1 / 13

DNA diagnostika

DNA diagnostika. Co se detekuje ?. Monogenní a polygenní dědičné choroby Některé typy nádorů Progrese choroby během léčby Identifikace lidí ve forenzní medicíně HLA-typizace v případě transplantace Prevence - vyšetření: - preimplantační - prenatální - presymtomatické.

theresia-zandra
Download Presentation

DNA diagnostika

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. DNA diagnostika

  2. Co se detekuje ? • Monogenní a polygenní dědičné choroby • Některé typy nádorů • Progrese choroby během léčby • Identifikace lidí ve forenzní medicíně • HLA-typizace v případě transplantace • Prevence - vyšetření: - preimplantační - prenatální - presymtomatické

  3. DNA polymorfizmus Variabilita sekvence DNA mezi rozdílnými jedinci téhož druhu • Alelový polymorfizmus fyziologická funkce, s frekvencí > 1% predispozice k polygenním chorobám • Mutace patologická funkce, s frekvencí < 1% příčina monogenních chorob

  4. Zdroje nukleových kyselin DNA určitého genu – všechny jaderné buňky RNA určitého genu - jenom ty buňky, kde se daný gen exprimuje

  5. Princip testování izolace DNA PCR (namnožení části DNA) + další analýzy vizualizace výsledku v gelu

  6. Náplň třítýdenních praktik 1. praktikum: Izolace vlastní DNA 2. praktikum: PCR - namnožení genů CFTR a HFE 3. praktikum: RFLP - restrikční štěpení genu HFE

  7. Nejčastější mutace Cystické fibrózy : • gen CFTR, na 7. chromozomu mutace delta F508 Hemochromatózy : • gen HFE, na 6. chromozomu mutace C282Y

  8. Mutace delta F508 Normální sekvence DNA 5 ´ … AAT ATC ATCTTT GGT GIT … 3´ Protein Asn Ile Ile Phe Gly Val Pozice 505 506 507 508 509 510 Mutovaná DNA DNA 5 ´ … AAT ATC AT - - - T GGT GIT … 3´ ProteinAsn Ile Ile - Gly Val Pozice 505 506 507 508 509 510

  9. Mutace C282Y Normální DNA 5 ´......G / TGC….. 3´ 3´…. C / ACG….. 5´ C – Cys – Cystein (TGC) na pozici 282 v proteinu Mutovaná DNA 5 ´......G / TAC….. 3´ 3´…. C / ATG….. 5´ Y – Tyr – Tyrosin (TAC) na pozici 282 v proteinu

  10. CharakteristikaDNA diagnostiky • Detekce určitého polymorfizmu daného predispozičního genu • CÍLENÉ ANALÝZY • KOMPLETNÍ ANALÝZY

  11. Cílené analýzy • Lokalizace a celá sekvence genu je známá • Mutace genu je známá Vyšetření členů rodiny není nutné

  12. Kompletní analýzy • Lokalizace a celá sekvence genu je známá • Mutace genu jsou neznámé Vyšetření členů rodiny je nezbytné

  13. Detekce polymorfizmu určitého genu Cílené analýzy: • PCR se sekvenčně specifickými primery (CFTR delta F508) • PCR s obecnými primery + 1) RFLP s restrikčními enzymy (Restriction Fragment Length Polymorphism) (HFE C282Y) + 2) hybridizace s DNA próbami • Kompletní analýzy: PCR s obecnými primery DNA sekvenování

More Related