160 likes | 711 Views
ANTİOKSİDAN VE ANTİOKSİDAN ENZİMLER. Glutatyon (GSH); H 2 O 2 , LPx detoksifikasyonu Vit C ve Vit E rejenerasyonu Glutatyon Redüktaz (GRD); İntraselüler redox polensiyelimin devamlılığında
E N D
ANTİOKSİDAN VE ANTİOKSİDAN ENZİMLER Glutatyon (GSH); H2O2 , LPx detoksifikasyonu Vit C ve Vit E rejenerasyonu Glutatyon Redüktaz (GRD); İntraselüler redox polensiyelimin devamlılığında Glutatyon S-transferaz (GST); Peroksidleri substrat olarak kullanarak, molekül çözünürlüğü ve hücre dışına atılmayı sağlar _ SH grupları arası kataliz. GSH / GSSG oranı önemlidir. NADPH / NADP+ DM’de eritrosit GSH/GSSG oranı düşer.
Aldoz redüktaz , α sorbitol , Lens ve retinada katarakt. • Böbrek ve sinir hüc. Sorbitol birikimi myoinositol İntraselüler sinyal iletisi • Sorbinil gibi inhibitör uygulama yararlı. • GRD diyabetik çocuklarda , GPx ve Se bazı Asyalılarda Tip I DM eritrositlerde • O-2 + NO peroksinitrit α Nitrotirozin • Tip II DM plazma Nitrotirozin α Glukoz • DM, Eritroist ve Nötrofil SOD , Cytc-redüktaz • Glikasyonla SOD , yarılma sonucu Cu+2 serbestleşmesi • DM lökosit LPx Vit C • Glu α Tip I DM, LDL’nin Cu+2 ile oksidasyonu • Okside LDL, farklı elektroforetik mobilite, makrofaj yıkılımı, otoantikor oluşumu, yüksek TBARS ve yüksek Konjuge dien gösteriri. • Tip I ve Tip II DM α Glu, Hücrelere Vit C girişi , DM, 8-OhdG ve NFKB monositlerde
LİPİD PEROKSİDLERİ (LPx) • Diyabet α Oksidatif Stres α TBARs • Diyabet α plazma Lipidleri • Diyabet α F2 – izoprostanlar, lipid peroksidleri • TBARs α Tip II Diyabet α Komplikasyon • MDA α HbA1c • HbA1c α LDL oksidasyonu • Eritrosit membran lipozomları, Tip II Diyabetle oksidasyon duyarlığı (SOD, Vit E uyg. Yararlı). • Konjuge dien; Erken dönem lipid peroksidleri • Linoleik asid konjugedienleri α DM, Albuminüri • Tip I, DM, ♀ α LPx, total konjuge dien • (Diabetik kadınların, kardiyovasküler semptomlara duyarlılığı)
Lökosit, Tip II DM α LPx , askorbat • Eritrosit, Tip II DM α serbest ve total MDA • Vit E / LPx α LDL Oksidasyon Duyarlılığı • LDL_LPx α LDL Glikasyonu. • ♂ TBARs α trigliserid, HbA1C (Diyetle regüle) • Zayıf Kontrollü Tip II DM => LPS uyarısı => TNF-α , Monosit Adezyonu • Bazı olgularda normale yakın sonuçlar ! • 10 yıllık takip çalışması; İnsülin resistansı α oksidatif stres LPx α Bozulmuş Glukoz toleransı (IGI), erken hiperglisemi ve • Tip II DM LPx α Normal tolerans
NO YÖNTEMLERİ • 1) NO Sentaz Ölçümü • Radyoaktif; Arg3_H Cit3_H NO • Diyaforez; NADPH FAD, FMN NBT • NADPH Oksidasyonu; 340 nm’de • Griess Reaksiyonu; 540 nm’de NO’dan oluşan Nitrit’in renklendirilmesi • Oksi Hb-Fe+2 oksidasyonu; • Histokimyasal NADPH-Diyoforez; NOS izoenzimlerine karşı poliklonal antikorlarla (Nuterminal Bölg. Farklılığı) • Guanilat Silkaz Aktiviteleri; Dolaylı NOS ölçümü. Cyt_C Ferrisiyanid e- e- Diklorofenolindofenol (Renkli Ürün)
NO, O2 • 2) NO Ölçümü; Ferrosiyanid –Fe+2 Ferrisiyanid –Fe+3 420 nm, spektrofotometrik • NO oksidasyon ürünlerinin ABTS tuzu ile 660 nm, yeşil renk oluşumu. • Sülfanilamidli Nitrozatif Giers Reaksiyonu • Florometrik NO’nun, DAN diaminonaftalen ile floresans vermesi • Nitrit – natritn diaminonaftalen ile floresans vermesi • NO’nun paramagnetik Fe+2 bileşikleri üzerinden elektron magnetik rezonans spektroskopisi (EMR) • NO’nun elektrokimyasal olarak anaerobik koşullarda belirtilmesi • NO + oksi Hb nitrat + Meth – Hb (spektrofotometrik) Nitrozil – Hb (560 nm) • 3) Peroksinitrit – Nitrotirozin ölçümü; * Florametrik * Kemilüminesans * Spektrofotometrik * GSMS * Spektrofotometrk * HPLC, Immunolojik
Serbest radikaller ile ilgili yayınlar yayın sayısı yıllar
Serbest radikaller ne zaman oluştu? 3500 milyon yıl önce serbest radikallerin ilk organik komplekslerin oluşumunda rol aldığı düşünülmektedir.
Radikaller : Süperoksit (O2.- ) Hidroksil (.OH) Peroksil (LO2.) Alkoksil (LO.) Hidroperoksil (HO2.) Radikalolmayanlar : Hidrojenperoksit (H2O2) Hipoklorus (HOCl) Ozon (O3) Singlet oksijen Lipitperoksitler REAKTİF OKSİJEN TÜRLERİ (ROT)
İnsan vücudunda ne kadar süperoksit radikali oluşuyor? Erişkin bir kişi 3.5 mL O2/kg/daktüketir, bu günde 352.8 L (14.7mol) eder. Eğer %1’i süperoksitradikaline dönüşüyorsa, bu dayılda 53.66 mol yani 1.7 kgolarak hesaplanabilir.
İnflamatuvar/immün hasar Solumun ve KVS hastalıkları İskemi/reperfüzyon Eritrosit patolojileri Demir fazlalığı Böbrek hastalıkları Radyasyon hasarı GİS hastalıkları Beyin ve sinir sistemi hastalıkları İlaçlar ve toksinlere bağlı reaksiyonlar Yaşlanma Deri hastalıkları