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Crescimento Microbiano. Introdução. Aumento em tamanho da população Aumento no número de células Aumento da massa celular Duplicação Fissão binária Tempo de geração Curva do crescimento microbiano. Crescimento Microbiano. Fonte de carbono Energia Aceptor de elétrons
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Introdução • Aumento em tamanho da população • Aumento no número de células • Aumento da massa celular • Duplicação • Fissão binária • Tempo de geração • Curva do crescimento microbiano
Crescimento Microbiano • Fonte de carbono • Energia • Aceptor de elétrons • Doador de elétrons • H2O
Crescimento Microbiano • Nutrientes orgânicos: aminoácidos, vitaminas, purinas e pirimidinas • Nutrientes inorgânicos: macro e micro • Condições ambientais: pH, temperatura, potencial hídrico, condutividade, pressão, potencial redox, superfície para crescimento
Grupos nutricionais • Fotoautotróficos: luz é energia para sintetizar ATP, e CO2é fonte de C para sintetizar compostos orgânicos (bactérias fotossintéticas, cianobactérias, algas, etc.) • Fotoheterotróficos: luz é energia para sintetizar ATP, mas o C é obtido em formas orgânicas mais complexas
Grupos nutricionais • Quimioautotróficos: energia obtida pela oxidação de compostos inorgânicos como H2S, NH3, e Fe2+, e CO2 como fonte de C (bactérias que oxidam S, bactérias nitrificadoras, bactérias que oxidam H2, bactérias que oxidam Fe) • Quimioheterotróficos: energia e C obtidos de moléculas orgânicas complexas
Fatores que afetam o crescimento • Fatores químicos: • pH: • neutrófilos – pH ≈ 7.0 • acidófilos – pH < 7.0 • alcalófilos – pH > 7.0 • Importância: • Atividade enzimática • Conformação protéica • Disponibilidade de metais e elementos orgânicos
Fatores que afetam o crescimento • Fatores químicos: • O2: • Aeróbicos obrigatórios • Anaeróbicos obrigatórios • Anaeróbicos facultativos • Microaerófilos • Aerotolerantes • Importância: • Respiração • Reações de óxido-redução • Atividade enzimática
aeróbios anaeróbios anaeróbios microaerófilos anaeróbios obrigatórios obrigatórios facultativos aerotolerantes
Fatores que afetam o crescimento • Fatores químicos: • Capacidade de troca de íons: • Importância: • Disponibilidade de nutrientes • Ligações substrato-microrganismo • Defesa • Atração de íons
Fatores que afetam o crescimento • Fatores físicos: • Temperatura: • Psicrófilos: - 5 C a 20 C • Mesófilos: 20 C a 50 C • Termófilos: 50 C a 80 C • Termófilos extremos: acima de 80 C • Importância: • Respostas enzimáticas • Respostas a choques térmicos • Razão de crescimento
Fatores que afetam o crescimento • Estratégias de adaptação às altas temperaturas • membranas • ácidos graxos • proteínas • tipo de aminoácido • velocidade de renovação das células • Taq polimerase (Thermus aquaticus) • ácidos nucléicos • maior concentração de C≡G
Fatores que afetam o crescimento • Fatores físicos: • Pressão osmótica (NaCl): • Halotolerantes • Halófilos • Halófilos extremos • Pressão hidrostática • Barotolerantes • Barófilos
Halofílicas extremas Habitat de Archaea: Great Salt Lake, Utah, EUA
Halofílicas extremas Evaporadores na Baía de São Francisco, Califórnia, EUA
Fatores que afetam o crescimento • Fatores físicos: • Textura do substrato • Estrutura do substrato • Porosidade do substrato • Agregação do substrato • Água do substrato
Fatores que afetam o crescimento • Fatores biológicos: • Fauna e o substrato • Ingestão • Ciclagem de nutrientes • Composição da comunidade • Interações microbianas • Neutralismo • Comensalismo • Sinergismo • Mutualismo • Biodisponibilidade • Adsorção • Solubilidade • Especiação química • Competição • Amensalismo/Antagonismo • Parasitismo • Predação
Crescimento microbiano • Expressão matemática do crescimento • progressão geométrica do número 2: • 1 2 4 8 16 32 ......... X • 2º 21 22 23 24 25 ......... 2n
Crescimento microbiano • Tempo de geração: tempo necessário para a divisão das células • depende da espécie e das condições de crescimento • g = t/n, onde: • g = tempo de geração • t = tempo de crescimento • n = número de gerações dentro de um tempo t de crescimento
Crescimento microbiano • A relação entre o número de células e de gerações pode ser expressa em uma série de equações matemáticas: • sendo a população inicial = N0 • 1ạ geração = 2N0 • 2ạ geração = 2 x 2N0 = 22 x N0 • 3ạ geração = 2 x 22N0 = 23N0 • nạ geração = 2nN0 população final (N) = N0 x 2n (1)
Crescimento microbiano • A relação entre o número de células e de gerações pode ser expressa em uma série de equações matemáticas: • sendo a população inicial = 10 • 1ạ geração = 2 10 = 2 • 2ạ geração = 2 x 2 10 = 22 x 10 = 4 • 3ạ geração = 2 x 22 10 = 23 10 = 8 • nạ geração = 2nN0 população final (N) = N0 x 2n (1)
Curva de crescimento Microbiano • Fases de crescimento: lag, exponencial (log), estacionária, declínio
Medidas do crescimento • Medidas diretas • Contagem de células totais • Câmaras de Petroff-Hausser e de Neubauer • Contagem dos viáveis
Medidas do crescimento Contagem microscópica direta: Câmara de Petroff-Huasser
Medidas do crescimento Contagem dos viáveis
Contagem dos viáveis utilizando a técnica das diluições em série
Medidas do crescimento • Medidas indiretas • Turbidez