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BACILOS GRAM NEGATIVOS IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL. Profa. Cláudia de Mendonça Souza Microbiologia Clínica Depto de Patologia, Faculdade de Medicina, UFF. BACILOS GRAM NEGATIVOS. Enterobactérias. Mais de 30 gêneros e mais de 130 espécies descritas.
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BACILOS GRAM NEGATIVOS IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL Profa. Cláudia de Mendonça Souza Microbiologia Clínica Depto de Patologia, Faculdade de Medicina, UFF
Enterobactérias • Mais de 30 gêneros e mais de 130 espécies descritas. • Encontradas no trato gastrintestinal de animais e seres humanos. • Bactérias mais isoladas a partir de amostras clínicas. • Exemplos: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabillis, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Salmonella, Shigella. • Infecções: urinária, pulmonar, bacteremia, meningite, gastrointestinal, entre outras.
Meio Seletivo DiferencialMac Conkey Colônias Lactose positivas Colônias Lactose negativas Composição: Peptona, lactose, sais biliares, cloreto de sódio, cristal violeta, agar, vermelho neutro, água.
Meio Seletivo DiferencialEosina-Azul de Metileno Composição: Peptona, lactose, eosina, azul de metileno, agar, água.
Meio Seletivo DiferencialHektoen Colônias Lactose negativas (H2S +/ -) Colônias Lactose positivas Composição: peptona, lactose, sais biliares, cloreto de sódio, tiossulfato de sódio, citrato de amônio férrico, fucsina ácida, azul de timol, agar, água.
BACILOS GRAM NEGATIVOS AGAR TRÍPLICE AÇÚCAR FERRO - TSI Utilização apenas da glicose Utilização dos 3 açúcares Glicose, Lactose e Sacarose Produção de H2S
Enterobactérias – Meio SIM Indol - Indol + Sulfeto positivo
Enterobactérias Urease Citrato - + + + - + - Fenilalamina Desaminase
Enterobactérias Descarboxilação de aminoácidos: Lisina, Arginina e Ornitina Positivo Negativo
Enterobactérias Meio de Clark & Lubs + a-naftol e KOH 40% + Vermelho de Metila
Enterobactérias MEIO RUGAI
Enterobactérias • Kit de EPMMILI: Série de 7 testes em 2 tubos para identificação bioquímica de enterobactérias • Produção de gás, H2S, urease, L-triptofano desaminase • Motilidade, indol, lisina descarboxilase
BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES (BGNNF) • Grupo heterogêneo de bactérias aeróbias, não esporulados, que não utilizam carboidratos ou não os degradam através da fermentação (15 famílias). • Principais gêneros: Pseudomonas, Acinetobacter, Burkolderia, Stenotrophomonas.
Não Fermentadores Meio O/F: Oxidação/Fermentação
BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES (BGNNF) Móveis, flagelos polares Pseudomonas, Burkolderia, Stenotrophomonas, Ralstonia Móveis, flagelos peritríquios Alcaligenes, Achromobacter, Oligella Imóveis, oxidase positivos Oligella, Flavobacterium, Cryseobacterium Imóveis, oxidase negativos Acinetobacter MOBILIDADE/OXIDASE
Pseudomonas aeruginosa • Bacilo Gram negativo. • Móvel. • Aeróbio estrito. • Pertence ao grupo fluorescente do gênero (pioverdina): P. aeruginosa, P. fluorescens e P. putida • Produz pigmentos hidrossolúveis como a pioverdina, piocianina, piorrubina ou piomelanina • Espécie de maior importância clínica entre os BGNNF
IMPORTÂNCIA CLÍNICA http://gsbs.utmb.edu/microbook/ch027.htm
Pseudomonas aeruginosa • Diagnóstico Laboratorial • Colônias grandes (mucóides ou secas), achatadas, com bordas irregulares, odor de “uva” • Citocromo-oxidase positiva (10 segundos) • Produção de piocianina
Pseudomonas aeruginosa • Diagnóstico Laboratorial • Crescimento em MacConkey (lactose -) • Mobilidade (gota pendente) • Crescimento a 42oC • Descarboxilação da arginina Agar Mac Conkey
Acinetobacter spp • Distribuição ampla no solo e na água. • Resistência à dessecação. • Cerca de 17 espécies descritas. • Espécie mais freqüente em amostras biológicas: A. baumannii(A. calcoaceticus-A. baumnannii) • Importante patógeno hospitalar • Pneumonias associadas a ventilação mecânica, infecção urinária, bacteremia, infecção de pele e feridas.
Acinetobacter spp. • Cocobacilo Gram-negativo.* • Aeróbio estrito, imóvel. • Não possui a enzima citocromo-oxidase. • Colônias convexas, bordas regulares. * Características morfo-tintoriais semelhantes às dos gêneros Moraxella e Neisseria.
Acinetobacter spp. • Cresce bem em MacConkey (lactose +). • A. baumannii catalase positivo.
BACILOS GRAM NEGATIVOS PATÓGENOS OPORTUNISTAS QUE APRESENTAM RESISTÊNCIA INTRÍNSECA & ADQUIRIDA A VÁRIOS ANTIMICROBIANOS • CLSI: padronização de testes (BGNNF) apenas para Pseudomonas aeruginosa (16-18h), Acinetobacter spp., Burkolderia cepacia e S. maltophilia (20-24h).