1 / 27

T.C. SAĞLIK BAKANLIĞI Verem Savaşı Daire Başkanlığı

T.C. SAĞLIK BAKANLIĞI Verem Savaşı Daire Başkanlığı. Uzm. Dr. Feyzullah GÜMÜŞLÜ Verem Savaşı Daire Başkanı. Mikrobakteri Kültürü. Yayma ve Kültürde Duyarlılık. Mikroskopi/Kültür. %25-65 Duyarlılık; Kültüre göre %30-50 Duyarlılık artışı; Mikroskopiye göre %90 Duyarlılık; 5000-10000 Basil/ml

mckenzie-hardin
Download Presentation

T.C. SAĞLIK BAKANLIĞI Verem Savaşı Daire Başkanlığı

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. T.C.SAĞLIK BAKANLIĞIVerem Savaşı Daire Başkanlığı Uzm. Dr. Feyzullah GÜMÜŞLÜ Verem Savaşı Daire Başkanı

  2. Mikrobakteri Kültürü

  3. Yayma ve Kültürde Duyarlılık

  4. Mikroskopi/Kültür • %25-65 Duyarlılık; Kültüre göre • %30-50 Duyarlılık artışı; Mikroskopiye göre • %90 Duyarlılık; 5000-10000 Basil/ml • %80-82 Birinci inceleme • %10-14 İkinci inceleme • %5-8 Üçüncü inceleme

  5. Kültür Basamakları Biyogüvenlik ve Kalite Güvencesi için; 1- Laboratuvar yerleşimi ve alt yapı 2- Ekipman yerleşimi 3- Gereç kullanımı 4- Örnek toplama 5- Bekleme ve transport 6- Metot seçimi Dekontaminasyon – Homojenizasyon Besi yeri

  6. İmmün Sistem Basil Miktarı Maruziyet Hastalık Çok Fazla Çok Uzun Çok Zayıf + + + + + + + + + + + + + + Kesin Fazla Uzun Zayıf Kuvvetle muhtemel + + + + + + ++ Az Kısa İyi + + + + + + + ++++ Muhtemel İhtimal dahilinde değil Çok Az Çok Kısa Çok İyi Biyogüvenlik ve Hastalık Gelişim Seyri

  7. Biyogüvenlik Düzeyi; BSL1 1- Laboratuvar yerleşimi ve alt yapı BSL 1 (WHO) WHO, (2004). Laboratory Biosafety Manual Third Edition WHO/CDS/CSR/LYO/2004.11

  8. Biyogüvenlik Düzeyi; BSL2 (WHO) WHO, (2004). Laboratory Biosafety Manual Third Edition WHO/CDS/CSR/LYO/2004.11

  9. Biyogüvenlik Düzeyi; BSL3 (WHO) WHO, (2004). Laboratory Biosafety Manual Third Edition WHO/CDS/CSR/LYO/2004.11

  10. 2- Ekipman Yerleşimi • Kalite – Biyogüvenlik laboratuvarı • Biyogüvenlik kabini • Class I • Class IIA • Class IIB • Santrifuj • 3000 X g;15 dakika; %95 sediment • RFC= 3000 x g, 15 dak. (1500 xg; %20 azalır) • Isı artışı(20°, 30°, 40°) (%13, %22, %30) azalır • Koagülatör • 80-85° 45 dakika

  11. 3- Gereç Kullanımı

  12. 4- Örnek Toplama

  13. 5- Bekleme ve Transport

  14. 6- Metot Seçimi • Homojenizasyon – Dekontaminasyon • Toksisite • %30-60 canlı Basil kaybı • %2-3 kontaminasyon • %5-10 bekleyenler için; • Maruziyet süresi

  15. Dekontaminasyon Metotları • Modifiye Petroff • NALC – NaOH • Zephiran trisodium phosphate • Oxalic acid • Sulphuric acid

  16. Modifiye Petroff • Avantajları • Basit, ucuz, etkili dekontaminasyon • 1/1 saat; 20/2 saat • Solüsyon stabil • Dezavantajları • Maruziyet süresi titizlik ister • Güçlü dekontaminasyon; %60 basil kaybı

  17. NALC - NaOH • Avantajları • Homojenizasyon güçlü • Petroff’ da ki %60 kayıp %30 • 1 örnek /40 dk. , 20 örnek /1 saat • Dezavanjları • Stabil olmayan solüsyon • Bovin albumin, filtre gereği (pahalı) • Kontaminasyon oranı fazla

  18. Diğerleri • Zephiran Trisodium Phosphate • Maruziyet süresi kritik değil • Basil kaybı %30 • 1 örnek /2 saat; 20 örnek /4 saat • Oxalic acid • İnatçı pseudomonas kontaminasyonlarında • Sulphuric acid • İdrar ve AMS (bazen)

  19. Metot Seçimi/Besiyerleri

  20. İdeal Besiyeri • Az sayıda (10-100) basil üreyebilmeli • Ekonomik olmalı • İdentifikasyona yardımcı olmalı • Kontaminanları inhibe edebilmeli • İlaç duyarlılık testleri için kullanılabilmeli

  21. Diagnostik Besiyerleri • Yumurta bazlı besiyeri (L J, Ogawa) • Agar bazlı besiyeri (MB7H10-11) • Sıvı besiyerleri • Herman – Kirschner sıvı besiyeri • Dubos OAA sıvı besiyeri • Middlebrook 7H12 • BACTEC 12B • MGIT

  22. Yumurta bazlı Besiyeri • Avantajları • Kolay, ucuz, • Uzun süre saklanabilir, • Kontaminasyona dirençli, • Koagülasyon • Malaşit yeşili • Santrifuj ve nötralizasyon gerekmeksizin ekim (Ogawa)

  23. Yumurta bazlı Besiyeri • Dezavantajları • 6 - 8 Hafta üreme süresi • Özellikle az basil içeren örneklerde • Sert dekontaminasyon prosedürlerinde • Kontaminasyonda örnek kaybı • Uygulama hataları • Godeler ve hava kabarcıkları

  24. Agar Bazlı Besiyeri • Avantajları • Daha erken üreme • Tanımlayıcı koloni yapısı • Dezavantajları • Pahalı • CO2 gereksinimi • Gün ışığından ve ısıdan etkilenme

  25. Sıvı Besiyerleri(Radyometrik – Florasan indikatörlü) • Avantajları • Erken üreme • 5-7 gün ; BACTEC, • 11-12 gün; MGIT • Özgün - duyarlı • Dezavantajları • Hem besiyeri hem cihaz pahalı • MTB – MOTT ayırımı ilave süreç ister • Radyometrik atık (BACTEC)

  26. DEĞERLENDİRME • Hem Dekontaminasyon – Homojenizasyon prosedürü için hem de besiyeri için pek çok metot kullanılmıştır. Ancak hiçbirine üniversal olarak en iyi denilememiştir. Çünkü metotların uygunluğu teknik kapasite, eğitilmiş laboratuvar personeli, uygun ekipman tipi ve kalibrasyonu ile yakından ilgilidir.

  27. SONUÇ • Tüberküloz Kontrol Programı içerisinde (Verem Savaş Hizmetlerinde) Löwenstein Jensen en uygun seçimdir. • Klinik yaklaşımda; zor elde edilen, tekrarı güç olan örneklerde, Löwenstein Jensen ve sıvı besiyerlerine eşzamanlı ekim uygundur.

More Related