220 likes | 397 Views
Segmentace buněčných jader. Pořízených konfokálním mikroskopem. Základní pojmy. Konfokální mikroskop. 3D analýza obrazu. DNA značkování. Typy tkání. Ukázky tkání. Různé přístupy k segmentaci. 1.Rigault Šedotonní otevření Top hat transformace Geodetická rekonstrukce Watershed
E N D
Segmentace buněčných jader Pořízených konfokálním mikroskopem.
Základní pojmy • Konfokální mikroskop. • 3D analýza obrazu. • DNA značkování. • Typy tkání.
Různé přístupy k segmentaci • 1.Rigault • Šedotonní otevření • Top hat transformace • Geodetická rekonstrukce • Watershed • 2.Ancin • Prahování • Split and merge • Watershed
Další metody • 3.Irinopoulou • Prahování, Morfologické filtrování, Watershed • Axiální segmentace na základě konvexnosti. • Problémy: • Strukturální dezorganizace tkáně. • Heterogenita stavby buňky.
Automatická segmentace • Medián 3x3x3 • Odhad průměrné velikosti jádra – iterační algoritmus skládající se z Hough. shrinking(zcvrkávání) a zjištění počtu zcvrknutí. • Přepočet získaných hodnot k získání isomorfních dat. • Lokální prahování. • Morfologická segmentace.
Výpočet průměrného poloměru jádra • Vypočet velikosti a směru gradientu v obraze – aplikace Gaussova filtru. • Iterační cyklus s iterovanou proměnnou R, skládající se ze 2 kroků. • 1.Vytvořen nový obraz, který slouží jako akumulátor, do kterého se podle Gauss. filtrovaného obrazu začnou akumulovat intenzity pro každý voxel podle R. • 2.Ohodnocení dosaženého zcvrknutí pro každou buňku. • Výsledkem. ROPT - R s minimálním KF.
Lokální prahování I. • Velikost regionů: 3ROPT*3ROPT*1 • Regiony větší z důvodu zajištění pozadí v každém regionu. • Lokální práh: I – původní obraz G – Sobelem filtrovaný obraz
Lokální prahování II. • Regiony bez jader jsou detekovány. Jinak by při segmentaci vznikaly falešné objekty. • Hodnoty lokálního prahu platí pro střed regionu, v obraze jsou plynule interpolovány. • Vnitřky jader jsou dodatečně obarveny na 1.
Morfologická segmentace • Cíl: Odstranit smetí a rozdělit jádra, která se dotýkají. • Eroze s eliptickým jádrem odstraní smetí. • Výpočet kostry jader a jejich přiložení na pův. obraz umožní oddělit hraničící objekty. • Výsledkem je množina objektů určených k interaktivní klasifikaci uživatelem.
Metrické vlastnosti objektů • Obsah, objem, výstřednost • Zakřivenost: • Těžiště:
Klasifikace uživatelem I. Uživatel klasifikuje region do 5 kategorii. • Jádro • Krajní jádro • Shluk jader • Shluk jader na okraji • Smetí
Testování metody • Metoda byla testována na modelovém příkladu. Pro testování byly vytvořeny virtuální buňky, u kterých se získali jejich průřezy. Získané 2D průřezy byly Gaussovým filtrem rozmazány k simulaci PSF a byl přidán šum. Na těchto datech byla prováděna segmentace.
Implementace • IRIX • C++ • LAPACK • Motif • OpenGL