Madár reprodukciós teszt OECD 206

1. Madár reprodukciós tesztOECD 206 Készítette: Kovács Gabriella

2. A teszt bemutatása A mérés során a madarak reprodukciós képességét vizsgáljuk, különböző anyagokkal szennyezett eleségek esetén. Az állatokat teszt és kontroll csoportokba osztjuk, a tesztcsoport kapja a különleges eleséget, míg a kontroll csoport normál étrendet követ. A mérés krónikus, végpontja a két csoport reprodukciója közti különbség. A vizsgálat ideje: min. 20 hét

3. Információk a szennyezőanyagról • az anyag vízoldékonysága • gőznyomása • kémiai szerkezete • az anyag tisztasága • kémiai stabilitása vízre és fényre a tápanyagban • biológiai lebonthatósága • toxicitás, LC 50 érték alapján

4. Ajánlott fajok Tőkés réce Forrás: http://www.körinfo.hu/drupal/node/3382

5. Virginiai fogasfürj Forrás:http://www.wildlifemanagementpro.com/2008/03/27/predator-control-and-habitat-management-face-off/

6. Japán fürj Forrás:http://www.haziallat.hu/madar/diszmadarak/gazadasagi-furj-japan-furj-farao-furj/1243/

7. *: Egy hím és egy tojó esetén. Amennyiben több madarat használunk, úgy a területet is növelni kell.**: A japán fürjnek meg kell felelnie a 3. táblázatban látható értékeknek, ahhoz, hogy használhassuk a méréshez. A kiválasztásnál fontos szempont, hogy a fajok egész évben könnyen és széles körben hozzáférhetőek legyenek. A teszt során csak egészséges madarakat használhatunk, és fontos, hogy azonos populációból kerüljenek ki az állatok. 1. Táblázat: Felnőtt madarak szükséges paraméterei

8. 2. Táblázat: A tojások és fiatal madarak tárolásának ajánlott körülményei

9. Előkészületek • A kísérlet beltéri elvégzése eseténa madarak tárolásához szükséges: • jó ventillációs rendszer, • hő- és pára szabályozó, • fény kontroll (tudnia kell követni a szabad ég alatti körülményeket, mint például átmenet hajnalban és napnyugtakor). • Kültéri mérés esetén érdemes olyan időpontot választani, amikor az adott faj természetesen is szaporodik. • A madarakat véletlenszerűen kell szét osztani a teszt és a kontroll csoport között. Mindkét csoportot 2 hétig a teszt körülmények között kell tartani, így az első héten még van lehetőség a nem megfelelő madarak elkülönítésére. • Amennyiben az akklimatizációs periódus alatt valamely csoport állományának a legalább 3%-a elpusztul, a szóban forgó fajt ki kell zárni a tesztből.

10. Szükséges eszközök • Megfelelő méretű és tisztaságú ketrecek, amelyek alkalmasak a kotlásra. (A fiatal madarak ketrecének célszerű tartalmaznia automatikus hőszabályzót.) • Megfelelő inkubátorok és keltetők, lehetőleg automatikus hő- és páratartalom szabályozóval és tojás forgatóval. • Tojástároló, amely állandó hőmérsékleten és páratartalmon tartja a tojásokat.

11. Teszt körülmények A vizsgálandó anyag LC50 értékei alapján határozzuk meg a vizsgált koncentrációkat. A javasolt maximális kísérleti koncentráció 1000 ppm. A mérendő dózisok: az LC10 feléhez, az 1/6 részéhez, illetve az 1/36-od részéhez tartozó koncentrációk. A megfelelő mennyiségek beméréséhez általában szükség van egy olyan anyagra, amelyben oldjuk a vizsgálandót. Ennek mennyisége max 2%-a lehet az eleség mennyiségének, és vigyáznunk kell, hogy ne legyen hatása a vizsgálandó anyagra, azaz ne interferáljon. A vivőanyag lehet víz, vagy kukorica olaj, vagy más olyan anyag, amelyben egyenletesen el tudjuk keverni a vizsgálandót.

12. A mérés menete A madarakat párokban célszerű a ketrecekben tartani, de van lehetőség csoportok kialakítására is (maximum 1 hím és 3 tojó). Párok esetén minden egyes koncentráció teszteléséhez legalább 12 pár szükséges (a kontroll csoport méretének és tartásának mindenben egyeznie kell a vizsgált csoporttal). Az akklimatizációs időszak letelte után a teszt csoportnál meg kell kezdeni a vizsgálati étrendet. Beltéri vizsgálat esetén a tesztidőszakban az állatokat 8 hétig kell rövid nappali körülmények közt tartani, (naponta csak 7–8óra fényt kaphatnak), majd ezt követően kell hosszú nappali körülményekre váltani, ami 16–18 óra fényt jelent. A világos időszak kiterjesztése után 2–4héttel kezdődik a tojásrakás, ami legalább 10 hétig tart. Kültéri vizsgálatnál a költési időszak előtti tíz hétben már kapniuk kell a speciális eledelt.

13. Az első héten rögtön a keverés után, majd 4 óránként mérni kell az eledelben a vizsgált anyag koncentrációját. Ez a koncentráció nem lehet 80%-nál kevesebb, mint amit meghatároztunk. Ha nem teljesül a feltétel, akkor emelni kell a dózist, és a második héten is folyamatosan mérni. A tojásrakás megkezdése után a tojásokat naponta be kell gyűjteni és meg jelölni melyik ketrecből való. Ezután a repedések vizsgálata következik. A sérült tojások nem kerülhetnek inkubátorba. Az inkubációs folyamat során 6-11 naponta meg kell vizsgálni az esetleges sérüléseket. Minden ketrecből legalább 2 tojást tojáshéj vizsgálatnak kell alávetni. Az inkubációs körülményekből a keltetőbe a tőkés récét a 23. napon, a fogasfürjet a 21. napon, míg a japán fürjet a 16.napon át kell helyezni. A fiókák a tőkés réce esetében a 25–27. napon, a fogasfürjnél a 23–24. napon, a japán fürjnél pedig a 17–18. napon kelnek ki. A fiókákat aszerint kell tárolni, hogy melyik ketrecből származnak. Ők a vizsgált anyagtól mentes eledelt kapnak.

14. A következő vizsgálatokat kell elvégezni a mérés során: • Halálozások és mérgezési tünetek vizsgálata, naponta • Felnőtt madarak testsúly vizsgálata: a speciális étrend kezdetekor, a költés kezdetekor, a mérés végén • Fiatal madarak testsúly vizsgálata: 14 napos korukban, • Ételfogyasztás a felnőtteknél: 1–2 hetente • Ételfogyasztás a fiókáknál: első és második héten is • Teljes patológiai vizsgálat minden felnőtt madárnál

15. Adatok és Beszámoló A vizsgálat végén a teszt és kontroll csoport összehasonlítása következik. A méréshez ismerni kell a normális reprodukciós értékeket (ld 3. táblázat).

16. 3. Táblázat: A reprodukciós paraméterek normál értékei

17. A beszámolónak tartalmaznia kell: • A vizsgált anyag kémiai adatait • A tesztállatok adatait • A vizsgálat körülményeit • Tartási körülmények: Hőmérséklet, páratartalom, ketrec mérete, típusa, anyaga • Az alap étrend adatait • A teszt étrend adatait: koncentráció, tárolási körülmények • A mérés eredményét • A mérgezés tünetei, mennyisége • Étel fogyasztás és testsúly • A 3. Táblázat adatait a tesztre vonatkozóan

18. A teszt érvényessége • A kontroll csoport halálozási aránya nem haladhatja meg a 10%-ot • A 10 hetes időszak alatt a kontroll csoportban született és 14 napig életben maradó madarak száma a tőkés récénél legalább 14, a fogasfürjnél 12, a japán fürjnél pedig 24 darab. • A kontroll csoport átlagos tojáshéj vastagsága a tőkés récénél legalább 0,34mm, a fogasfürjnél 0,19mm, a japánfürjnél 0,19mm kell legyen. • Amennyiben a nincs hatással a vegyszer a madarak reprodukciójára, úgy meg kell állapítani, hogy a NOEC* magasabb mint az alkalmazott koncentráció. *: NOEC (No Observed Effect Concentration): Az a maximális koncentráció amelynél még nincs tapasztalható káros hatása az adott vegyszernek

19. Források: OECD GUIDELINE FOR TESTING OF CHEMICALS 206 – Avian Reproduction Test Képek:http://www.tutitippek.hu/blog/husveti-diszek-tojashejbol.phphttp://www.bekesikelteto.hu/http://www.tutitippek.hu/blog/kreativ-tojasfestes.php