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Resultados de la restricción del plásmido

Resultados de la restricción del plásmido. Nov, 2010. Std de peso molecular: Lambda Hind III Ladder. The λ Hind III DNA Ladder is prepared by restriction digestion of phage Lambda DNA to completion with Hind III, followed by heat inactivation of the enzyme.

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Presentation Transcript

  1. Resultados de la restricción del plásmido Nov, 2010

  2. Std de peso molecular: Lambda HindIII Ladder • The λ HindIII DNA Ladder is prepared by restriction digestion of phage Lambda DNA to completion with HindIII, followed by heat inactivation of the enzyme. • The resulting 7 fragments range from 564 base pairs to 23.13 kilobases in size. • 564, 2027, 2322, 4361, 6557, 9416, 23130 bp

  3. Gel modelo 1 2 3 4 5 6 T • Std de peso molecular • Sin restringir • Sin muestra • Restringido con 2 enzimas • Restringido con 2 enzimas e incubado toda la noche • Restringido 1 enzima VR P Inserto RNA T= topoisómeros; P= plásmido vacío; VR= vector+inserto

  4. Comentarios • Sólo los geles del equipo 3 y 7 muestran bandas. • Para su discusión y reporte pueden usar estos dos geles y también el gel modelo. • Lo siento chicos.

  5. Equipos 1 y 2 SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz • El mismo gel de la derecha, solo que inverti los colores y si se logran ver bandas de alto peso molecular. Aunque no hay mucha diferencia entre tratamientos

  6. Equipos 4 y 3 SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz • En este gel al que le invertí los colores se logra ver una bandita tenue que marque con una flecha como posible inserto. • Solo se logran ver bandas en el gel del equipo 3, en el del cuatro parece que hay algo pero no es muy claro.

  7. Equipos 6 y 5 • Ya le moví la intensidad al gel y no se logra ver nada. Solo el std. 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz

  8. Equipo 7 Std SD 1Enz 2Enz • Muy bien chicos, • Se ve claramente que la cantidad de topoisómeros disminuye cuando ponen 1 enzima y más cuando ponen 2 enzimas • En el gel sobrepuesto, invertí los colores y cambie la intensidad, se observan más claramente las bandas pero aún no se nota la banda del inserto. • Creó que lo que sucedió es que hay menos DNA en el carril de las dos enzimas, porque todas las bandas están más tenues.

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