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Curso-Taller : Marcadores Moleculares: Útiles Herramientas para la Botánica. Dr. José Luis Díaz De León Álvarez Universidad Autónoma de Baja California Sur Lab. de Biotecnología Vegetal. OBJETIVO.
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Curso-Taller: Marcadores Moleculares: Útiles Herramientas para la Botánica Dr. José Luis Díaz De León Álvarez Universidad Autónoma de Baja California Sur Lab. de Biotecnología Vegetal
OBJETIVO • Revisar los conceptos básicos empleados en la Biología Molecular para crear marcadores moleculares, específicamente microsatélites, así como su aplicación en la botánica para discriminar entre genotipos, identificar o confirmar híbridos, o para producir patrones de identificación de variedades, utilizando el trigo harinero como modelo biológico
METAS • Actualizar el conocimiento sobre las metodologías biotecnológicas para el mejoramiento de plantas. • Actualizar el conocimiento sobre los conceptos: RFLPs, AFLPs, RAPDs, SSRs, SNPs y microsatélites en plantas • Demostrar las metodologías para el aislamiento y purificación de ADN, amplificación de microsatélites, patrones de restricción y aplicación como herramienta para determinar identidad.
METAS • Demostrar la actividad hidrolítica de las enzimas de restricción • Demostrar la metodología de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) • Demostrar la metodología para la resolución electroforética de productos amplificados por PCR.
HERRAMIENTAS • CONFERENCIAS • DEMOSTRACIONES • MANUAL DEL CURSO-TALLER
ACTIVIDADES • CONFERENCIAS: • ADN: CONCEPTOS BÁSICOS • LA BIOTECNOLOGÍA APLICADA AL MEJORAMIENTO DE PLANTAS • TÉCNICAS MOLECULARES: UNA INTRODUCCIÓN • MARCADORES MOLECULARES: MAAPS, AFLPs, STS, SNP y MICROARREGLOS. • DISCUSIÓN GENERAL
ACTIVIDADES • DEMOSTRACIONES • AISLAMIENTO DE ADN DE GRANOS DE TRIGO HARINERO • AMPLIFICACIÓN DE MICROSATÉLITES POR PCR • PATRONES DE RESTRICCIÓN DE LAS ENZIMAS EcoRI, HindIII, PstI Y MseI • Patrón de identidad de ADN (DNA fingerprinting) • Patrón de restricción de Lamda ADN • RESOLUCIÓN ELECTROFORÉTICA DE PRODUCTOS OBTENIDOS POR DIGESTIÓN CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN Y DE LOS MICROSATÉLITES AMPLIFICADOS EN GELES DE AGAROSA
Protocolos • Manual del curso-taller • Introducción........................................................................................ 6 • Materiales.............................................................................................7 • Protocolo para la extracción de ADN................................................8 • Protocolo para la PCR.......................................................................11 • Protocolo para patrones de restricción e identidad.......................13 • Electroforesis.................................................................................... 15 • Protocolos de Tinción de geles....................................................... 22 • Bibliografía.........................................................................................25