110 likes | 216 Views
BIM B Sc 200 7. Két tipus. 5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK. A .)T ermékkép zéshez egyszerre több különböz ő szubsztrát kell, hexokináz glükóz + (Mg)ATP Glükóz-6-foszfát + (Mg)ADP foszforilezés két termék
E N D
BIM BSc 2007 Két tipus 5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A.)Termékképzéshezegyszerre több különböző szubsztrát kell, hexokináz glükóz + (Mg)ATP Glükóz-6-foszfát + (Mg)ADP foszforilezés két termék B.) A másik esetben a reakció keverékben egy enzim és több különböző, lényegében alternatív szubsztrát. példák: a legtöbb biopolimer hidrolizáló enzim amiláz, amilo-glikozidázok, cellulázok proteinázok. Függetlenül attól, hogy ezekben az esetekben exo- vagy endo-enzimekről van-e szó, a reakció-keverékben egyidejűlegtöbb, különböző polimerizációs fokú szubsztrát van (lesz) jelen.
Random bi-bi reakciók 5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A1 • Random bi-bi reakciók • Határozott sorrendűbi-bi reakciók • Ping-pong mechanizmus sebesség meghatározó lépés véletlenszerű, mind S mind P oldalról BIMOLEKULÁS
5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A2 E mechanizmus és a nemkompetitívvagy a lineáris kevert típusú inhibíció között az a különbség, hogy itt a ternér EAB komplex katalitikusan aktív, azaz belőle termékek képződnek( míg az ESI komplex inaktív).
5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A3 • Határozott sorrendűbi-bi reakciók k3 a legkisebb, EABEPQ a sebesség meghatározó rapid ekvilibrium
5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A4 St-st levezetéssel: P B Mg(ADP) glükóz • Ping-pong mechanizmus F FOSZFORILÁLT FB EP HEXOKINÁZ EA EQ HEXOKINÁZ E Mg(ATP) glükóz-6P A Q
Ping-pong mechanizmus 5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A5 Lineweaver-Burk ábrázolás: Az egyenlet szimmetrikus, A és B felcserélhetõk). Rögzített B mellett A hatása DE!!! Hexokináz : nem kapunk ilyen ábrát.= nem ping-pong mechanizmusú a foszforiláció
Ping-pong mechanizmus 5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A6 A valódi görbesereg ezen az ábrán láthatóhoz hasonlít, Nem elég a mechanizmus tisztázásához: mind az 1) mind a 2) modell ugyanolyan L-B görbesereget mutat. A hexokináz reakció valódi mechanizmusának kiderítéséhez egy sor egyéb kinetikai vizsgálatot is el kell végezni
többszubsztrátos unkompetitiv emészteni való!!!!
5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK B Sok enzim képes egynél többféle szubsztrátnak az átalakítására is. Ilyen esetekben a különféle alternatív szubsztrátok versengenek egymással az enzim aktív helyé(i)ért. Hidrolitikus depolimeráz enzimek: sok azonos kötésre hatnak, pl. lizozim: komplex muko-poliszaharidokat, a sejtfal mureinjét bontja ( Gram+ baktériumokat elpusztítja). Az ilyen polimerekben a monomereket összekapcsoló kondenzációs kötések úgy viselkednek, mint egy-egy különálló szubsztrát. Az ilyen polimerek abban az értelemben sem tekinthetőek közönséges egyszerű szubsztrátoknak, hogy általában már eleve különböző lánchosszúságú polimerek keverékei. A hidrolitikus enzimek némelyike szelektivitást mutat aszerint, hogy a polimer mely részét bontja: exo-hidrolázok - láncvégi vagy közel láncvégi kötések endo-hidrolázok - láncon belüli kötések statisztikusan celluláz komplex, pektinázok, amilázok
5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK B1 MODELL: L. KOMP. INH.-nál Kapp≠0 eset! Külön- külön Együttes eredő, ha mindkét Si-ből ua termék lesz β-amiláz→maltóz, glükoamiláz→glükóz Ha csak az egyik S van jelen
END • VÉGE AZ 5. FEJEZETNEK