Collembola szaporodásának vizsgálata vegyi anyaggal szennyezett talajokon

1. Collembola szaporodásának vizsgálata vegyi anyaggal szennyezett talajokon

2. Bevezetés • A vizsgálat célja, annak meghatározása, hogy szennyezett talaj hogyan befolyásolja a collembola (ugróvillások) szaporodási képességét • Az ugróvillások ökológiailag fontos fajok a talaj szennyezettségének meghatározásánál. • A szennyezett talajok ökotoxikológai tesztelésére igen alkalmasak, mert nagyon érzékenyek a talajlevegő szerves szennyezőanyagaira. • A collembola szinte minden talajtípusban előfordul, gyakran 105 db is található m2-enként. • Kedveli a humuszban gazdag talajokat.

3. A vizsgálat elve • Szerves anyaggal szennyezett (OECD előírás) mesterséges talajon vizsgáljuk a collembola szaporodását. • Az értékelést: 2 hét, majd 3 hét elteltével végezzük. • A talaj szennyezettségét a felnőtt állatok halálozási és szaporodási %-ával határozzuk meg.

4. A vizsgálat kritériumai • A kontroll felnőtt ugróvillások halálozási %-a a vizsgálat végén nem haladhatja meg a 20%-ot. • A vizsgálat végén a fiatal állatok száma vizsgálati edényenként nem haladhatja mega 100-at. • A variációs együttható számításánál a fiatal állatok számának 30%-nál kevesebbnek kel lennie. • A referencia anyagot időközönként meg kell vizsgálni. • A referencia anyagban a bórsav nem lehet több 100 mg/kg száraz talajra vonatkoztatva, mert akár 50%-al is csökkentheti az állatok szaporodási képességét.

5.  A vizsgálat leírása • Vizsgálati edények, eszközök: • A vizsgálati edények 30 g nedves talaj befogadására legyen képes • A vizsgálati edény anyaga lehet üveg, vagy nem toxikus műanyag, • A vizsgálati edény mélysége 2-3 cm, • A vizsgálati edény fedele legyen átlátszó, és biztosítsa a talaj párolgását, légcseréjét, csökkentse a víz párolgását,

6.  A vizsgálat leírása • Szükséges berendezések • Szárítószekrény, • Sztereó mikroszkóp • pH mért és luxmérő • Megfelelő pontosságú mérleg • Hőmérséklet szabályozózó • Páratartalom szabályozózó berendezés • Inkubátor szoba hőmérsékletét szabályozó berendezés • Csipesz, vagy kis szívó légáram készülék

7.  A vizsgálat leírása • A vizsgált talaj: • Módosított OECD mesterséges talaj, szerves anyag tartalma 5% • 5% tőzegmoha tőzeg, levegőn szárított finomra őrölt • 20% kaolin (kaolin tartalom min 30%) • 74% ipari homok • 1% CaCO3 analitikai tisztaságú

8.  A vizsgálat leírása • Előkészítés: • Az összetevők összekeverése, (laboratóriumi mixer) • A talajt nevesítése ionmentes vízzel – optimum 40–60% • pH meghatározása, beállítása • Talaj szennyezése – vizsgálandó szerves oldószerrel, peszticiddel

9. Vizsgálati eljárás • Körülmények: • A vizsgálati középhőmérséklet 20 ± 1 °C hőmérséklet tartományban 20 ± 2 °C, • A világos sötét ciklus (12 óra világosság, 12 óra sötét) • Megvilágítás erőssége 400 és 800 lux az edény falán, • Egyenletes talajnevesség biztosítása fogyás 2%, • Páratartalom 80% • pH-t elején végén mérni kell

10. Vizsgálati eljárás • Mérések • Minden vizsgálati edénybe 30 g friss vizsgálati talaj kerüljön • Az oldószer vagy diszpergálószer koncentrációja minden vizsgálati edényben ugyan az legyen • Az ugróvillásokat kis szívó berendezéssel áthelyezzük a vizsgált talajra (10 hím 10 nőstény) • Kb. 2–3 mg granulált sütőélesztőt – élelmiszer forrás- adjunk az állatkáknak • Az vizsgálati edényeket behelyezzük az inkubátorba • A 21. napon az állatokat megszámoljuk (nemenként, a nőstények nagyobbak) • 9 – 12 napos ivadékokat is megszámoljuk • 28. napon távolítsuk el a talajból az állatokat • Számoljuk meg az elpusztult állatokat • A vizsgálat végén statisztikai módszerrel határozzuk meg eredményt

11. Eredmények értékelése • A reprodukciós teljesítmény a fő végpont (pl. utódok száma) • A statisztikai elemzés, pl. ANOVA eljárás • Összehasonlító elemzés Student t-próba, Dunnett's vagy Williams "teszt • A túlélő felnőttek számának dokumentálása • LCX, ECx-érték meghatározása, statisztikai módszerekkel (pl. logisztikai vagy Weibull funkció, vágott Spearman- Karber módszer, vagy egyszerű interpoláció). • EC50 vagy bármely más ECx meghatározása • Ökotoxicitás meghatározása A vizsgálat végén a túlélő collembolák

12. Készítette: Vlaj Lajosné hallgató • Gazdaság és Társadalomtudományi Kar/mérnöktanár • I. éves levelező Tanári mesterszak (MA) • Gruiz Katalin: Környezettoxikológiai című tárgyához évközi feladatként Budapest, 2011. 04. 07. Forrás: Collembolan Reproduction Test in Soil www.oecd.org • http://www.google.hu/search?q=collembolans&hl=hu&sa=G&prmd=ivns&tbm=isch&tbo=u&source=univ&ei=QBmeTa3hAtH3sgbTxIGlBA&ved=0CGQQsAQ&biw=1259&bih=606