200 likes | 438 Views
Lycopene dari Tomat dan Semangka Tidak Berpengaruh pada Kadar Kolesterol dan Antioksidan Orang Dewasa. Oleh : Puspa Melati (10501061). Lycopene from two food sources does not affect antioxidant or cholesterol status of middle-aged adults
E N D
Lycopene dari Tomat dan Semangka Tidak Berpengaruh pada Kadar Kolesterol dan Antioksidan Orang Dewasa Oleh : Puspa Melati (10501061) Lycopene from two food sources does not affect antioxidant or cholesterol status of middle-aged adults JK Collins, BH Arjmandi, PL Claypool, P Perkins-Veazie, RA Baker and BA Clevidence Nutrition Journal 2004,3:15
Lycopene • Karotenoid hidrokarbon • Sumber : semangka, tomat, pepaya, wortel. • Pigmen yang larut dalam lemak • Struktur mirip dengan -carotene • Tidak memiliki aktivitas sebagai provitamin A • Mencegah kanker prostat dan penyakit jantung
Studi epidemiologi akhir – akhir ini menghubungkan aktivitas lycopene sebagai antioksidan dengan pengurangan resiko menderita penyakit jantung • Percobaan klinis menunjukkan pengurangan oksidasi Low Density Lipoprotein (LDL) yang diakibatkan oleh lycopene • Lycopene menunjukkan aktivitas sebagai antioksidan secara in vitro, tetapi tidak ada bukti yang signifikan tentang aktivitasnya secara in vivo
Tujuan Penelitian Mempelajari kemampuan lycopene yang terkandung dalam tomat dan semangka dalam melindungi jantung pada orang dewasa melalui pengukuran kadar kolesterol dan sifat antioksidan
Metodologi Penelitian • Desain percobaan • Treatmen jus • Analisis kolesterol • Pengujian plasma glutation peroksidase (GPX) • Peroksidasi plasma lipid • Pengujian ferric reducing ability of plasma (FRAP)
Hasil • MDA = 0,66-2,20 mol/L • FRAP = 540-1094 mol/L • GPX = 1296-2596 mol/L Kadar ini mirip dengan kadar pada orang sehat.
Wanita memiliki kadar rata – rata plasma trigliserida, jumlah kolesterol, dan HDL-C yang lebih tinggi dari pada pria
Tabel koefisien korelasi Spearman antara MDA, FRAP, GPX, dan kolesterol
Kontradiksi yang ada dalam studi ini dengan studi antioksidan lain membutuhkan penelitian lebih lanjut.
Desain percobaan Tiga treatmen diet : • Kontrol (tanpa tambahan lycopene) • 20,1 mg lycopene/hari dari jus semangka • 18,4 mg lycopene/hari dari jus tomat
Treatmen jus • Treatment jus semangka satu botol jus semangka (260 g) 3x sehari • Treatment jus tomat satu botol jus tomat (122 g) 3x sehari
Tiga botol jus semangka (780 g) • 20,1 mg lycopene, yaitu 94% trans lycopene dan 6% cis isomer, terutama 5-cis dan 13-cis dengan sedikit jumlah isomer cis yang lain. • 0,90 mg phytoene, • 0,45 mg phytofluene, • 2,5 mg β-karoten
Tiga botol jus tomat (366 g) • 18.4 mg lycopene, yaitu 89% trans lycopene dan 10.8% isomers cis, yang terutama teridentifikasi sebagai 5-cis, 9-cis, 13-cis, dan 15-cis, dan sejumlah kecil isomer cis yang lain. • 2.1 mg phytoene, • 1.1 mg phytofluene • 0.6 mg β-karoten
Analisis kolesterol • Plasma darah diinkubasi dalam es selama 4 jam kemudian dicampur dengan cara divortex • Jumlah kolesterol dan konsentrasi trigliserida serum ditentukan secara enzimatik menggunakan peralatan dari Roche Diagnostics (Sommerville, NJ) • HDL-C ditentukan menggunakan Unimate HDL Direct dari Roche Diagnostics (Indianapolis, IN)
Pengujian plasma glutation peroksidase (GPX) ELISA kit • 20 L sampel plasma diencerkan dengan bufer TRIS-HCl dengan perbandingan 1:25, kemudian dipipet ke dalam sumur plat mikro poliklonal antibodi yang spesifik untuk plasma Glutation Peroksidase (GPX) manusia • Jumlah enzim yang ada ditentukan dengan cara direaksikan dengan para-nitrofenil-fosfat kemudian dibaca menggunakan alat pembaca plat mikro pada 405 nm • Konsentrasi plasma GPX ditentukan dari kurva standard
Peroksidasi plasma lipid 210 L sampel plasma + 11 L butilat hidroksi toluen 500mM + 5,3 L asam hidroklorida pekat (dalam tabung) • Tabung dibolak – balik • Diinkubasi pada 60°C, 80 menit • Didinginkan pada suhu ruang • + 680 L N-metil-2-fenilindol dalam asetonitril • Tabung dibolak balik • Disentrifugasi pada 13.000 g, 5 menit supernatan pelet
Supernatan (dalam tabung baru) • - +115 L HCl pekat • Tabung dibolak – balik • Diinkubasi pada 45°C, 60 menit • Disentrifugasi pada 13.000 g, 45 menit supernatan pelet - Absorban dibaca pada 575 nm Peroksidasi plasma lipid
Pengujian ferric reducing ability of plasma (FRAP) Tiga reagen utama yang digunakan adalah: • Natrium asetat, bufer asam asetat (pH 3,6) • Larutan 2,4,6-tripiridil-s-triazim 10 mmol/L dalam larutan asam hidroklorida 40 mmol/L • Larutan besi klorida heksahidrat 20 mmol/L • 25 mL reagen 1 + 2,5 mL reagen 2 + 2,5 mL reagen 3 • Campuran dipanaskan pada 37°C • + 10 L plasma dalam 30 L ddH2O • Nilai FRAP dibaca pada 593 nm pada menit keempat