¿ Métodos alternativos?

¿Métodos alternativos? O FUTURO...

Contra a morte desnecessária ! • Teste clássico DL50 • Pode requerer 100 ou mais animais para estabelecer os limites de confiança estatísticos desejados • Avalia somente a mortalidade

Contra o mau estar animal! • Sem preocupações de conforto animal • Animais em gaiolas individuais • Sem uso de anestésicos e analgésicos (pelo menos não eficazes)

Contra o desperdício de recursos! • Experiências muito prolongadas; • Utilização excessiva de material; • Custos elevados.

“O desenvolvimento científico e o bem estar animal devem andar de mãos dadas”

Factores que influenciaram o aparecimento dos métodos alternativos • Melhor compreensão dos mecanismos de toxicidade a nível celular e molecular • Avanços nas áreas da engenharia genética e cultura de células • Equipamento laboratorial e computacional mais sofisticado

Interesse da indústria e dos governos na criação de testes mais baratos e de menor duração • Pressão da sociedade relativamente ao uso de animais Solução lógica e necessária...

Métodos Alternativos • Não implicam apenas substituição • Podem envolver o uso de animais, mas em menor quantidade ou de maneiras diferentes • Adoptam o príncipio dos 3Rs advogado por Russel e Burch: "Reduction, Refinement and Replacement".

Princípio dos 3R’s • “Reduction” refere-se aos métodos que resultam no uso de menos animais para adquirir a informação necessária • “Refinement” refere-se a alterações de procedimentos para eliminar ou minimizar a dor e o desconforto • “Replacement” refere-se aos métodos que substituem o uso de animais superiores conscientes por sistemas insensíveis.

Outras vantagens • Custos mais reduzidos • Tempo de realização e obtenção dos resultados mais curto • Permitem uma extrapolação mais segura (maior leque de informação sobre as diferentes características metabólicas das diferentes espécies)

Permitem a utilização de um grande intervalo de concentrações da substância a testar • Permitem uma maior sensibilidade nos ensaios(porque se pode obter respostas a nível molecular e celular quando se utilizam concentrações muito baixas dos compostos)

Principais grupos de Métodos Alternativos • Modelos Matemáticos (simulação de situações reais) • Modelos Humanos (relacionados com factores de extrapolação) • Modelos Audiovisuais (com recurso a imagem) • Modelos in Vitro (utilização de cultura de tecidos e organismos inferiores)

Exemplos de Métodos Alternativos Cultura de Tecidos (cultivadas fora do corpo, após a separação do seu tecido ou órgão original. Com este procedimento, não há o problema de diferença de espécies) - Embriões de galinhapara avaliar teratogenicidade - Teste com Stem cell embrionárias para avaliar embriotoxicidade - Corrositexavalia a capacidade de uma substância causar corrosão na pele

Organismos Inferiores - Bactérias e leveduraspara avaliar mutagenicidade - Teste “Ames”procura substâncias com potencial cancerígeno usando a bactéria Salmonella typhimurium - Insectos e moluscos - Fungos

Modelo QSAR (relaciona a estrutura molecular com a actividadebiológica) • Modelo PBPK/PD (relaciona a farmacocinética e farmocodinâmica com mecanismos fisiológicos) • Local Lymph Node Assay, LLNA - (avalia a fase de indução ao invés de fase de resposta na dermatite alérgica) • Sistemas de enzimas fixas em placa para avaliar efeitos biológicos – ELISA

Validação CientíficaLinhas de orientação gerais • Justificação científica do sistema de teste proposto • Utilização de reagentes de referência • Evidência da optimização dos métodos do teste

Protocolos e resultados devem ser fornecidos de forma explícita de forma a permitir a comparação interlaboratorial com o objectividade de demonstrar a sua replicabilidade • Replicabilidade, precisão, especificidade e sensibilidade do teste deverão ser demonstradas • Comparação dos resultados do teste com dados já existentes • Aplicabilidade em termos económicos

“A Experimentação animal é um privilégio e não um direito adquirido!”

Ana Cecília Marques Sheila Pedrosa José Maria Brito Paes Obrigado!

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