“Implicacions de Bioseguretat en la Recerca Biomèdica” Presentació Comitè Bioseguretat IDIBELL Gener 2009

1. “Implicacions de Bioseguretat en la Recerca Biomèdica” Presentació Comitè Bioseguretat IDIBELL Gener 2009

2. Dues convocatòries Esquema de la sessió Presentació Jornada • 10-11h per a investigadors principals a càrrec de projectes d’investigació: • Presentació  del Comitè de Bioseguretat de l’IDIBELL • Requisits legals per a l’acceptació  de projectes  que tinguin implicacions relacionades amb Bioseguretat • Protocol de  compliment de sol·licituds • Protocols de treballs amb OGM • 11 -12 hr   per a responsables de sales de cultius • Compliment de  la legislació vigent • Protocols de treball IDIBELL Primera convocatòria: 22 de gener a l’Hospital Duran i Reynals (Sala Trueta de l’ICO) de 10 a 12 hr Segona convocatòria: 29 de gener a l’Hospital de Bellvitge (Sala Petita de la Sala d’Actes) de 10 a 12 hr

3. Objectiu Jornada Donar suport als investigadors en relació el compliment de la legislació vigent Per tal de facilitar la tramitació de petició de projectes que tinguin implicacions ètiques o de bioseguretat • Disposar Registre activitat • (Identificar sales cultius actives) • Harmonitzar • els protocols de treball • en les àrees de Cultius • de l’IDIBELL per a permetre • el compliment • de la legislació vigent

4. Marc Legal CBS a l’IDIBELL • REAL DECRETO 178/2004, de 30 de enero, • por el que se aprueba el Reglamento general • para el desarrollo y ejecución de la • Ley 9/2003, del 25 de abril, por la que se establece • el régimen jurídico de la utilización confinada, • liberación voluntaria y comercialización • de organismos modificados genéticamente. • (OGM) • 2005: Servei Estabulari IDIBELL sol·licita a la Comisión Nacional de Bioseguridad ( MAPA)ser acreditat (instal·lació/activitat) • 2005 Lliurament documentació • 2006 petició de disposar CBS • 2007 acreditació • A/ES/05/I-14 (S.E) • A/ES/05/15 (Sala V –ICO RT2) Adenovirus en ratolí • 2008 es convoca CBS Presentació Comitè de Bioseguretat (CBS) 1

5. Article 3 Funcions Reglament Comitè de Bioseguretat (CBS) (2) 1 Article 2 Finalitats • a. Donar suport a la recerca vinculada amb l’ús de agents biològics de risc • b. Vetllar per a correcte funcionament instal·lacions i activitats relacionats amb Bioseguretat • c. Promoure iniciatives per a millorar coneixement • c. Controlar i garantir que les activitats i instal·lacions pròpies de l’IDIBELL compleixin les normes legals i internes vigents. • g. Desautoritzar l’inici de qualsevol experiment que no estigui en conformitat amb la normativa vigent Reglament aprovat per Junta de Govern Abril 2008

6. Article 5 Funcions CBS-CE Reglament Comitè de Bioseguretat (CBS) (3) 1 Article 4 Òrgans Gestió • Comitè de Bioseguretat (CBS) • Comissió Executiva (CBS-CE) • Milagro Gonzalez • Manel Cascalló • Raul Estevez • Victoria Cochrane • Joana Visa • Coordinadora Delegada • Joana Visa • 3.a) Avaluació dels projectes I+D+i que requereixi el RD 178/2004 i elaborar els informes i registre els projectes avaluats. • 33 Projectes avaluats • Desconeixement Investigadors legislació • No adequada complementació sol·licitud • No registre d'instal·lacions ni activitat Jornada Bioseguretat

7. Complementació Sol·licitud CBS-DOC-001 Implicacions ètiques i de Bioseguretat (Victoria Cochrane, OTRI, IDIBELL) 2

8. CBS-DOC-001 Implicacions ètiques i de Bioseguretat 2

9. CBS-DOC-001 Implicacions ètiques i de Bioseguretat 2 • Experimentació Clínica Humana • Utilització cèl·lules troncals embrionàries • Mostres o teixits origen humà • Us dades personals

10. CBS-DOC-001 Implicacions ètiques i de Bioseguretat 2 E. Experimentació Animal

11. CBS-DOC-001 Implicacions ètiques i de Bioseguretat 2 F. Agentes Biológicos riesgo salud G. OGM H. Liberación OGM • Acreditat: • Adenovirus Sala V ICO • Servei Estabulari IDIBELL

12. OGM i Nivells Seguretat 3 Tipus OGM i Nivells Seguretat ( Manel Cascalló, ICO)

13. OGM i Nivells Seguretat 3 OGMs identificats a l’IDIBELL 1. Virus salvatges (In vitro/ In vivo): • adenovirus • Epstein-Barr virus 2. Vectors virals (partícula infectiva + OGM’s) - vectors adenovirals - vectors retrovirals - vectors lentivirals • vectors adeno-associats 3.Altres OGMs (no infectius) - Animals transgènics - Tranfeccions de plàsmids en eucariotes: mètodes físics (transfecció amb reactius tipus FuGENE, transfectin, lipofectamine, etc.) i també electroporació. - Transformació de bactèries (procediments de recombinació, etc.) - Transformació de llevats (procediments de recombinació, etc.)  

14. OGM i Nivells Seguretat 3 Nivells de bioseguretat: Existeix una transposició d’aquests nivells de risc biològic infectiu a ús d’organismes modificats genèticament. Es parla de “Graus de contenció”

15. OGM i Nivells Seguretat 3 Nivells de bioseguretat (2): Clasificación de las actividades de uso confinado de OGM’s Nivel de contención requerido Riesgo biológico para la salud humana y el medio ambiente Tipo de actividad Nulo o insignificante 1 Bajo 2 Moderado 3 Alto 4 Reial Decret 178 del 2004 Regulació de l’ús d’OGMs

16. OGM i Nivells Seguretat 3 Quin nivell té l’agent amb què treballem: Annex II Reial Decret 664/1997 (12 de maig 1997) - partícules infectives salvatges (virus, bactèries, fongs): Apèndix 2, RD664/1997 “Riesgos derivados del trabajo con cultivos celulares” (Guia) • línies cel·lulars humanes, de primats o de ratolí en cultiu • (caracteritzades o no) Apèndix 2, RD664/1997 “Riesgos derivados del trabajo con cultivos celulares” (Guia) - cèl·lules sanguínies humanes - vectors virals Avaluació del risc d’acord amb l’annex I del RD 178/2004 - animals transgènics - altra OGM

17. OGM i Nivells Seguretat 3 Quin nivell té l’agent amb què treballem: Annex II Reial Decret 664/1997 (12 de maig 1997) - partícules infectives salvatges (virus, bactèries, fongs): Apèndix 2, RD664/1997 “Riesgos derivados del trabajo con cultivos celulares” (Guia) • línies cel·lulars humanes, de primats o de ratolí en cultiu • (caracteritzades o no) Apèndix 2, RD664/1997 “Riesgos derivados del trabajo con cultivos celulares” (Guia) El comitè de bioseguretat s’ofereix per a assessorar-vos - cèl·lules sanguínies humanes - vectors virals Evaluació del risc d’acord amb l’annex I del RD 178/2004 - animals transgènics - altra OGM

18. VIRUS NO CARACTERITZATS (inadvertits) ex. Virus VHB (hepatitis B,C) o VIH en mostres de sangs. MICOPLASMA ex. Línies cel·lulars no controlades. ALLIBERAMENT DE MOLÈCULES BIOLÒGICAMENT ACTIVES ex. DNA’s amb funció biològica capaços de ser integrats al genoma de l’usuari Normativa de Bioseguretat Nivell 2: Raons Cientifico-Tècniques 3 És cert que els cultius cel·lulars no contaminats no representen un risc biològic significatiu, però cal tenir en compte que actuen d’AMPLIFICADORS del RISC d’EXPOSICIÓ a d’altres AGENTS BIOLÒGICS PATOGÈNICS. Aquests inclouen:

19. Normativa de Bioseguretat Nivell 2:Raons Legals 3 Existeix una normativa internacional d’obligatori compliment i que a l’Estat Espanyol es veu concretada en 2 Reials Decrets: Reial Decret 664/ 1997: “Sobre la protecció dels treballadors que per la seva feina estan o poden estar exposats a agents biològics”. Explicita que tots els cultius de línies cel·lulars, independentment del seu grau de caracterització, així com el cultius de cèl·lules sanguínies humanes requereixen l´ús d’un nivell de contenció de grau 2 Reial Decret 178/ 2004: “Reglament general sobre l’ús confinat, l’alliberament voluntari i la comercialització d'organismes genèticament modificats (OGM)” Explicita que la transfecció de DNA a cèl·lules eucariòtiques ha de realitzar-se en condicions de contenció de grau 2

20. Què cal saber quan es treballa en grau de Bioseguretat Nivell 2 Definició donada per la OMS “Es consideren agents del grup de risc 2 aquells que poden provocar malalties humanes però que aquestes tenen poques probabilitats d’esdevenir un risc greu per a la població general. L’exposició al laboratori pot provocar una infecció greu però existeixen mesures preventives i terapèutiques eficaces, i el risc de propagació és baix”. RISC INDIVIDUAL: MODERAT RISC POBLACIONAL: BAIX

21. Què cal saber quan es treballa en grau de Bioseguretat Nivell 2 3 • laboratori independent i convenientment senyalitzat amb el distintiu de risc biològic • involucra sempre personal específicament format en la manipulació d’agents patogènics i material biològic de risc. • l’accés a l’àrea està restringit. Per accedir-hi cal adequar la indumentària mitjançant l’ús de bates, sobre-calçat i guants d’ús exclusiu a la instal·lació. • cal prendre precaucions extremes amb els elements punxants i/o tallants que hagin estat contaminats. • cal prendre mesures específiques per al control de la formació i difusió d’aerosols • la manipulació dels agents de risc sempre es realitzarà dins de campanes de seguretat biològica de Classe II. • - els residus generats cal que siguin inactivats (la gestió de residus serà feta per una empresa especialitzada)

22. PUNTS IMPORTANTS: Els accidents 3 EXISTEIX UN PROTOCOL ESPECÍFIC EN CAS D’ACCIDENT ó VESSAMENT INCONTROLAT • tenen una base científica • NORMA GENERAL: la majoria dels agents de risc manipulats (VHB, VIH, micoplasma) s’inactiven amb lleixiu (hipoclorit al 1%). A més en funció de l’agent també s’inactiven amb alcohol o sabó. Conseqüentment: • DAMUNT DE SUPERFÍCIES: aplicar lleixiu, deixar actuar 5 min. i eixugar amb paper de filtre que es llençarà al contenidor de bioseguretat (tap groc). • DAMUNT DE PELL, ROBA ó SUPERFÍES NO-RESISTENTS: aplicar sabó de mans (SDS al 0,25%) i també etanol al 70%

23. 3

24. PRECAUCIONS UNIVERSALS en Bioseguretat 3 Són 5 regles d’or: 1.-VACUNACIÓ :requerida la vacunació contra l’Hepatitis B i antitetànica 2.- NORMES d'HIGIENE PERSONAL: - tapar sempre les ferides i lesions amb apòsits impermeables - rentar-se sempre les mans amb aigua i sabó (independentment de l’ús de guants) abans i després d'iniciar l’activitat - no menjar, ni beure, ni fumar, no usar auriculars - no fer pipetetjos amb la boca 3.-ELEMENTS de PROTECCIÓ de BARRERA: - guants - sobre-calçat - bata 4.- CURA ESPECIAL AMB ELS OBJECTES PUNXANTS/TALLANTS 5.- ESTERILITZACIÓ i DESINFECCIÓ CORRECTA DE MÀQUINES I SUPERFÍCIES

25. Peticions finals Jornada CBS ( Joana Visa) Comité Bioseguretat IDIBELL Gener 2009

26. Peticions finals Jornada Presentació CBS Compliment normativa Acreditació sales i activitat • Complimentar Doc adequadament i en termini previst • Disposar registre personal i instal·lacions relacionades amb bioseguretat • Harmonitzar protocols de treball OTRI IDIBELL: Victoria Cochrane (vcochrane@idibell.org)

27. Registre d’activitats (1) 4

28. Registre d’activitats (2) 4

29. dubtes • Preguntes • Suggeriments • etc Document redactat pels membres del Comissió Executiva del Comitè de Bioseguretat a l’IDIBELL 22 i 29 gener 2009

30. Sessió per a responsables sales cultius 11 - 12 hr   per a responsables de sales de cultius • RD 178/2004 OGM • CBS presentació • Objectius • Registre d'instal·lacions, personal i d’agents • Harmonitzar protocols • Racionalitzar l’ús Compliment normativa Acreditació sales i activitat

31. Registre d’activitats (1) 4

32. Registre d’activitats (2) 4

33. Protocols de Treball 4 • Protocols de treball: • Accés • Conducta • Neteja • Residus • Accidents • Diari d'instal·lació

34. Protocol Neteja per a sales Nivell 2 4 • Para acceder al laboratorio hay que vestirse previamente con bata, guantes y cubrecalzado • Limpieza del laboratorio: • Para la pica, las superficies y las sillas, utilizar el cubo pequeño con agua y una dosis de producto antibacteriano LIMOSEPTOL alternado con DAROCLOR • Para fregar el suelo utilizar el cubo grande con agua y tres dosis de producto antibacteriano LIMOSEPTOL alternado con DAROCLOR • Para la limpieza se alternará el uso del LIMOSEPTOL y DAROCLOR. • Antes de salir del laboratorio guardar el material de limpieza en el armario destinado para la limpieza del propio laboratorio • Al salir del laboratorio se guarda la bata y desechar los guantes y los cubrecalzados • El LIMOSEPTOL es un producto que se utiliza para zonas ESTERILES y de ALTO RIESGO • El DAROCLOR es un derivado del hipoclorito sódico (lejía).

35. OGM i Nivells Seguretat 4 Nivells Bioseguretat Milagro Gonzalez (Coordinadora Tècnica de Prevenció i Riscos Laborals de l’IDIBELL)

36. OGM i Nivells Seguretat 3 Nivells de bioseguretat: Existeix una transposició d’aquests nivells de risc biològic infectiu a ús d’organismes modificats genèticament. Es parla de “Graus de contenció”

37. OGM i Nivells Seguretat 3 Nivells de bioseguretat (2): Clasificación de las actividades de uso confinado de OGM’s Nivel de contención requerido Riesgo biológico para la salud humana y el medio ambiente Tipo de actividad Nulo o insignificante 1 Bajo 2 Moderado 3 Alto 4 Reial Decret 178 del 2004 Regulació de l’ús d’OGMs

38. Avaluació del risc d’acord amb l’annex I del RD 178/2004 4

39. Peticions responsables sales cultius: 4 • Disposar registre instal·lacions, personal i agents • Harmonitzar protocols • Racionalitzar ús Informació CBS intranet IDIBELL

40. Compliment legislació vigent 4 En quines sales es pot treballar a l’IDIBELL? Segons Nivell Bioseguretat de l’agent

41. 4 Prions

42. dubtes • Preguntes • Suggeriments • etc Document redactat pels membres del Comissió Executiva del Comitè de Bioseguretat a l’IDIBELL 22 i 29 gener 2009

43. Proposta Any 2009 Composicions Comitè i Comissió Executiva Bioseguretat 4 • Composició del Comitè de Bioseguretat • Director General de l’IDIBELL Director Científic IDIBELL • Responsable Coordinació Tècnica i Prevenció IDIBELL • Responsable OTRI IDIBELL • Responsable del Servei d’Estabulari IDIBELL • Responsable Recerca: • ICO • UB • HUB Composició de la Comissió Executiva Responsable del Servei d’Estabulari IDIBELL Responsable Coordinació Tècnica i Prevenció IDIBELL Responsable OTRI IDIBELL Responsable Sala de Virus, ICO Representant HUB Representant UB

44. Assistents responsables cultius Dia 22: M.Cascalló / J.Balart / R.Alemany R.López V.Nunes P.Fabregas M.Gonzalez J.Gil J.M.Cruzado E.Castaño B.Terni J.Aran D.Huertas J.Visa Dia 29: M.Vinyes JM Grinyó I.Herrero N.Lloberas

45. Possibles metges HUB a incorporar a les comissions de l’IDIBELL 1.- Mª Angels Luzón (Microbiología) (CBS) 2.- Josep Mª Arnau de Bolos (Farmacología, cirugía experimental) (CEEA) 3.- Javier De Oca (Cirugía, Cursos Endoscopia) 4.- Misericordia “Cori” (Electrofisiología) 5.- José Manuel Menchón (Psiquiatra) 6.- Jordi Dorca (“Pneumo” experimentación animal) 7.- Josep Mª Cruzado (Nefrología) 8.- Mª Carmen Cabellos (Patología infecciosa i sensibilitat antibiótica)