ANA BELÉN GUERRERO HINOJOSA

1. DEPARATMENTO de ciencias de la vida Ingeniería en biotecnología ESTUDIO DE LA CONTAMINACIÓN POR DEOXINIVALENOL (DON) PRESENTE EN HARINA DE TRIGO ALMACENADA EN EL SECTOR DE SANGOLQUÍ – PICHINCHA, MEDIANTE LA EXTRACCIÓN POR COLUMNAS DE INMUNOAFINIDAD (IAC) Y CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA EFICIENCIA (HPLC). ANA BELÉN GUERRERO HINOJOSA Sangolquí, 16 de diciembre de 2011

2. INTRODUCCIÓN • Trigo Gramínea presente en todo el mundo (Geremia, 2009). Representa el segundo cultivo de mayor producción. Ecuador: importaba alrededor del 97% de trigo (CIMMYT, 2010). Por ser de alto consumo, precisa de una atención especial.

3. INTRODUCCIÓN • Deoxinivalenol Micotoxinaperteneciente a los tricotecenos del grupo B Producido por Fusarium graminearum El trigo presenta los mayores niveles de contaminación con DON. (FHB) Alimentos contaminados: serios daños en la salud humana y animal.

4. INTRODUCCIÓN • Deoxinivalenol

5. INTRODUCCIÓN • Regulación Fuente: (FAO, 2004)

6. INTRODUCCIÓN • Regulación FAO (2004): solo pocas docenas de países han fijado límites reglamentarios para el Deoxinivalenol en los alimentos. Límites a nivel mundial para el deoxinivalenol en harina de trigo y otros cereales. Fuente: (FAO, 2004)

7. OBJETIVOS • General • Realizar un estudio sobre la contaminación por Deoxinivalenol (DON) en harina de trigo almacenada en el sector de Sangolquí – Pichincha, mediante la extracción por Columnas de Inmunoafinidad (IAC) y Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (HPLC).

8. OBJETIVOS • Específicos • Estandarizar el método de extracción. • Compilar información sobre las bodegas que expenden harina de trigo en el sector de Sangolquí. • Realizar una comparación de las concentraciones. • Sugerir la elaboración de un reglamento.

9. HIPÓTESIS • Las muestras de harina de trigo almacenadas en el sector de Sangolquí presentan niveles de contaminación con DON mayores a los permitidos a nivel internacional.

10. MATERIALES Y MÉTODOS

11. MATERIALES Y MÉTODOS • Preparación de estándares para curva de calibración Donde: Ci= Concentración de DON en µg.Kg muestra-1 Co=Concentración de DON en ng.mL-1

12. MATERIALES Y MÉTODOS • Muestreo 32 Bodegas Lugar fresco y seco

13. MATERIALES Y MÉTODOS • Extracción

14. MATERIALES Y MÉTODOS

15. MATERIALES Y MÉTODOS

16. MATERIALES Y MÉTODOS • Cuantificación

17. MATERIALES Y MÉTODOS • Fortificación o adición de estándar interno

18. RESULTADOS • Estandarización de método

19. RESULTADOS • Curvas de calibración

20. RESULTADOS • Curvas de calibración

21. RESULTADOS • Lectura de blancos diarios

22. RESULTADOS • Determinación de la concentración de DON presente en muestras de harina de trigo

23. RESULTADOS • Determinación de la concentración de DON presente en muestras de harina de trigo

24. RESULTADOS • Análisis exploratorio de datos • Cuatro Variables: • Tipo de local • Tipo de almacenamiento • Marca • Molino Histograma que representa la frecuencia relativa en que las muestras presentan determinada concentración de DON.

25. RESULTADOS • Análisis exploratorio de datos b) Sin tomar en cuenta los valores atípicos obtenidos a) Tomando en cuenta los valores atípicos obtenidos Diagrama de Barras en base al promedio obtenido en cada una de las categorías por tipo de almacenamiento

26. RESULTADOS • Análisis exploratorio de datos b) Sin tomar en cuenta los valores atípicos obtenidos a) Tomando en cuenta los valores atípicos obtenidos Diagrama de Barras en base al promedio obtenido en cada una de las categorías por tipo de local

27. RESULTADOS • Análisis exploratorio de datos b) Sin tomar en cuenta los valores atípicos obtenidos a) Tomando en cuenta los valores atípicos obtenidos Diagrama de Barras en base al promedio obtenido de acuerdo al molino en el que se obtuvo la muestra

28. RESULTADOS • Análisis inferencial de datos • ANOVA Resumen global de medidas de tendencia central

29. RESULTADOS • Intervalos de confianza • Tomando en cuenta el valor atípico • Sin tomar en cuenta el valor atípico

30. DISCUSIÓN

31. DISCUSIÓN

32. CONCLUSIONES • Se estandarizó el método para la cuantificación de Deoxinivalenol en harina de trigo con la ayuda del personal de Agrocalidad e INIAP. • No fue posible obtener la información necesaria por parte de los molinos y las bodegas expendedoras de la harina de trigo. • De un total de 32 muestras sometidas al proceso de cuantificación de DON, el 100% fueron positivas, pero tan solo el 3% superaba el LMR permitido por la legislación sanitaria de la Unión Europea. • En el Ecuador se puede realizar una reglamentación en base a la legislación Europea.

33. RECOMENDACIONES • Adecuar los laboratorios de Agrocalidad con un área exclusiva para la cuantificación de micotoxinas. • Realizar la adquisición de un evaporador de muestras adecuado. • Realizar una segunda fase de esta investigación a nivel nacional para obtener más datos para la realización de una futura legislación. • Implementar un sistema de capacitación a productores y vendedores para evitar la contaminación por Micotoxinas en los alimentos.

34. Muchas gracias Por su atención ANA BELÉN GUERRERO HINOJOSA