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Histoire de la Biologie Moleculaire

Les g

jonny
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Histoire de la Biologie Moleculaire

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Presentation Transcript

    9. Protocole de selection des mutants auxotrophes mis au point par Beadle et Tatum. Dans ce expériences, ils ont défini un milieu minimum composé de: Eau + glucose + sels minéraux + vitamines (biotine et thiamine)? La souche sauvage pousse sur milieu minimum. A l’opposé, on trouve des milieux complets, riches en molécules organiques, mais dont la composition n’est pas connue (milieu trop complexe). La selection des mutants se fait après mutagénèse sur des critères nutritionnels. Technique d’isolement (criblage négatif)? Croissance surmilieu complet Absence de croissance sur milieu minimum Cette technique permet de sélectionner des mutatnts qui ont perdu la capacité de synthétiser un composant essentiel. Ces mutants sont qualifiés de mutants auxotrophes. Ils ont essayé d’identifier la nature biochimique de la déficience. Ils ont ajouté un seul composé organique au milieu minimum. Dans l’exemple suivant ils ont pu selectionner une souche incapable de synthétiser l’arginine. Des expériences supplémentaires ont été necessaires pour identifier la nature des différents mutants. Ils ont essayé d’identifier des métabolites qui pourraient remplacer l’AA pour lequel les différents mutants sont déficients. Protocole de selection des mutants auxotrophes mis au point par Beadle et Tatum. Dans ce expériences, ils ont défini un milieu minimum composé de: Eau + glucose + sels minéraux + vitamines (biotine et thiamine)? La souche sauvage pousse sur milieu minimum. A l’opposé, on trouve des milieux complets, riches en molécules organiques, mais dont la composition n’est pas connue (milieu trop complexe). La selection des mutants se fait après mutagénèse sur des critères nutritionnels. Technique d’isolement (criblage négatif)? Croissance surmilieu complet Absence de croissance sur milieu minimum Cette technique permet de sélectionner des mutatnts qui ont perdu la capacité de synthétiser un composant essentiel. Ces mutants sont qualifiés de mutants auxotrophes. Ils ont essayé d’identifier la nature biochimique de la déficience. Ils ont ajouté un seul composé organique au milieu minimum. Dans l’exemple suivant ils ont pu selectionner une souche incapable de synthétiser l’arginine. Des expériences supplémentaires ont été necessaires pour identifier la nature des différents mutants. Ils ont essayé d’identifier des métabolites qui pourraient remplacer l’AA pour lequel les différents mutants sont déficients.

    10. Ils ont supposé que cet acide aminé était synthétisé en plusieurs étapes et ont fait l’hypothèse que 2 composés chimiquement voisin de l’arginine pouvaient faire partie de cette chaine de synthèse, la citrulline et l’ornithine. Tableau sur la croissance de diverses souches mutantes exigeant de l’arginine. Théorie selon laquelle il existe une correspondance directe entre un gène et une enzyme.Ils ont supposé que cet acide aminé était synthétisé en plusieurs étapes et ont fait l’hypothèse que 2 composés chimiquement voisin de l’arginine pouvaient faire partie de cette chaine de synthèse, la citrulline et l’ornithine. Tableau sur la croissance de diverses souches mutantes exigeant de l’arginine. Théorie selon laquelle il existe une correspondance directe entre un gène et une enzyme.

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