BIOTECNOLOGIA 1ª PARTE: OGM´s e Testes de DNA

1. BIOTECNOLOGIA1ª PARTE: OGM´s e Testes de DNA Claudio Paris – Magrão prof.magrao@gmail.com

2. HISTÓRICO – Eventos Importantes • Produção de Insulina humana por engenharia genética • Produção de Penicilina em escala industrial • Identificação do material genético • Tecnologia do DNA recombinante • Estrutura do DNA • Desenvolvimento de anticorpos monoclonais • Técnica de PCR (Reação em cadeia da Polimerase) • Primeiro uso da terapia gênica • Clonagem da ovelha Dolly • Projeto genoma • Código genético decifrado • Síntese in vitro do DNA 1988 1990 1943 1944 1953 1956 1973 1975 1982 1996 2000 -03 1961-66 goulart@ucg.br

3. Biotecnologia Conjunto de conhecimentos técnicos e métodos, de base científica ou prática, que permite a utilização direta ou indireta de organismos ou seres vivos como parte integrante e ativa do processo de produção industrial de bens e serviços.

4. Biotecnologia • Conjunto de técnicas que usam organismos vivos ou partes destes para produzir ou modificar produtos, melhorar geneticamente plantas e animais, ou desenvolver microrganismos para fins específicos

5. Biotecnologia As técnicas de biotecnologia servem-se da engenharia genética, biologia molecular, biologia celular e outras disciplinas. Seus produtos são usados nos campos científico, agrícola, médico e ambiental.

6. Engenharia genética É a técnica do DNA recombinante, utiliza-se das enzimas de restrição ou endonucleases, moléculas originárias de bactérias que atuam como tesouras moleculares permitindo a manipulação de genes.

7. ENGENHARIA GENÉTICA Princípios Técnicas

8. Replicação Transcrição Tradução (Síntese de Proteínas) goulart@ucg.br

9. Enzimas de restrição ou Endonucleases Principais ferramentas da Engenharia Genética

11. Enzimas de Restrição - 1953 – Restrição crescimento de fagos - Presença de endonucleases - Degradação DNA viral goulart@ucg.br

12. Enzimas de restrição circundam a molécula de DNA no ponto a ser digerido, cortando-a em locais específicos.

13. goulart@ucg.br

14. 1.Criar uma bactéria recombinante com o gene desejado. 2. Permitir que a bactéria infecte células da planta. 3. Genes desejados são inseridos nos cromossomos das plantas. Como surge uma planta transgênica?

15. Qual sua opinião sobre o consumo de alimentos geneticamente modificados?

17. Qual sua opinião sobre o consumo de alimentos geneticamente modificados?

19. Qual sua opinião sobre o consumo de alimentos geneticamente modificados?

20. BIOTECNOLOGIA • Tradicional - Seleção de organismos – caract. Desejáveis / cruzamento - + tempo – transferências de genes NÃO desejáveis • Moderna - Transferência APENAS de genes desejáveis - Doador – espécie diferente - + preciso, + rápido e + eficiente

21. O que são organismos geneticamente modificados? Involve a inserção de DNA de um organismo em outro OU a modificação do DNA do próprio organismo pelas técnicas do DNA recombinante Transgênico

22. MANIPULAÇÃO GENÉTICA Técnica DNA Recombinante ou Engenharia genética - Expressão DNA exógeno – espécies diferentes - Novos organismos – características não encontradas na natureza

23. ARARA OMO ANA ARARA OMO ANA Enzimas de Restrição - Sítio de reconhecimento – - Reconhecem de 4 a 8 pb - Cortes com extremidades abruptas / coesivas - Clonagem molecular - ~ 1.073 enzimas diferentes

24. Enzimas de Restrição - Clivagens

26. Eletroforese - Conhecida desde 1930 - Difundida 1950-1960 - Movimentação de moléculas – campo elétrico - Matriz – Agarose / Poliacrilamida - Separa proteínas – carga elétrica / peso molecular - Separa ácido nucléico – peso molecular

27. Eletroforese

28. Eletroforese

29. TESTE - DNA FINGER PRINT

30. TESTE - DNA FINGER PRINT

31. O exame de paternidade baseia-se na identificação de marcas genéticas específicas no DNA de células sanguíneas da mãe, do filho e do suposto pai.     O esquema mostra padrões de DNA de um casal (mãe e pai) e seus quatro filhos: F1- filho biológico do casal, F2 - filho somente da mãe, F3 - filho biológico do casal e F4 - filho adotivo do casal. 

33. Clonagem Molecular

35. Plasmídeo Plasmídeo Recombinante Plasmíeo + Inserto Plasmídeo - Extracromossômico - Fita dupla - Conjugação - Circular - Resistência à antibióticos - Insertos até 4.000 pb

37. Plasmídeo Plasmídeo Recombinante Plasmídeo + Inserto Clonagem Molecular

38. Clonagem Molecular

41. DÚVIDAS ???

42. Gel de agarose + corrente e- Revelação UV

43. 4º Passo: Comparação entre pedaços de DNA da mãe criança e dos supostos pais, em busca de semelhanças. Metade dos fragmentos de DNA devem ser iguais aos da mãe e a outra metade do pai.

45. Muito obrigado pela atenção.