110 likes | 339 Views
18. VAJA:. LIPIDI II. Sestava jajčnega rumenjaka:. 100 g = 352 kcal voda: 50 g proteini: 16,1 g lipidi: 31,9 g ogljikovi hidrati: 0,2 g minerali: 1,7 g. V granulah (25 %): 15 % lipovitelini (HDL, 22 % lipidov) 6 % lipoproteini z nizko gostoto (LDL) 4 % fosvitin (glikofosfoprotein).
E N D
18. VAJA: LIPIDI II
Sestava jajčnega rumenjaka: • 100 g = 352 kcal • voda: 50 g • proteini: 16,1 g • lipidi: 31,9 g • ogljikovi hidrati: 0,2 g • minerali: 1,7 g
V granulah (25 %): 15 % lipovitelini (HDL, 22 % lipidov) 6 % lipoproteini z nizko gostoto (LDL) 4 % fosvitin (glikofosfoprotein) V plazmi (75 %): 65 % lipovitelini (LDL, 84 - 90% lipidov) 10 % livetini (vodotopni; , , ; 2:5:3) Proteini jajčnega rumenjaka
Minerali: Na+, K+, Mg2+, Ca2+ Mn2+, Fe2+, Cu2+, Zn2+ P Cl-, F-, I- Se Vitamini: A, C, D, E B1, B2, B6, B12 nikotinamid pantotenska kislina biotin folna kislina Jajčni rumenjak
Lipidi jajčnega rumenjaka(32 %) • maščobne kisline: palmitinska, stearinska, oleinska, linolna, linolenska, arahidonska; • holesterol (1,4 %); • fosfolipidi (28 %): lecitin; • trigliceridi (66 %).
Analiza lipidov iz jajčnega rumenjaka • Tankoplastna kromatografija (TLC) 20 × 20 cm plošče s Silikagelom Topilo II Topilo I Vzorci: A B C Chol PC SM oleinska k. - 1 cm od roba - 2 cm od sp. roba nanesemo vzorce (3 L) na 3 cm narazen (ob straneh 1 cm prostora) - 1,5 cm od roba
Analiza lipidov iz jajčnega rumenjaka • TLC: Plošče (stacionarna faza) z nanešenimi vzorci previdno vstavi v kromatografsko komoro, v kateri je mobilna faza in jih razvij! • Mobilna faza: • mešanica topil I: kloroform-metanol-voda (v/v/v 60:30:5) • mešanica topil II: heksan-dietileter-ocetna k. (v/v/v 80:20:1,5)
Analiza lipidov iz jajčnega rumenjaka • Detekcija lipidnih lis: CE TG FFA Chol PE PC SM LPC
Analiza lipidov iz jajčnega rumenjaka • Detekcija lipidnih lis: • nedestruktivna metoda: ploščo našpricaj s primulinom (0,01% raztopina v mešanici aceton-voda (60:40)). Pod UV lučko vidiš rumene lise na temnem ozadju. Lipidne lise označi s svinčnikom. • destruktivna metoda: ploščo našpricaj s fosfomolibdensko kislino (20% raztopina v etanolu) in peči v sterilizatorju (100°C). Lipidi so vidni kot temne lise na svetlorumeno-zelenem ozadju.
Analiza lipidov iz jajčnega rumenjaka • Specifična detekcija: • Fosfolipidov in SM: ploščo našpricaj s 60-70%HClO4 in segrej na 250°C v sterilizatorju. Ko izginejo temne lise in kislina izhlapi, plošče ohladi in našpricaj z Jungnickel-ovim reagentom. Spojine s fosforjem so vidne kot svetlo zelene lise na oranžnem ozadju. • Glikolipidov: Ploščo našpricaj z N-(1-naftil)-etilendiaminom in peči v sterilizatorju (125°C, 10 min). Glikolipidi so vidni kot roza lise na belem ozadju, a hitro izginejo, zato jih označi s svinčnikom.
Analiza lipidov iz jajčnega rumenjaka • Specifična detekcija: • Lipidov z amino skupino (PE, PS in njuni lizo-derivati): ploščo našpricaj z ninhidrinskim reagentom in peči v sterilizatorju (100°C, 10 min). Lipidi z amino skupino so vidni kot rdeče-vijolične lise na belem ozadju.