RCIU: Aspectos Moleculares

1. RCIU: Aspectos Moleculares CLAUDIA SERRANO SERRANO, M.D. Ginecología y Obstetricia Genética Reproductiva Laboratorio de Genética Reproductiva

2. RCIU: morbimortalidad • 2° causa de morbimortalidad perinatal • 30% de los RN que fallecen presentan RCIU • 40% de los mortinatos presentan RCIU, 53% pretérmino • Asfixia intraparto: 50%

3. RCIU: morbimortalidad Morbilidad del adulto: alteración en mecanismos de programación • Diabetes • HTA • Enfermedad coronaria

4. RCIU: posibles mecanismos • Factores Extrínsecos: insuficiencia placentaria, patología materna • Combinado • Factores endógenos fetales: Intrínseco

5. Fases del crecimiento fetal 1º trimestre 2º trimestre 3º trimestre

6. Patología materna Genotipo Infección Insuficiencia placentaria Defecto cromosómico Embarazo múltiple Drogas Ambiente + - - -/+ Potencial de crecimiento intrínseco - - - - Medio ambiente de soporte Percentil >95 Percentil 5 - 95 Percentil <5 Factores que regulan el crecimiento fetal

7. Patología materna Genotipo Infección Insuficiencia placentaria Defecto cromosómico Embarazo múltiple Drogas Ambiente + - - -/+ Potencial de crecimiento intrínseco - - - - Medio ambiente de soporte Anormal grande: 1-2% Normal grande: 1-2% Normal: 88-94% Normal pequeño: 2-4% Anormal pequeño:1-2% Normal: 1-2% Factores que regulan el crecimiento fetal

8. Posibles mecanismos moleculares • Hipercortisolemia • Cromosomopatías • Mosaicismo confinado a la placenta- Trisomía 16 • Difusión de oxigeno • Receptores de factores de crecimiento • Imprinting • Idiopático

9. RCIU: Hipercortisolemia Cortisol Cortisona 11B-HSD 1y2 Mantenimiento de las reservas de CHO Gluconeogénesis Disminución de sensibilidad a la insulina Efecto antinflamatorio Toxicidad: Bloquea acción de mineralocorticoides

10. RCIU: Hipercortisolemia Cortisol Cortisona 11B-HSD 1y2 • Tipo 1: Ausente en tejidos fetales • Tipo 2: Riñón, colon y placenta • Protección medula renal .... Mineralocorticoides • Placenta?? Aumento de cortisol durante gestación • Permitir la activación del eje H-A fetal

11. Cortisol  Cortisona (gen 11B-HSD2) • Aumento en la expresión de RNAm 11B-HSD2 durante la gestación • Embarazo normal Vs. RCIU • 12,8 +/- 0,8 vs. 10,2 +0,2 (P< 0,001)

13. CONCLUSIONES • Regulación del crecimiento fetal • Masa trofoblástica no influye • No mutaciones del gen • No imprinting • Metilación: silenciamiento del gen ??

14. Perfil endocrinológico de los niños con RCIU • Perfil hormonal: Tiroideo, PRL, péptido C, cortisol y factor de crecimiento insulina tipo. • 57 niños • Disminución del cortisol plásmatico en RCIU • Alteración del eje H-H • Disminución de IGF-I en los que no normalizan talla en dos años Fattal-Valevski A. et al. Pediatr Endocrinol Metab. 2005;18:671-6

15. Leptina: regula apetito, peso corporal y depósitos de grasa • No es indispensable para el desarrollo y crecimiento fetal • Tratamiento con dexametasona: hiperleptinemia materna + hipoleptinemia fetal = RCIU, HTA en ESE adulto

16. Niveles de leptina en placenta y sangre de cordón umbilical en RCIU y en diabetes gestacional • Leptina ejerce un efecto directo sobre el crecimiento fetal o modula el efecto de glucocorticoides?

17. RCIU: Trisomía 16 • Mutaciones en el gen 11B-HSD2 • Síndrome AME (Exceso aparente de mineralocorticoides) HTA severa • Mosaicismo confinado a la placenta Human Molec Reprod, 2000;17:64

18. RCIU: Difusión de oxígeno Fases de la angiogénesis placentaria • Desarrollo placentario temprano: angiogénesis de ramificación • Ocurre en condiciones hipóxicas • Desarrollo placentario tardío • Normoxemia

19. Hipoxemia: regulación hacia arriba. Normoxemia: regulación haca abajo. Angiogénesis ramificación Hipoxemia: regulación hacia abajo. Normoxemia: regulación hacia arriba No ramificación F.C. Vascular Endotelial (VEGF) F.C. Placentario (PlGF) VEGFR-1 y 2

20. RCIU: Difusión de oxígeno Tipo celular vascular Presión parcial de oxígeno Regulación de la respuesta celular Lecho vascular de baja resistencia

21. Anemia materna y embarazos de alturas: • Hipoxia pre-placentaria • Pre-eclampsia: • Hipoxia uteroplacentaria Aumento de angiogénesis de ramificación Disminución de impedancia mediada por capilares en la vasculatura placentaria

22. RCIU severo de inicio temprano: • Ambiente hiperoxémico Aumento de impedancia Inhibición de angiogénesis de ramificación Reducción en la capacidad de difusión del oxigeno

23. SSH: Subtractive/Suppressive Hybridization • Bibliotecas de ADNc: 2304 clones

24. SSH: Subtractive/Suppressive Hybridization • Bibliotecas de ADNc: 2304 clones

25. Placenta normal Placenta anormal: hipoxia 48 horas Preeclampsia RCIU aislado

26. Unión con RNA • Síntesis de proteínas • Apoptosis • Inflamación • Contacto intercelular • Angiogénesis • Mecanismos epigenéticos • Imprinting • Constitución del citoesqueleto • Transducción de señales • Ciclo celular • Metabolismo de lípidos Activación de 243 genes

27. Genes activados durante hipoxia  preeclampsia • hCG • Lactógeno placentario • Glicoproteínas específicas del embarazo • Genes IGFII – H19 – PSG4,5,7: Trascripción • en RCIU • SERPINE2 Y SERPING1: Angioedema

28. INSL4 Receptor Tirosin kinasa Apoptosis Diferenciación celular Crecimiento celular Fosforilación Metabolismo energético Proliferación celular

29. Correlación con los niveles de la fracción libre de hCG • en la placenta antes y después del parto: Apoptosis y necrosis • T21 y T18: Pro-EPIL en LA y suero materno

30. Expresión no balanceada de genes improntados en la placenta de fetos con RCIU • Microarray Affimetrix: 6 genes improntados • Aumento de la expresión de PHLDA2 (OP) • Disminución de la expresióm de MEST,MEG3, GATM, GNAS, PLAGL-I • Señalización endocrina, crecimiento tisular, funcion vascular, transporte de metabolitos, metabolismo oxidativo e inmunomodulación Placenta, 2005;22:45