500 likes | 797 Views
ZNAČAJ TOKSIKOLOŠKE LABORATORIJE U SUDSKO - MEDICINSKOJ PRAKSI. Claude Bernard - „Otrovi su supstance koje su po svojoj fizičkoj ili hemijskoj prirodi takve da kad uđu u krv, ili u čovečiji organizam i tu ostanu, prozvode prolazne ili trajne poremećaje”.
E N D
ZNAČAJTOKSIKOLOŠKE LABORATORIJEUSUDSKO - MEDICINSKOJPRAKSI
Claude Bernard - „Otrovi su supstance koje su po svojoj fizičkoj ili hemijskoj prirodi takve da kad uđu u krv, ili u čovečiji organizam i tu ostanu, prozvode prolazne ili trajne poremećaje”
Otrov - porekloreči je izfrancuskogjezika ‘puison’, štoznači ‘piće’. Francuskarečvodiporekloizlatinske ‘potio’, štotakođeznači ‘piće’. • Priprema pića je prvo nazvana otrovom • Mnogi otrovi se mašaju sa pićem
Poznati trovači Katarina Dešaj Vrhunacslavnog perioda tajanstvenih trovača Francuska u kasimgodinama 17-og veka poznatakao La ‘Voisin’ prodavalaotroveženamakojesuželeleda se oslobodemuževa smrt 1000 muškara spaljenanalomači 1680. god.
Leonado da Vinči • 1452-1519 • Eksperimentisao sa otrovima • Izmislio tehniku nazvanu “passages” • Životinja je bila ubijena injekcijom otrova, a zatim su izvađeni organi i otrov ekstrahovan. • Ovi organi su zatim dati drugoj životinji kao hrana i proces je bio ponavljan.
Ova procedura je bila probana i na biljkama • U stablo voćke bio je injektovan kalijum cijanid • Predpostavljalo se da se otrov sprovodnim sistemom biljke ugrađuje u plod voćke • Voće se zatim jelo nedeljama pre pojave trovanja • Otrovano voće je poslaoGiangaleazzoSforzi, koji ga je jeo više dana pre nego što je • umro- otrovan
Jedan od najstarijih zapisa o upotrebi otrova je osam egipatskih papirusa koji datiraju iz 1500. god p.n.e. Na njima se nalaze recepti za pripremu i primenu preko 800 lekova i otrova. Neki recepti zaista imaju medicinsku vrednost i danas, kao što je upotreba morfina Egipatska laboratorija
(1493?-1541) Alhemičar i lekar Proučavao minerale i bolesti rudara. Osnovao „jatrohemiju”, što bi odgovaralo današnjoj hemoterapiji. Uveo u terapiju kao lekove: sumpor, arsen, opijum, soli žive, olova, gvožđa i bakra. Sve supstance su otrovi, ne postoji nijedna koja to nije. Doza je ta koja određuje lek ili otrov.
Posledice dejstva toksičnih supstanci se mogu pratiti bio-testovima,a takođe i merenjem koncentracija toksične supstance u krvi.
Otrov je unapred smišljen i tajan. Pravi užas leži, ne u trovanjima koja su otkrivena, već u onim koja to nisu.
Prvi kompletan rad iz predmeta sudske toksikologije napisao je Orfilije 1813.god. “Hemičar, rekao je Orfilije užasnut zločinima trovanja ljudi, mora težiti usavršavanju procesa-metoda potrebnih za dokazivanje slučajeva trovanja, da bi se otklonio zločin i da bi se kaznio krivac.”
Forenzična toksikologija Oblast toksikologije koja se bavi detekcijom i identifikacijom droga i otrova u teleasnim tečnostima, tkivima i organima i pomaže u rasvetljavanju pitanjatrovanjakoja se postavljaju u sudskomprocesu.
Slučajnatrovanjakaoipokušajisamoubistvasudomenukliničketoksikologijeizbrinjavanjeovakvihslučajevasu u centrimazakontrolutrovanja. Mali brojovakvihslučajevadolazi do sudskogtoksikologa, odnosno do suskogprocesa. To se dogadjaukoliko je trovanjeteškoiakoosobaumrebrzopoprijemunakliniku. U tom slučajuistražnisudijamožedazahtevaobdukcijuitoksikološkuanalizu.
Toksikološka laboratorija u Beogradu, sada pod imenom Toksikološki odsek, Instituta za sudsku medicinu, Medicinskog fakulteta, postoji od septembra 1859. god.
Njeno osnivanje i razvoj vezani su za apoteke i male hemijske laboratorije utadašnjoj Srbiji. Zahvaljujući velikom interesovanju kneza Miloša za sastav i lekovitost mineralnih voda u Višnjičkoj, Ribarskoj, Banjskoj i Brestovačkoj banji davne 1834. godine, počinje osnivanje hemijske službe u Srbiji.
“Po surundžiji ( poštaru) iz Palanke primićete šest krčaga palanačke lekovite vode. A u sanduku jednome na kolima polučavate i 18 komada koje krčaga, a koje stakala različite lekovite vode koje se u Srbiji nalaze, kako ti. šest krčaga Ribarske vode, šest krčaga Jošaničke vode i četiri stakla Brestovičke i dva stakla Banjske”, zatim dalje u pismu upućuje Dr. Kuniberta da uzme još šest krčaga Višnjičke vode, kako to da zapakuje i da sve pošalje Dr. Jakovu Živkoviću u Karlovce, koji će ovu vodu poslati “ fakultetu lekarnome u Beč, da ju sve ponaosob analizira, i iznađe, iz kakvih se čestica koja od ovih voda sastoji, čestice ove da nam opiše od najveće do najmanje po imenu i kvantitetu, a najposle da zaključi protivu koje bolesti može se koja voda upotrebljavati”.
Ukaz kneza Miloša Ukazom kneza Miloša 1859.godine formirana je državna hemijska laboratorija kojom je rukovodio mr.ph. Pavle Ilić, a iz koje je kasnije nastala današnja toksikološka laboratorija u sastavu Instituta za sudsku medicinu.
Zastupljenost toksičnih agenasa kao uzročnika smrti u Institutu za sudsku medicinu u Beogradu
Podaci Centra za kontrolu trovanja Podaci Instituta za Sudsku medicinu iskljucenja opijati alkohol lekovi
Zadatak sudskog toksikologa je da detektuje i identifikuje otrove u ljudskom organizmu. Pitanja koja se najčešće postavljaju u sudu su: • Da li je osoba bila otrovana ? • Koji je otrov identifikovan ? • Koji su efekti otrova ? • Da li su detektovane količine otrova letalne ili ne ?
Uzorci biološkog materijala u sudskoj toksikologiji su: • Krv, urin, tečnost staklastog tela, • Cerebrospinalna tečnost, • Znoj, pljuvačka, • Sinovijalna tečnost, • Mekonijum, • Kosa, nokti, kosti, • Žuč, želudačni sadržaj i • Unutrašnji organi (jetra, bubreg, mokraćna bešika, srce, pluća, slezina, mozak, želudac).
Jedan od postulata sudskog toksikologa je:” Prisustvo otrova mora biti dokazano u krvi i organima pre nego što se uzme u razmatranje kao uzrok smrti”. Postoje četiri stepena toksikološkog ispitivanja: • Detekcija–detektovanje prisustva leka ili drugog otrova u uzorcima upotrebom neke “screening” procedure • Identifikacija–nedvosmislena potvrda detektovanog leka, metabolita ili otrova specifičnim analitičkim metodom • Kvantifikacija – precizna kvantifikacija prisutnih lekova, metabolita ili otrova • Interpretacija – tumačenje i prezentacija dobijenih analitičkih rezultata u kontekstu slučaja,
Prema “zlatnom pravilu” sudske toksikologije,identifikacija toksičnih supstanci u biološkim uzorcima mora seizvoditi dvema tehnikama, koje se zasnivaju na različitim fizičko-hemijskim principima.
Osnovni elementi za procenu neke metode su : • osetljivost, • tačnost, • preciznost, • specifičnost, • vreme potrebno da se izvrši analiza i • cena analize.
Preliminarni testovi -screening • Imuni enzimski test (EMIT) • Radio imuni enzimski test (RIA) • Fluorescentni polarizacioni imuno test (FPIA) • Višekolonska tečna hromatografija (REMEDi HS)
Dokazivanje barbiturata i benzodiazepina Brzi testovi za dokazivanje barbiturata i benzodiazepina u urinu i serumu do 72 sata od unošenja.
Merck - kit za droge Izvođenje analiza na fluorescentnom spektrofotometru -TDx
Potvrdni testovi- hromatografske tehnike • Tankoslojna hromatografija (TLC) • Tečna hromatografija pod visokim pritiskom(HPLC) • Tečna hromatografija sa masenom spektrometrijom (LC/MS) • Gasna hromatografija (GC) • Gasna hromatografija sa masenom • spektrometrijom (GC/MS)
Hromatografske tehnike • Koriste se kao potvrdne tehnike sa nižom granicom detekcije od imuno testova • Povezivanjemsamasenimspektrometrom, postajuidentifikacionetehnike • Primena ovih tehnika zahteva pripremu biološkog materijala • Ekstrakcija je najčešće tečno-tečna ili čvrsto-tečna
Preliminarni testovi • Koriste se za brzu detekciju droga,lekova zloupotrebei pesticida u uzorcima urina, seruma, tečnosti staklastog tela i cerebrospinalne tečnosti sa visokim stepenom pouzdanosti i osetljivosti. • Nije potrebna priprema uzorka • Osetljivost se kreće do 50-200 ng/mL • Postoji mogućnost lažno pozitivnih i negativnih rezultata
Oprema za serijsko izvođenje čvrsto-tečne ekstrakcije Izvođenje čvrsto-tečne ekstrakcije
1 STD kokain 2 STD heroin 3 STD amfetamin 4 Nepznatuzorak 1 2 3 4 Ploča prskana kiselim jodplateatom
Instrument zatečnu hromatografiju UV spektri, maseni spektri, hromatogrami
Gasni hromatograf Maseni spektar morfina m/z 286 morfina d3 m/z 289 Maseni spektar 6-MAM m/z 328
Pored bioloških uzoraka na analizu se donose i uzorci koji se nađu pored ili u okolini mesta događaja. • Tečnosti, • Praškovi, • Tablete, • Špricevi
Zasecanje makovih čaura Različiti proizvodi biljke mak Meksički braon i južnoazijski beli heroin Formula heroin
Tablete amfetamina Prostorna organizacija molekula MDMA Prostorna organizacija molekula amfetamina
Cvetbiljke Erytroxylon coca Supstancakokain Prostorna organizacija molekula kokaina
Doping Međunarodni Olimpijski Komitet i nedavno osnovana Svetska anti-doping agencija definišu doping kao: 1. Upotrebu sredstva (supstance ili metode) koja bi mogla da budu štetna po zdravlje atletičara ili koja bi poboljšala njegove rezultate. 2. Prisustvo zabranjene supstance u telesnim tečnostima atletičara ili podatak o njenoj upotrebi, kao i o upotrebi zabranjenog metoda. Prema kriterijumima Međunarodnog olimpijskog komiteta između ostalih zabranjenih supstanci nalaze se i anabolici.
Doping kontrola Kontrola zabranjenih supstanci na takmičenjima se sprovodi po unapred postavljenim strogim pravilima o sakupljanju i analizi uzoraka. Analizu uzoraka radi određena laboratorija, koja je akreditovana za rad tih analiza. Uzorkovanje se vrši van vremena takmičenja, bez najave, kao i za veme takmičenja.
Poštujući procedure o sakupljanju i pripremi bioloških uzoraka, kao pravilnu primenu savremenih analitičkih tehnika, moguće je detektovati, identifikovati i kvantifikovati otrov u ljudskom organizmu i pomoći u rasvetljavanju uzroka smrti.