Morphogenèse et migration épithéliale : Etude de la fermeture dorsale chez la drosophile

1. Morphogenèse et migration épithéliale : • Etude de la fermeture dorsale chez la drosophile • Objectifs du cours: • - Démarche (historique, analyse d’articles) • Modélisation (parallèles avec cicatrisation) • Comprendre le processus (composantes, signalisation) • Objectifs des TDs: • Pratique personnelle (analyse articles, construction) • Applications du cours (méthodologies)

2. Film montrant le développement de l’embryon de drosophile en vue latérale Marqueur des cellules polaires Vasa

4. Film montrant le développement de l’embryon de drosophile en vue dorsale Marqueur des cellules polaires Vasa

6. Flybase

7. Flybase

8. Flybase

10. Description des stades 13-15 Flymove

11. La fermeture dorsale en trois étapes initiation allongement suture D’après Rousset et al, 2004

12. Quelles sont les composantes cellulaires et tissulaires du mouvement?

14. L’amnioséreuse et l’ectoderme : deux épithélia stade 14

20. Changement de forme cellulaire dans l’épiderme latéral pendant la fermeture dorsale Kiehart et al 2000

23. La marge de l’ectoderme se différencie d’un point de vue de l’expression génique

24. La fermeture dorsale : des tissus en mouvement Pour examiner les forces qui contribuent à la fermeture dorsale, une méthode pour suivre le mouvement in vivo a été mise au point: cibler la GFP à l’actine, donc décorer le cortex riche en actine des cellules spq-GFP:moesin (spq = nonmuscle myosin regulatory light chain)

25. Motilité cellulaire et accumulation d’actine

26. Morphologie des cellules de la marge en mouvement

27. Western-blot montrant l’expression de la fusion GFP:actine dans les embryons de drosophile transgéniques GFP:actine actine e22cGAL4 UAS-GFP:actine e22cGAL4 UAS-GFP:actine + + a actine a GFP Verkhusha et al 1999

28. Immuno-détection par microscopie confocale montrant l’expression cytoplasmique de la fusion GFP:actine (vert) dans des cellules de bordures A B C cellules de bordures Verkhusha et al 1999

29. Film montrant des changements de morphologie des cellules de la marge en mouvement

30. La fermeture dorsale : un modèle pour la cicatrisation ?

31. La fermeture ventrale chez caenorhabditiselegans Martin et Parkhurst 2004

32. La fermeture temporaire de la paupière de l’embryon murin Martin et Parkhurst 2004

33. Capacité de cicatrisation de l’ectoderme embryonnaire (drosophile, poisson-zèbre) Martin et Parkhurst 2004

34. Parallèles entre la fermeture dorsale et la cicatrisation chez la drosophile Martin et Parkhurst 2004

35. La fermeture dorsale : fermeture type cordon de bourse (purse string)

36. Avancée lamellipodiale versus fermeture type « cordon de bourse » d’une plaie épithéliale in vitro Martin et Parkhurst 2004

37. Quels gènes contrôlent la fermeture dorsale ?

38. La cuticule larvaire chez la drosophile

39. Défaut cuticulaire d’un mutant affectant le plan d’organisation de la larve wimp sauvage classes phénotypiques

40. Le phénotype ouvert dorsalement

41. Hemipterous encodes a novel drosophila MAP kinase kinase, required for epithelial cell sheet movement (1995) Cell vol 83, 451-461 Bruno Glise, Henri Bourbon and Stéphane Noselli

42. Phénotype cuticulaire des embryons hep hep75 GLC hep1/hep75 hep1/hep1 sauvage Glise et al 1995

43. Nature de la mutation hemipterous (hep) Glise et al 1995

44. Le plan d’organisation non affecté des embryons hep Kr En sauvage hep Glise et al 1995

45. Développement embryonnaire sauvage

46. Développement embryonnaire d’un mutant bicoïd

47. Incapacité des embryons hep à étendre l’épiderme dorsal En sauvage hep Glise et al 1995

48. + pucE69 pucE69 Vues dorsales, stades tardifs Phénotype cuticulaire des embryons puckered (puc)

49. hep contrôle l’expression du gène puc dans la marge sauvage hep Glise et al 1995

50. Isolement de la séquence du gène hep Glise et al 1995