνης μιας μικρής ποσότητας αποστειρωμένου φυσιολογικού ορού στο χείλος της αλλοίωσης • Το δείγμα πρέπει να τοποθετείται σε αποστειρωμένο δοχείο • Χρώση Gram • Η εξέταση δεν επηρεάζεται από προηγηθείσα λήψη αντιβιοτικού
ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΣΤΟΝ ΟΡΟ - ELISA • Αναζήτηση IgM και IgG στον ορό • Aύξηση του τίτλου σε δύο δείγματα ή αύξηση των IgM σε ένα δείγμα • Τα αντιγόνα είναι είτε πρωτεΐνες της εξωτερικής μεμβράνης, είτε ο πολυσακχαρίτης ο ειδικός της οροομάδας • Aνιχνεύονται αντισώματα τουλάχιστον 14 ημέρες μετά την εμφάνιση της νόσου • Δεν προσφέρουν σημαντική βοήθεια στην έγκαιρη διάγνωση
ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΜΕΘΟΔΟΙ • Αναζήτηση του μηνιγγιτιδόκοκκου στο ΕΝΥ ή στο αίμα • Ιδιαίτερα στους ασθενείς που έχουν αρνητικές καλλιέργειες • Ιδιαίτερα χρήσιμη όταν στον ασθενή έχουν χορηγηθεί αντιβιοτικά και στις περιπτώσεις που αντενδείκνυται να γίνει ΟΝΠ • Η ευαισθησία της real time PCR αγγίζει το 87%, ενώ η ειδικότητα το 96%. Στην περίπτωση της multiplex PCR η ευαισθησία φτάνει το 93,9%
ΘΕΡΑΠΕΙΑ • Η έγκαιρη έναρξη της θεραπείας έχει ως αποτέλεσμα καλύτερη έκβαση της νόσου και μικρότερη θνητότητα • Γίνεται μόνο αναπνευστική απομόνωση έως 24 ώρες μετά την έναρξη της θεραπείας • Αντιβιοτικό εκλογής είναι η κρυσταλλική πενικιλλίνη G • Αν δεν υπάρχει ανταπόκριση η πενικιλλίνη πρέπει να αντικαθίσταται με κεφτριαξόνη ή κεφοταξίμη • Η διάρκεια θεραπείας είναι 7 ημέρες • Όταν η θεραπεία του ασθενούς γίνεται με πενικιλλίνη, μετά το πέρας της θεραπείας και πριν την επιστροφή του ασθενούς στο σπίτι χορηγείται ριφαμπικίνη
ΑΝΘΕΚΤΙΚΟΤΗΤΑ • Η αντοχή στην πενικιλλίνη και τις κεφαλοσπορίνες μπορεί να οφείλεται: • Στη σύνθεση τροποποιημένων PBP2, PBP3 (χρωμοσωματική) • Στην παραγωγή β-λακταμάσης (πλασμιδιακή)
ΑΝΘΕΚΤΙΚΟΤΗΤΑ • Στη χώρα μας δεν υπάρχουν δεδομένα αντοχής του μηνιγγιτιδόκοκκου στην πενικιλλίνη • Στην Ευρώπη η συχνότητα των στελεχών με «ενδιάμεση αντοχή» στην πενικιλλίνη έχει αυξηθεί σε πολλές χώρες
ΧΗΜΕΙΟΠΡΟΦΥΛΑΞΗ • Ο κίνδυνος νόσησης είναι μεγαλύτερος στα άτομα που έρχονται σε επαφή με ασθενείς την πρώτη βδομάδααπό την έναρξη της νόσου • Σε τρέχουσα βάση συνιστώνται για χημειοπροφύλαξη : • Ριφαμπικίνη • Σιπροφλοξασίνη • Κεφτριαξόνη (ασφαλής στην εγκυμοσύνη)
ΚΑΤΗΓΟΡΙΕΣ ΕΜΒΟΛΙΩΝ Πολυσακχαριδικά Συζευγμένα • Διδύναμο (A, C) • Βραχεία προστασία σε ποσοστό 85-100% σε μεγαλύτερα παιδιά και ενήλικες • Δεν παρέχει προστασία σε παιδιά <2 ετών • Τετραδύναμο (A, C, Y, W135) • Εμβόλιο κατά της οροομάδας C • Τετραδύναμο συζευγμένο εμβόλιο (A, C, Y, W135)
ΤΕΤΡΑΔΥΝΑΜΟ ΠΟΛΥΣΑΚΧΑΡΙΔΙΚΟ ΕΜΒΟΛΙΟ • Κυκλοφορεί με ένδειξη χορήγησης σε παιδιά >2 ετών • Η διάρκεια της ανοσίας φαίνεται ότι είναι τουλάχιστον 3 έτη σε παιδιά >4 ετών και 2-3 έτη σε παιδιά <4 ετών
ΣΥΖΕΥΓΜΕΝΑ ΕΜΒΟΛΙΑ • Η ανοσολογική απάντηση επιτυγχάνεται μέσω Τ-κυτταρικής ανοσίας, λόγω της σύζευξης του πολυσακχαρίτη με μια πρωτεΐνη φορέα • Ενισχυμένη ανοσολογική απάντηση στα βρέφη και παρατεταμένη διάρκεια προστασίας
ΣΥΖΕΥΓΜΕΝΑ ΕΜΒΟΛΙΑ ΕΜΒΟΛΙΟ ΚΑΤΑ ΤΗΣ ΟΡΟΟΜΑΔΑΣ C ΤΕΤΡΑΔΥΝΑΜΟ ΕΜΒΟΛΙΟ • Πολυσακχαρίτες μηνιγγιτιδοκόκκου οροομάδας C συζευγμένοι με μια πρωτεΐνη φορέα και φωσφορικό αργίλιο • Από το 2005 στο εθνικό πρόγραμμα εμβολιασμού • Δύο δόσεις στο πρώτο έτος της ζωήςκαι ακολουθεί μία επαναληπτική δόση στο δεύτερο έτος • Ενδείκνυται για την ενεργή ανοσοποίηση εφήβων και ενηλίκων που διατρέχουν κίνδυνο έκθεσης στιςοροομάδες A, C, W135 και Y
ΕΜΒΟΛΙΟ ΕΝΑΝΤΙ ΟΡΟΟΜΑΔΑΣ B • Η Ευρωπαϊκή Υπηρεσία Φαρμάκων γνωμοδότησε θετικά για το πρώτο εμβόλιο έναντι του μηνιγγιτιδόκοκκου B • Mείγμα 3 πρωτεϊνών (σταθερές στα στελέχη σε διαφορετικές γεωγραφικές περιοχές): NHBA (Neisserial Heparin Binding Antigen), fHbp (factor H binding protein), NadA (Neisseria adhesin A) • Αναπτύχθηκε με βάση την αποκωδικοποίηση του γονιδιώματος • Αναμένεται να είναι διαθέσιμο στην Ελλάδα μέσα στο 2013
ΔΙΑΓΝΩΣΗ - ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΓΙΑ ΕΞΕΤΑΣΗ • Τα δείγματα που εξετάζονται εξαρτώνται από το φύλο, τις σεξουαλικές πρακτικές και την κλινική μορφή • Ουρηθρικό έκκριμα • Ούρα • Τραχηλικό επίχρισμα • Φαρυγγικό επίχρισμα • Πρωκτικό επίχρισμα • Οφθαλμικό επίχρισμα • Αρθρικό υγρό • Aίμα
ΣΥΛΛΟΓΗ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ • Τα δείγματα πρέπει να συλλέγονται με στυλεούς απόDacron ή Rayonκαι όχι calcium alginate • Επίσης, ενδείκνυνται βαμβακοφόροι στυλεοί χωρίς την παρουσία λιπαρών οξέων • Αποδεκτό υλικό μεταφοράς με ζωικό άνθρακα • Χρησιμοποιούνται τα υλικά μεταφοράς Stuart ή Amiesμε ή χωρίς ζωικό άνθρακα και συστήματα μεταφοράς με συνθήκες CO2 (Gono-pack, JEMBEC)
ΣΥΛΛΟΓΗ ΟΥΡΗΘΡΙΚΟΥ ΕΚΚΡΙΜΑΤΟΣ • Αποφεύγεται η ούρηση για 3-4 ώρες πριν από τη λήψη του δείγματος • Το ουρηθρικό δείγμα λαμβάνεται διεισδύοντας προσεκτικά στυλεό με αλγινικό ασβέστιο κατά 2-3 cm εντός της ουρήθρας (ασυμπτωματικός άνδρας) • Η διαδικασία επαναλαμβάνεται και με δεύτερο στυλεό • Το πυώδες έκκριμα μπορεί να εξέλθει με έκθλιψη του πέους προς τα εμπρός και λήψη του υλικού με βαμβακοφόρο στυλεό
ΣΥΛΛΟΓΗ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ ΟΥΡΩΝ • Συνήθως εξετάζεται το πρώτο τμήμα της ούρησης στο οποίο ανευρίσκονται τα πυοσφαίρια σε ασθενείς με γονοκοκκική ουρηθρίτιδα • Η ανεύρεση δέκα ή περισσότερων πυοσφαιρίων ανά πεδίο, έχει υψηλή ευαισθησία για ουρηθρίτιδα
ΤΡΑΧΗΛΙΚΟ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑ • Ο ενδοτράχηλος είναι η συνηθέστερη θέση της λοίμωξης στις γυναίκες • Πρέπει να αποκαλύπτεται επαρκώς • Μετά την τοποθέτηση μητροσκοπίου απομακρύνεται με βαμβάκι ή γάζα η τραχηλική βλέννη • Λαμβάνεται το δείγμα με ελαφρά μετακίνηση του στυλεού από πλευρά σε πλευρά • Αφήνεται χρόνος για την προσρόφηση των βακτηρίων
ΣΥΛΛΟΓΗ ΠΡΩΚΤΙΚΟΥ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑΤΟΣ • Εισάγεται ο στυλεός σε βάθος 4-5 cm στον πρωκτικό σωλήνα • Μετακινείται από πλευρά σε πλευρά • Αφήνονται να παρέλθουν λίγα δευτερόλεπτα • Ο στυλεός αποσύρεται με ελαφρά περιστροφή • Αν στο στυλεό υπάρχει πολύ κοπρανώδες υλικό, λαμβάνεται άλλο δείγμα με νέο στυλεό • Τα πρωκτικά δείγματα μπορεί να είναι τα μόνα θετικά σε ασυμπτωματικές γυναίκες, καθώς και σε ομοφυλόφιλους και αμφιφυλόφιλους άνδρες
ΦΑΡΥΓΓΙΚΟ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑ • Στην υποψία έκθεσης του νεογνού κατά τη διάρκεια του τοκετού σε μολυσμένες εκκρίσεις της μητέρας • Σε περιπτώσεις μη συνηθισμένων σεξουαλικών πρακτικών Το φαρυγγικό επίχρισμα πρέπει να χρησιμοποιηθεί μόνο για καλλιέργεια
ΟΦΘΑΛΜΙΚΟ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑ • Στην ύπαρξη έλκους του κερατοειδούς χωρίς να έχει προηγηθεί τραυματισμός • Σε επιπεφυκίτιδα με πυώδες έκκριμα, υπεραιμία του επιπεφυκότα, οίδημα των βλεφάρων και οίδημα του επιπεφυκότα με αιμορραγίες • Σε επιπεφυκίτιδα των νεογνών (έντονα πυώδες έκκριμα τη 2η έως 4η ημέρα από τη γέννηση) • Λαμβάνεται έκκριμα του επιπεφυκότα από την έσω επιφάνεια του κάτω βλεφάρου με μικρό στυλεό
ΑΡΘΡΙΚΟ ΥΓΡΟ • Λαμβάνεται μεπαρακέντηση με σύριγγα • Μεταφέρεται σε φιάλη αερόβιας καλλιέργειας αίματος • Απομονώνεται μόνο στο 30% ασθενών με αρθρίτιδα και διαγνωσμένη γονοκοκκική νόσο • Μερικές φορές διαπιστώνεται στη μικροσκοπική εξέταση και όχι στην καλλιέργεια • Υψηλά επίπεδα ανοσοσυμπλεγμάτων • Τα λευκά αιμοσφαίρια στο αρθρικό υγρό είναι πολύ λιγότερα από τα αναμενόμενα
ΑΙΜΟΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ • Λαμβάνονται μόνο σε περιπτώσεις διάχυτης γονοκοκκικής λοίμωξης • Τα αποτελέσματα των αιμοκαλλιεργειών είναι γενικώς θετικά μόνο κατά τη διάρκεια της πρώτης εβδομάδας της λοίμωξης
ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΗ ΔΙΑΓΝΩΣΗ ΓΟΝΟΚΟΚΚΙΚΗΣ ΝΟΣΟΥ • Άμεση μικροσκοπική εξέταση των δειγμάτων • Καλλιέργεια • Αναζήτηση αντιγόνων σε ουρηθρικό και ενδοτραχηλικό έκκριμα • Αναζήτηση αντισωμάτων στον ορό • Αναζήτηση του νουκλεϊνικού οξέος
ΑΜΕΣΟ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑ - GRAM ΧΡΩΣΗ • Ο στυλεός δεν πρέπει να είναι ο ίδιος μ’ αυτόν για την καλλιέργεια • Ο στυλεός Stuart με άνθρακα δε δίνει καλή ευαισθησία • Καφεοειδείς ενδοκυττάριοι κυρίως ή και εξωκυττάριοι διπλόκοκκοι Gram αρνητικοί • Πρώιμη διάγνωση της πυώδους αρθρίτιδας
ΑΜΕΣΟ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑ - GRAM ΧΡΩΣΗ ΟΥΡΗΘΡΙΚΟ ΕΚΚΡΙΜΑ – ΤΡΑΧΗΛΙΚΟ ΕΠΙΧΡΙΣΜΑ • 90-95% ευαισθησία και 95-100% ειδικότητα σε άνδρες συμπτωματικούς και 50-70% ευαισθησία σε γυναίκες • Η ευαισθησία της στους ασυμπτωματικούς άνδρες είναι <60% • Συμπερασματικά, όλα τα αρνητικά αποτελέσματα σε γυναίκες και ασυμπτωματικούς άνδρες πρέπει να επιβεβαιώνονται με καλλιέργεια
ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΤΩΝ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ • Τα δείγματα καλλιεργούνται στα κατάλληλα θρεπτικά υλικά • Από την ανάπτυξη του μικροβίου ακολουθεί ταυτοποίηση • Αντιβιόγραμμα
ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΑΝΤΙΓΟΝΩΝ Άμεσος ανοσοφθορισμός Ανοσοενζυμικές μέθοδοι • Στο ουρηθρικό και στο ενδοτραχηλικό έκκριμα • Χρησιμοποιεί φθορίζον μονοκλωνικό αντίσωμα, που αναγνωρίζει επίτοπους της πρωτεΐνης porA της εξωτερικής μεμβράνης • Στο ουρηθρικό και στο ενδοτραχηλικό έκκριμα • Χρησιμοποιoύν πολυκλωνικά αντισώματα έναντι των επιτόπων της εξωτερικής μεμβράνης του γονοκόκκου • Αρκετές διασταυρούμενες αντιδράσεις
ΑΜΕΣΟΣ ΑΝΟΣΟΦΘΟΡΙΣΜΟΣ • Μικρή ποσότητα δείγματος αφήνεται να στεγνώσει σε πλάκα ανοσοφθορισμού • Μονιμοποιείται με θέρμανση • Επικαλύπτεται με αντιδραστήριο • Επωάζεται επί 15 λεπτά • Καλύπτεται με καλυπτρίδα • Στο μικροσκόπιο φθορισμού οι γονόκοκκοι φαίνονται ως φθορίζοντες διπλόκοκκοι με χρώμα πράσινου μήλου
ΟΡΟΑΝΤΙΔΡΑΣΕΙΣ • ELISA και RIA • Πρωτεΐνες των ινιδίων και ολιγοσακχαριδικά αντιγόνα χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση των αντισωμάτων στον ορό • Δε συνιστάται να γίνονται στη ρουτίνα • Ενδείξεις αποτελούν ειδικές καταστάσεις, όπως χρόνια γονόρροια, γονοκοκκική αρθρίτιδα κ.α.
ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΜΕΘΟΔΟΙ Μοριακές μέθοδοι για την άμεση ανίχνευση του DNA του μικροβίου από κλινικά δείγματα είναι: • NAAT’s • Probe tests (ανίχνευση rRNA) • Real time PCR
NAAT’s • Ταυτόχρονη ανίχνευση του C.trachomatis(multiplex PCR) • Eκτός των ουρηθρικών και τραχηλικών δειγμάτων χρησιμοποιούνται και για την ανίχνευση στα ούρα • Μεγαλύτερη ευαισθησία από την καλλιέργεια σε δείγματα που προέρχονται από το φάρυγγα και τον πρωκτό • Mειωμένη ειδικότητα που οφείλεται στην παρουσία μη παθογόνων ναϊσσεριών στα κλινικά δείγματα
ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΜΕΘΟΔΟΙ ΠΛΕΟΝΕΚΤΗΜΑ ΜΕΙΟΝΕΚΤΗΜΑ Αποδεδειγμένη μεγαλύτερη ευαισθησία από την καλλιέργεια Απαιτείται καλλιέργεια: • για τη τεκμηρίωση της γονοκοκκικής λοίμωξης των γεννητικών οργάνων • για τη διάγνωση των εξωγεννητικών γονοκοκκικών λοιμώξεων
ΕΜΠΕΙΡΙΚΗ ΘΕΡΑΠΕΙΑ • Ωςαρχική εμπειρική θεραπείαχρησιμοποιείται: • Ceftriaxone ή Cefiximeσε μία δόση. Ασφαλής και για τις έγκυες γυναίκες • Azithromycinσε μία δόση ή doxycyclineμε χορήγηση επί μία βδομάδα πάντα σε συνδυασμό με κεφτριαξόνη • Spectinomycin (τετρακυκλίνη) σε μία δόση • Μόνο μετά από δοκιμασία ευαισθησίας χρησιμοποιούνται: • Fluoroquinolones (ciprofloxacin) σε γενικευμένη γονοκοκκική λοίμωξη
ΑΝΤΟΧΗ ΣΤΑ ΑΝΤΙΒΙΟΤΙΚΑ ΑΝΤΙΒΙΟΤΙΚΟ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΣ • ΤΕΤΡΑΚΥΚΛΙΝΗ • ΜΑΚΡΟΛΙΔΕΣ • ΣΠΕΚΤΙΝΟΜΥΚΙΝΗ • ΝΕΟΤΕΡΕΣ ΚΙΝΟΛΟΝΕΣ • Τροποποίηση ριβοσώματος(30S, 50S) • Ενεργοποίηση ειδικής αντλίας εκροής • Τροποποίηση δομής ριβοσώματος (30S) • Τροποποίηση στόχου κινολονών
ΑΝΤΟΧΗ ΣΤΑ ΑΝΤΙΒΙΟΤΙΚΑ ΑΝΤΙΒΙΟΤΙΚΟ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΣ • ΚΕΦΑΛΟΣΠΟΡΙΝΕΣ 3ης ΓΕΝΕΑΣ (3GC) • ΣΥΝΔΥΑΣΜΟΙ ΑΝΤΙΒΙΟΤΙΚΩΝ • Σύνθεση μωσαϊκών PBP2 με μειωμένη συγγένεια για τις 3 GC • Μείωση διαπερατότητας κυτταρικής μεμβράνης