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Alta resolução microscopia 4 

Alta resolução microscopia 4 . Cristina Mary Orikaza Toqueiro. Resolução de Imagens. Componentes modernos de lentes. Difração das ondas de luz visível. Design óptico auxiliado por computador. http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm. Resolução de Imagens.

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Alta resolução microscopia 4 

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  1. Alta resoluçãomicroscopia 4  Cristina Mary Orikaza Toqueiro

  2. Resolução de Imagens Componentes modernos de lentes Difração das ondas de luz visível Design óptico auxiliado por computador http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm

  3. Resolução de Imagens Componentes modernos de lentes Difração das ondas de luz visível Design óptico auxiliado por computador Limite máximo de resolução óptica Barreira de Difração de Abbe http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm

  4. Resolução de Imagens Componentes modernos de lentes Difração das ondas de luz visível Design óptico auxiliado por computador Limite máximo de resolução óptica Barreira de Difração de Abbe Ernst Abbe (1873) – físico alemão Ponto focal NA  Índice de refração http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm

  5. Resolução de Imagens Componentes modernos de lentes Difração das ondas de luz visível Design óptico auxiliado por computador Limite máximo de resolução óptica Barreira de Difração de Abbe Ernst Abbe (1873) – físico alemão Ponto focal NA o menor nível de detalhe que pode, eventualmente, ser trabalhada , e que as estruturas periódicas têm maior frequência espacial (comprimentos de onda mais curtos) não serão transferidos para a imagem.  Índice de refração estruturas menores que meio  http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm

  6. Resolução de Imagens Ernst Abbe (1873) – físico alemão Resolução x,y = Resolução z = http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html

  7. Resolução de Imagens Ernst Abbe (1873) – físico alemão Resolução x,y = 0,61 d min ≠ Airy Alongado no eixo z Resolução z = http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html

  8. Resolução de Imagens Ernst Abbe (1873) – físico alemão Resolução x,y = 0,61 d min ≠ Airy Alongado no eixo z Resolução z = http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html

  9. Resolução de Imagens Ernst Abbe (1873) – físico alemão Resolução x,y = 0,61 d min ≠ Airy Alongado no eixo z Resolução z = O “ideal”: uma frente de onda esférica cheia, de um ângulo sólido de 4conduziria a um ponto esférico. http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html

  10. Resolução de Imagens Ernst Abbe (1873) – físico alemão Resolução x,y = 0,61 d min ≠ Airy Alongado no eixo z Resolução z = O “ideal”: uma frente de onda esférica cheia, de um ângulo sólido de 4conduziria a um ponto esférico. melhoria da resolução espacial no eixo axial (z) http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www.microscopyu.com/articles/superresolution/diffractionbarrier.html

  11. Qualidade e Função dos Laseres  Ondas coerentes  Interferência construtiva

  12. Qualidade e Função dos Laseres  Ondas coerentes  Interferência construtiva

  13. Microscopia 4  Excitação coerente 2 objetivas justapostas Interferência construtiva Amplificação do ponto focal Melhor resolução axial http://www.ks.uiuc.edu/Research/microscope/

  14. Microscopia 4  Excitação coerente 2 objetivas justapostas Interferência construtiva Amplificação do ponto focal Melhor resolução axial http://www.ks.uiuc.edu/Research/microscope/

  15. Microscopia 4 

  16. Microscopia 4  Tipo A: excitação coerente Tipo C: excitação coerente multifótons e detecção coerentes http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/publications/pdf/Handbook_Biol_Conf_Micr_561-570.pdf

  17. Microscopia 4  Tipo A: excitação coerente Tipo C: excitação coerente multifótons e detecção coerentes http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/publications/pdf/Handbook_Biol_Conf_Micr_561-570.pdf

  18. Microscopia 4  Tipo A: excitação coerente Tipo C: excitação coerente multifótons e detecção coerentes http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/publications/pdf/Handbook_Biol_Conf_Micr_561-570.pdf

  19. Microscopia 4  - Aquisição de Imagens Varredura laser Aquisição baseada em CCD rápido Microscópio multifocal multifóton 4 

  20. Microscopia 4  - Aquisição de Imagens 1 seg/fatia Imersão Varredura laser Aquisição baseada em CCD rápido Microscópio multifocal multifóton 4  1ª técnica: imagens-3D de cél vivas (100nm)

  21. Microscopia 4  - Aquisição de Imagens 1 seg/fatia Imersão Varredura laser Aquisição baseada em CCD rápido Microscópio multifocal multifóton 4  1ª técnica: imagens-3D de cél vivas (100nm) Artefatos x deconvolução z x http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm

  22. Microscopia 4  - Aquisição de Imagens 1 seg/fatia Imersão Varredura laser Aquisição baseada em CCD rápido Microscópio multifocal multifóton 4  1ª técnica: imagens-3D de cél vivas (100nm) Artefatos x deconvolução z x http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs12551-010-0037-0/fulltext.html#Fig1 http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm

  23. Microscopia 4  - Aquisição de Imagens 1 seg/fatia Imersão Varredura laser Aquisição baseada em CCD rápido Microscópio multifocal multifóton 4  1ª técnica: imagens-3D de cél vivas (100nm) Artefatos x deconvolução z x http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs12551-010-0037-0/fulltext.html#Fig1 http://www3.mpibpc.mpg.de/groups/hell/4Pi.htm http://light.ece.illinois.edu/NBSS09/UIUC_Bewersdorf_forDistribution.pdf

  24. Microscopia 4  - Aplicações Reconstrução 3D da matriz mitocondrial (GFP) de uma levedura viva (S. cerevisae) com brotamento Hell SW, Nat Biotech 21, 1347-55 (2003)

  25. Microscopia 4  - Aplicações Reconstrução 3D da matriz mitocondrial (GFP) de uma levedura viva (S. cerevisae) com brotamento Hell SW, Nat Biotech 21, 1347-55 (2003) Imunofluorescência (hibridização in situ) e reconstrução 3D da proteína PML (vermelho) ao redor do DNA telomérico (verde). Chung I, et al., Nucleus 3, 263-75 (2012) Scale bar = 0,5 µm

  26. Confocal X Microscopia 4  Confocal Resolução lateral: 200-300 nm para luz visivel

  27. Confocal X Microscopia 4  Confocal Resolução lateral: 200-300 nm para luz visivel Microscopia 4pi Duas objetivas justapostas Gera interferência construtiva Reduz resolução axial (z) pra 100 nm Varredura pixel-a-pixel, como confocal, mas Pode usar fontes multifótons e câmeras CCD

  28. Confocal X Microscopia 4  Confocal Resolução lateral: 200-300 nm para luz visivel Microscopia 4pi Duas objetivas justapostas Gera interferência construtiva Reduz resolução axial (z) pra 100 nm Varredura pixel-a-pixel, como confocal, mas Pode usar fontes multifótons e câmeras CCD PSF lateral 1,5x melhor que confocal PSF axial 5-7x melhor que confocal

  29. http://pubs.rsc.org/en/content/articlehtml/2007/MB/B705460B

  30. http://pubs.rsc.org/en/content/articlehtml/2007/MB/B705460B

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