230 likes | 586 Views
TRADUCCIÓ. Formació de l’enllaç peptidic. ACTIVACIÓ DELS AMINOÀCIDS. Les aminoacil-tRNA sintetases catalitzen la unió d’un aminoàcid al seu corresponent tRNA. Interpreten el codi genètic. Generalment hi ha una aminoacil-tRNA sintetasa per aminoàcid.
E N D
TRADUCCIÓ Formació de l’enllaç peptidic
ACTIVACIÓ DELS AMINOÀCIDS Les aminoacil-tRNA sintetases catalitzen la unió d’un aminoàcid al seu corresponent tRNA Interpreten el codi genètic. Generalment hi ha una aminoacil-tRNA sintetasa per aminoàcid Les aminoacil-tRNA sintetases tenen un centre catalític i un centre corrector Aminoacil-tRNA sintetasa
Aminoàcid + ATP Aminoacil-AMP + 2Pi Aminoacil-AMP + tRNA Aminoacil-tRNA + AMP DGº’ = -29 kJ/mol Aminoàcid + ATP + tRNA Aminoacil-tRNA + AMP + 2Pi ACTIVACIÓ DELS AMINOÀCIDS Gln-tRNAsintetasa Asp-tRNA sintetasa
ACTIVACIÓ DELS AMINOÀCIDS Thr Ser Val Treonil-tRNA sintetasa
ACTIVACIÓ DELS AMINOÀCIDS tRNAAla Les aminoacil-tRNA sintetases reconeixen la regió acceptadora i l’anticodó L’extrem 3’ dels tRNAs es pot moure del centre catalític al centre corrector
RIBOSOMES Svedberg A procariotes la transcripció i la traducció són simultànies
RIBOSOMES Cicle ribosomal El mRNA pot ser traduït simultàniament per molts ribosomes (polisomes)
RIBOSOMES El rRNA juga un paper central en la funció dels ribosomes L’activitat peptidil transferasa correspon al rRNA 23S. Les proteïnes estan localitzades en la superfície ribosomal i tenen una funció estructural Hi ha tres llocs on es fixen els tRNAs El lloc d’unió del tRNAs esta format en la interfase entre les subunitats ribosomals
TRADUCCIÓ Les proteïnes es comencen sintetitzar per l’extrem N-terminal Els mRNA es comencen a llegir per l’extrem 5’ +H3N-Lys-(Lys)n-Asn-COO- 5’A-A-A-(A-A-A)n-A-A-C3’
TRADUCCIÓ A procariotes l’aminoàcid iniciador és la formilmetionina La metionina es formila després d’unir-se al tRNA iniciador
TRADUCCIÓ Seqüència iniciadora en procariotes La seqüència Shine-Dalgarno es troba a l’extrem 5’ dels mRNAs de procariotes Aquesta seqüència es complementaria a una seqüència present en el rRNA 16S L’aparellament entre aquests RNAs posiciona el codó d’iniciació en el lloc P del ribosoma
TRADUCCIÓ Iniciació de la síntesi de proteïnes El formilmetionil-tRNAifmet és l'únic que entra en el lloc P del ribosoma, la resta entren pel lloc A. L’IF3 s’uneix a la subunitat petita i bloqueja la unió amb la subunitat gran L’IF1 evita la unió d’altres aa-tRNAs al lloc A L’IF2 transporta el fMet-tRNAifMet al ribosoma L’IF2 és una GTPasa Quan l’aparellament codó/anticodó s’ha format s’allibera l’IF3 i entra la subunitat gran La subunitat gran activa l’activitat GTPasica de l’IF2
TRADUCCIÓ Fase de elongació La resta d’aminoacils-tRNAs són transportats al ribosoma per l’EF-Tu L’EF-Tu és una GTPasa Quan s’ha format correctament l’aparellament codó/anticodó el GTP s’hidrolitza Una vegada hidrolitzat el GTP l’EF-Tu surt del ribosoma L’EF-Tu unit a GDP no te afinitat pels aminoacils-tRNAs L’intercanvi de GDP per GTP és catalitzat per l’EF-Ts
TRADUCCIÓ Fase de elongació El rRNA 16S contribueix a la fidelitat de la traducció El rRNA 23S és el responsable de l’activitat peptidiltransferasa El rRNA 23S interacciona amb els extrems CCA dels tRNAs
TRADUCCIÓ Fase de elongació L’EF-G (translocasa) és una GTPasa que nomes s’uneix al ribosoma quan té GTP unit L’EF-G s’uneix al lloc A de la subunitat gran La unió de l’EF-G al ribosoma provoca la hidròlisi del GTP Es dona un canvi conformacional en l’EF-G que fa que ocupi el lloc A de la subunitat petita EF-Tu-tRNA EF-G
TRADUCCIÓ Finalització de la síntesi de proteïnes Els codons de finalització són reconeguts per proteïnes anomenades factors d’alliberament (RF) Els RF reconeixen els codons de finalització i activen la hidròlisi de l’enllaç entre el pèptid i el tRNA El factor de reciclatge del ribosoma (RRF) és necessari en la separació de les dues subunitats ribosomals
eIF4E Uneix el cap eIF4G Factor estructural eIF4A Helicasa TRADUCCIÓ EN EUCARIOTES eIF4F
Peptidil puromicina Inhibidors de la síntesi de proteïnes Entra al lloc A del ribosoma, s’uneix covalentment a l’últim aminoàcid i provoca la finalització prematura de la síntesi proteica
Inhibidors de la síntesi de proteïnes S’uneix al lloc A bloquejant l’entrada dels aminoacil-tRNAs Inhibeix la peptidil transferasa de procariotes, mitocòndries i cloroplasts En procariotes provoca errors en la lectura dels mRNAs a baixes concentracions. A altes concentracions inhibeix la iniciació Inhibeix la peptidil transferasa d’eucariotes