200 likes | 501 Views
D-vitamin – Hvilke metoder anvendes i Danmark. Anne Schmedes Klinisk Biokemisk Afdeling Vejle Sygehus anne.vibeke.schmedes@vgs.regionsyddanmark.dk. Vitamin D former. D2-Vit. D3-Vit. Ergocalciferol, MW 396.7
E N D
D-vitamin – Hvilke metoder anvendes i Danmark Anne Schmedes Klinisk Biokemisk Afdeling Vejle Sygehus anne.vibeke.schmedes@vgs.regionsyddanmark.dk
Vitamin D former D2-Vit D3-Vit Ergocalciferol, MW 396.7 Findes i lav mængde i planter, i vitamin-dråber til børn, i lægemiddel til injektion og magistrelle tabletter Cholecalciferol, MW 384.6 Findes hovedsageligt i fisk, mælk, æg, ost og lever. Syntetiseres i huden ved soleksposition
Kidney Liver Vitamin D3 ► ► 25-OH-D3 ► ►1,25-di-OH-D3 Den aktive form Kidney Liver Vitamin D2 ► ► 25-OH-D2 ► ►1,25-di-OH-D2 Den aktive form 1-hydroxycholecalciferol ►►1,25-di-OH-D3 Liver Etalpha®, alfacalcidol Den aktive form Metabolisme af vitamin D Behandling med Vitamin D2 (injektion eller dråber) giver stigning i 25-OH-D2, ikke 25-OH-D3. Behandling med Etalpha® giver stigning i 1,25-di-OH-vitamin D3 – ikke stigning i 25-OH-D3.
Definitioner for D-vitamin mangel Ref. Mosekilde L et al, Ugeskr Læger 167/1, 2005, 29-33
DiaSorin Hovedstaden: Herlev Hvidovre KPLL Frederiksberg Capio DiaSorin DiaSorin LC-MS/MS DiaSorin DiaSorin Roche LC-MS/MS RIA IDS DiaSorin HPLC-UV
Hvordan medbestemmes 25-hydroxyvitamin D2 *Ved mere end 50 nmol/L 25-OH D2 opgives at der er > 50 nmol/L 25-OH D2
Hvordan kalibreres analysen Sporbarhed
Hvordan kalibreres analysen Sporbarhed
Hvordan kalibreres analysen Sporbarhed
Hvordan kalibreres analysen Sporbarhed
Analysebeskrivelse DiaSorin
Analyse princip • Direkte, kompetitiv kemiluminescens immunoassay (CLIA) • Kvantitativ bestemmelse 25 µL prøve,20 µL anti-Vitamin D coated para-magnetiske partikler samt buffer (ethanol, spalter 25-OH Vitamin D fra dets bindingsprotein) inkuberes i 10 min. Under inkuberingen binder 25-OH Vitamin D sig til de para-magnetiskepartikler, coated med anti-Vitamin D Vitamin D-Isoluminol konjugat tilsættes. Det binder sig til ikke-besatte pladser på de para-magnetiske partikler (konkurrerer om pladserne med det ubundne D vitamin i prøven) Efter 10 min. inkubering, vaskes ubundet konjugat væk. Starter Reagenserne tilsætte og prøven aflæses. De målte RLU værdier eromvendt proportionalt med koncentrationen af 25 OH Vitamin D i prøven.
Analysebeskrivelse Roche
Analysebeskrivelse Roche Polyklonalt anti-25-OH vitamin D3-antistof (får)
Analysebeskrivelse LC-MS/MS Århus
Analysebeskrivelse LC-MS/MS Århus
Analysebeskrivelse LC-MS/MS Vejle
Analysebeskrivelse LC-MS/MS Vejle
Multiple Reaction Monitoring (MRM) Argon gas Collision Cell MS2 MS1 Product(s) Precursor(s) Static (m/z 401,4) Static (m/z 365,4) Både den første og den anden quadrupole mass analyzer holdes fast på masse-over-ladnings ratioen (m/z) af precursor ionen og den mest intense product ion