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Revisión de artículo

Revisión de artículo. Presenta: Dr. Pedro A. Ponce B. Profesor titular: Dr. Héctor Godoy M. Profesor adjunto: Dr. A. Ulloa-Aguirre. CURSO DE SUBESPECIALIDAD EN BIOLOGIA DE LA REPRODUCCION HOSPITAL ANGELES DEL PEDREGAL (Febrero 2011- Marzo 2013). α FSH- h + β ( HGC + FSH- h )

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  1. Revisión de artículo Presenta: Dr. Pedro A. Ponce B. Profesor titular: Dr. Héctor Godoy M. Profesor adjunto: Dr. A. Ulloa-Aguirre. CURSO DE SUBESPECIALIDAD EN BIOLOGIA DE LA REPRODUCCION HOSPITAL ANGELES DEL PEDREGAL (Febrero 2011- Marzo 2013)

  2. αFSH-h + β( HGC + FSH-h) • Elonova ® MSD. • Receptor FSH : in vitro • Unión • Transactivación • Farmacocinética- farmacodinamia • Bioactividad

  3. Unión con el receptor FSH (rata)- in vitro • Células CHO ( Chinesehamsterovarian) • Fracción del receptor en membrana • FSH® marcada con 125-I (yodo) • FSH® analogo (competidor) • Centrifugado • Radiación en la membrana (gama counter)

  4. Unión (in-vitro)

  5. Activación del receptor FSH (rata)- in vitro • Células CHO ( Chinesehamsterovarian) • Genes (receptor) y reporter( luciferase) • 1250 células • 0.012 a 20 ngcoriofolitropina alfa/ml • 0.006 a 9.6 ng FSH® /ml • Incubación: CO2 - 4min- 37oC • Luciferase: Cuentas de luminiscencia

  6. Activación (in-vitro)

  7. Activación del receptor del TSH(h) y LH(h) – in vitro • Células CHO ( Chinesehamsterovarian) • Receptor TSH y LH • Actividad de la luciferase

  8. Farmacocinética (rata) • Coriofolitropina y FSH® : 20μg/kg sc. • Dos grupos: 8 • Muestras sanguíneas: 0, 2, 4, 12, 48 y 96 h • Inmunoensayo y fluorinmunoensayo • LLOQ: < 92ng/ml.

  9. Farmacocinética (perro) • Coriofolitropina alfa : 20μg/ml • FSH® : 25 μg/ml • Dos grupos: 8 • Muestras sanguíneas: 0, 1, 3, 8,12, 24, 32, 48, 72, 96, 144 y 192 h • Inmunoensayo y fluorinmunoesnayo • LLOQ (Coriofolitropina alfa):< 0.3 ng/ml • LLOQ (FSH®): < 86 ng/ml.

  10. Farmacodinamia (rata): E2, P4 y aumento del peso ovárico: • 21 días de vida y 50 g de peso • Día 1: 1 dosis de FSH® o Coriofolitropina alfa. • Día 2 y 3: 1 dosis hGC (13.3 IU) • FSH®: 0, 0.19, 0.36, 0.63, 1.14, 2.04, 3.68, 6.61, 11.86, 21.38, 38.34 y 68.96 μg/kg • Coliofolitropina alfa: 0, 0.05, 0.09, 0.16, 0.29, 0.51, 0.92, 1.65, 2.97, 5.34, 9.58 y 17.24 μg/kg • 72 horas de la primera inyección = muestras sanguíneas y necropsia • Peso ovárico y niveles séricos de E2 y P4.

  11. Farmacodinamia (rata) • 25 – 26 días de vida • 4 inyecciones sc • FSH® (0.03, 0.06, 0.13, 0.25 y 50 μg) n=6 en dos días (0, 8, 24 y 32 h) – 2.5, 5, 10, 20 y 40 μg/ml de dosis total. • A las 52 horas - hGC (20 UI)- ovulación • Control: hGC • Gas CO2/O2 18 horas del disparo • Disección de oviductos = # de ovocitos

  12. Número de ovocitos inducidos(in-vivo)

  13. Peso ovárico (in-vivo)

  14. Estradiol sérico (in-vivo)

  15. Progesterona sérica (in-vivo)

  16. Conclusiones • Unión y transactivación: Específico y comparable en ambas. Sin la activación del receptor de TSH y LH. • Farmacocinética (T1/2): • Coriofolitropina alfa: 17.3 h(ratas) y 46.9 h(perro) • 1.5 a 2 veces más larga que FSH® • Bioactividad( # de ovocitos, peso ovárico, E2 y P4): • 2 a 4 veces aumentada que FSH®

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