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Identificación de ENTEROBACTERIAS

Identificación de ENTEROBACTERIAS. María C. Velázquez Ineza M. Rodríguez. Bosquejo. Characterísticas morfológicas Características bioquímicas Estructura antigénica Pruebas bioquímicas TSI PAD Agrupación e identificacción de enterobacterias MAC (FL) MAC (NLF).

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Identificación de ENTEROBACTERIAS

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Presentation Transcript

  1. Identificación de ENTEROBACTERIAS María C. Velázquez Ineza M. Rodríguez

  2. Bosquejo • Characterísticasmorfológicas • Característicasbioquímicas • Estructuraantigénica • Pruebasbioquímicas • TSI • PAD • Agrupacióne identificacciónde enterobacterias • MAC (FL) • MAC (NLF) • Mediosdiferenciales/selectivosadicionales • SMAC • HE • XLD • CIN • EnteroPluri kit

  3. Característicasmorfológicas • Colonias en BA, CA y medios no selectivostienden a ser: • Morfologíapoco notable • Grises • Húmedas • Grandes • Exepciones: Klebsiella, Proteus, y algunas de Enterobacter • Klebsiella - mucoide • Proteus – “swarming” • Pueden tener flagelos, cápsula, pili • Motiles a 37°C • Excepciones: • Klebsiella, Shigella, Yersinia • No forman esporas

  4. Característicasbioquímicas • Bacilos/cocobacilos GRAM (-) • Oxidasa (-) • Excepción: Plesiomonas • Todas fermentan glucosa, algunas lactosa • Anaerobios facultativos • Reducen Nitrato a nitrito • Photorhabdus, Xenorhabdus • Catalasa (+) TSI

  5. Estructuraantigénica Identificacióna travésde pruebasserológicas: Antígenosomático – O Pared celular Antígeno capsular – K Especiesencapsuladas Cápsula (E. coli, Klebsiella) Capa mucosa (Salmonella, Vi) AntígenoFlagelar – H Superficieflagelar Estructura antigénica de Salmonella

  6. Pruebasbioquímicas: • Prueba MR-VP • Producción de indol • Producción de ureasa • Utilización de citrato • Producción de fenilalanina deaminasa • Decarboxilación de lisina, arginina, ornitina • Fermentación de carbohidratos • Producción de H2S • Motilidad

  7. TSI Productores de gas No productores de gas K/A - H2S + Citrobacterfreundii Proteus mirabilis Salmonella spp. A/A - H2S + Citrobacterfreundii Proteus vulgaris Salmonella Arizonae K/A - H2S – E. coli Shigella spp. Yersinia pestis Citrobacter spp. Providencia spp. Serratia spp. A/A - H2S - Enterobacter spp. E. coli Serratia sp.

  8. PAD (-) (+) • “Phenyl-Alanine DeaminaseTest” • Determinasi el organismo produce la enzimadeaminasaparafenilalanina • Se necesita para la utilización del aminoácidofenilalaninacomofuente de carbono y energía para el crecimiento. (+) (-)

  9. MAC – Fermentadores de lactosa (FL) • (-) • (+)

  10. MAC – Nofermentadores de lactosa (NFL)

  11. NFL/MR(+) • PAD • H2S • H2S

  12. SMAC:Agar Sorbitol-MacConkey • Medio diferencial • Detecta la cepa patogénica de E. coli • O157:H7 • Patogénica – transparente • No patogénica – rosa/rojo • Se inocula a 37°C por 18-24 horas

  13. Mediosadicionales,Shigellay Salmonella HE “HektoenEnteric Agar” Mediomoderadamenteselectivo y diferencial Contienecitratode amonioférricoy tiosulfato en el medio Produce un precipitado negro en la presencia de H2S Shigella no produce H2S Colonias color verde Salmonella Produce H2S Colonias con puntosnegros Amarillo – E. coli

  14. Mediosadicionales, Shigella y Salmonella XLD “Xylose Lysine Desoxycholateagar” Medioselectivo / diferencial Desoxicolatode sodioinhibemicroorganismos gram+ Tiosulfato de sodio y citrato de amonioférricodetecta H2S Shigella No fermentaxilosa Coloniasrojas Salmonella Fermentaxilosa Produce H2S Colonias con negro Shigella Salmonella

  15. CIN“Cefsulodin-Irgasan-Novobiocin Agar” • AislamientoselectivoparaYersinia • Inhibe el crecimiento • E coli • Klebsiella pneumoniae • Salmonella • Shigella • Pseudomonas aeruginosa • Proteus mirabilis • Fermentanmanitol • Se vencoloniastransparentes con un puntorojo central, “bulls-eye”

  16. EnteroPluri Kit / EnteroTube • Identificación rápida de enterobacterias

  17. ¿Preguntas?

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