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Le frottis de sang normal

Le frottis de sang normal. Présentation de Rémi Moreda (moreda@free.fr), photographies de Frédéric Girard et Rémi Moreda du Lycée Lacroix – Narbonne – Académie de Montpellier. La réalisation du frottis. Réalisation du frottis sanguin : Figures 1 à 4. Coloration au May-Grünwald Giemsa .

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Le frottis de sang normal

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Presentation Transcript

  1. Le frottis de sang normal Présentation de Rémi Moreda (moreda@free.fr), photographies de Frédéric Girard et Rémi Moreda du Lycée Lacroix – Narbonne – Académie de Montpellier.

  2. La réalisation du frottis Réalisation du frottis sanguin : Figures 1 à 4

  3. Coloration au May-Grünwald Giemsa • 1- Fixation •  Placer la lame du frottis sur un support horizontal au dessus d’un bac de coloration. • Verser sur la lame 15 gouttes de colorant May-Grünwald pur de façon à recouvrir complètement le frottis. Laisser agir 3 minutes. • 2- Coloration au May-Grünwald •  Ajouter autant de gouttes d’eau neutre que de gouttes de colorant, le mélange est rapide. • Laisser agir 2 minutes. (Préparer la dilution du Giemsa pendant ce temps.) •  Rejeter le colorant par un jet d’eau neutre. • 3- Coloration au Giemsa •  Préparer la dilution du Giemsa pendant les 3 minutes précédentes : pour cela introduire 20 cm3 d’eau neutre dans une éprouvette graduée, ajouter 30 gouttes de colorant de telle manière que celui-ci reste à la surface de l’eau neutre. •  Verser le contenu de l’éprouvette dans une boîte de Laveran. Dès que la lame est prête, mélanger en agitant doucement (le pouvoir colorant est maximum au moment du mélange). •  Déposer la lame (frottis en dessous) dans la boîte, laisser agir 20 minutes (Giemsa lent). • Rincer sous un jet d’eau neutre. • 4- Séchage •  Laisser sécher la lame à l’air, en position inclinée, après avoir essuyé la face inférieure de la lame avec du papier filtre. •  Attendre au moins 5 minutes avant l’examen microscopique du frottis.

  4. Les hématies • Diamètre : 7,5 µm • Noyau : anucléés • Cytoplasme : pas de granulations.

  5. Les granulocytes neutrophiles • Diamètre : 15 µm • Noyau : polylobé (3 ou 4 lobes en général) • Cytoplasme : deux types de granulations : azurophiles non spécifiques peu nombreuses et neutrophiles spécifiques nombreuses.

  6. Granulocyte éosinophile • Diamètre : 15 µm • Noyau : souvent bilobé. • Cytoplasme : grosses granulations arrondies éosinophiles (rouge).

  7. Granulocyte basophile • Diamètre : 13 à 15 µm • Noyau : aspect en trèfle, souvent masqué par de grosses granulations. • Cytoplasme : grosses granulations irrégulières et nombreuses basophiles (bleu-violet).

  8. Petits lymphocytes • Diamètre : 7 à 9 µm • Noyau : arrondi occupant presque toute la cellule. • Cytoplasme : Pas de granulations.

  9. Grands lymphocytes • Diamètre : 10 à 15 µm • Noyau : arrondi, parfois légèrement incurvé. • Cytoplasme : quelques granulations azurophiles.

  10. Monocyte • Diamètre : 20 à 30 µm • Noyau : irrégulier, chromatine « peignée », encoché (en forme de rein). • Cytoplasme : granulations fines et nombreuses, azurophiles. Souvent présence de vacuoles.

  11. Quiz 1 1 2 3 4

  12. Quiz 2 1 2 3 4

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