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Aislamiento hongos fitopatógenos. Curso: Diagnóstico de enfermedades vegetales. Ing. Agr. Vivienne Gepp, MSc. 3 de junio de 2011. Objetivos. Conocer las principales técnicas que se usan para aislar hongos fitopatógenos. ¿de dónde? ¿cómo?. ¿De qué aislar?. ¿De qué aislar?.
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Aislamiento hongos fitopatógenos Curso: Diagnóstico de enfermedades vegetales. Ing. Agr. Vivienne Gepp, MSc. 3 de junio de 2011
Objetivos • Conocer las principales técnicas que se usan para aislar hongos fitopatógenos. • ¿de dónde? • ¿cómo?
¿Cómo aislar hongos? • Objetivo: • obtener un cultivo puro del patógeno • Técnicas de aislamiento: • desde el signo • desde tejido afectado • indirecto
Aislamiento directo a partir del signo. • Cuando la muestra vegetal presenta signo es posible tomar una pequeña porción del mismo y sembrar en una placa con medio de cultivo.
Inducción del signo • Cámara húmeda
Rollo de papel absorbente desinfección previa ? 200 ppm 2,4D ? -18 a -20ºC por 24 h ? Medio de cultivo PDA + antibiótico Semillas
Aislamiento a partir de trozos vegetales • Sembrando trozos de tejido vegetal de la zona de avance del patógeno .
Aislamiento indirecto • Inocular tejido/órgano sano • Aislar desde zona de avance
Uso de cebos • Para capturar Phythophthora spp del suelo o agua: • trozos de manzana verde • trozos de limón
Obtención de colonias puras • Trozo de hongo - ¿de dónde?
Obtención de colonias puras • Trozo de hongo - ¿de dónde?
Bibliografía - aislamiento • DHINGRA, O.D.; SINCLAIR, J.B. 1985. Basic plant pathology methods. Boca Raton : CRC, 355 p. • FOX, F. T. V. 1993. Principles of diagnostic techniques in plant pathology. Wallingford : CAB International, 213p. • FRENCH, E.R. y HERBERT, T. 1980. Métodos de investigación fitopatológica. Libros y materiales educativos, nº 43. San José, Costa Rica, IICA. 289p.