VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

1. VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

2. VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA FamiliaRetroviridae SubfamiliaOrthoretrovirinae Género Lentivirus • Tipos: VIH-1 y VIH-2 • Virus esférico envuelto (90–130 nm) • Genoma:2 hebras simples de ARN + (9,8 kb) • Proteínas de Superficie gp120-gp41 // gp105-gp36 • Polimerasas unidas al ARN p65/51; p31 // p68 – p34 • Proteinas del Core p17 -p24 // p16 - p26

3. VIH-1 VIH-2 • Los viriones contienen 2% de ácido nucleico.(2 ARN (+) y 1 ARNt (trp, pro,lys) • Genoma : 2 moléculas de ARN de sentido positivo que poseen cap en el extremo 5’ y una cadena polyA en su extremo 3’. • Su tamaño varía entre 8 a 11 kb. R: repetidos directos (18-250 nt) U5: región no codificante. Comienza retrotranscripción PBS: sitio de union del primer para la retrotranscripción Leader: aprox 90-500 nt. Está en el extremo 5’ de todos los ARNm PPT: zona de polipurinas. (aprox 10 nt). Lugar de iniciación de la síntesis de la hebra + durante la retrotranscripción U3: Contiene los elementos promotores de la transcripción del provirus gag: codifica proteinas del Core y la PR pol: codifica enzimas (RT, IN) env: codifica glicoproteinas de superficie

4. Organización genómica del HIV-1

5. Ciclo replicativo del HIV

6. DIVERSIDAD GENETICA DEL VIH TIPOGRUPOSUBTIPORECOMBINANTES M (mayor)A,B,C,D,E,F B/F, A/G, A/E, A/C, G,H,I,J,K,LA/G/J HIV-1 O (outlier) N (no M, no O) HIV-2 A,B,C,D,E,F

7. Alta tasa de variabilidad • Alta tasa de error en la lectura de la Retrotranscriptasa: 1 nucleótido/ciclo replicativo • Alta tasa de replicación viral: 4,4 x 1010 particulas virales por dia. • Recombinacion retroviral: “Formas Recombinantes Circulantes” (CRFs), • “Formas Recombinantes Unicas” (URFs) VIRUS HETEROCIGOTO VIRUS RECOMBINANTE

8. CRFs URFs A B C D E F G H J K Sin Clasificar Sin Secuenciar ESTRUCTURA GENÓMICA DE LAS FORMAS RECOMBINANTES

9. Distribución geográfica del VIH (Tipos,Subtipos y CRFs) A B,A,C,D,G A A,B A,C,D,F A,B A,D,E,O B A,B A A,B, C,D B,D B ,C,D B/F,B/D CRF12-BF A B,F,C VIH-1 VIH-2 ?

10. Infección asintomática Seroconversión SIDA 4-8 semanas aprox. 10 años 2-3 años HISTORIA NATURAL DE LA INFECCION POR VIH

11. ARN viral HIV CICLO DEL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA • PCR DNA proviral (cualitativa) • RNA viral (cualitativa) • Carga Viral • (nºde copias ARNv /ml) • (cuantitativa) Células blanco: Linfocitos T CD4, Monocitos , Macrofagos , Células de Langherans , Células dendríticas

12. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO • Estudio de respuesta inmune humoral: IgM, IgA, IgG • Test de Tamizaje : • Enzimo inmuno análisis (EIA) • Test rápidos • Aglutinación de partículas • Test Confirmatorios • Western Blot (WB) • Ensayo en Línea (LIA) • Detección directa de presencia viral • Estudio de Proteinas virales (Ag p24) • Estudio de Acidos nucleicos: ADN proviral • ARN viral

13. Estudio de respuesta inmune humoral: IgM, IgA, IgG • Los test serológicos se basan en la interacción Antígeno – Anticuerpo. • Test de Tamizaje • Son altamente sensibles para poder detectar los Ac en la muestra. • Detectan anticuerpos para HIV-1 y HIV-2 (sin lograr discriminar) • Detectan anticuerpos contra grupo M y O • Antígenos: Lisado total de virus, Proteinas recombinantes, Peptidos sintéticos • Test Confirmatorios • Son altamente específicos para confirmar con certeza la presencia de Ac. Específicos contra HIV. • Pueden discriminar infección por HIV-1 o por HIV-2

14. EIA 4ª GENERACION Proteinas recombinantes Peptidos sinteticos Ac paciente Ag viral Ac conjugado E E Sustrato HIV-2 env HIV-2 env HIV-1 env HIV-1 env HIV-1gag HIV-1gag HIV-2 env HIV-2 env E E E HIV-2 HIV-1 env HIV-1 env HIV-1 pol HIV-1 pol HIV-O HIV-O Soporte Solido • Muy buena especificidad • Detecta bajos títulos de Anticuerpos(seroconversión) • Buena sensibilidad para Ac. anti HIV-2 y Ac. anti grupo M y O de HIV-1, • Detecta IgG e IgM • Detecta Ag virales • HIV-1 (grupo M y O) • HIV-2

15. TEST RAPIDOS

16. TEST CONFIRMATORIOS LIA WB mejorado Western Blot ID muestra 3.+ 1+ +/- gp120 gp 41 p31 p24 P17 gp105 gp36 Criterios: WB Positivo: p24,gp41,gp120/160 (p24 con al menos otra) WB Negativo: Ausencia total de Bandas

17. Algoritmo para el diagnóstico serológico de la infección por VIH No Reactivo informar Técnicas de Tamizaje Laboratorio Periférico Banco de Sangre Reactivo Laboratorio de Referencia 2 Técnicas de Tamizaje Distinta Configuración antigénica No Reactivo (-/-) informar Reactivo (+/+) Discordante (+/-) WESTERN BLOT INFORMAR Positivo * Indeterminado Negativo Repetir serología en 30 días

18. Diagnostico Molecular de la Infección por HIV • Detección cualitativa de Acido Nucleico (ADN proviral o ARN viral) • Diagnóstico en niños nacidos de madres seropositivas • Serología indeterminada • Hipoglobulinemia • Detección cuantitativa de Acido Nucleico (ARN viral) • Carga Viral ( nº copias de ARN v/ml) en pacientes infectados • Inicio de tratamiento • Evaluación de tratamiento • Cambios de tratamiento • Estudio resistencia a drogas antiretrovirales

19. infectado serorrevertido IgA en sangre:indicador de una respuesta inmunológica específica a la infección viral en el niño.

20. PCR - PCR - PCR + PCR + Seguimiento en el laboratorio del niño nacido de madre VIH + 48 hs – 2 semanas de vida 1 – 2 meses de vida >5 meses de vida PCR, Elisa, Western Blot PCR - PCR+- • PCR • Carga Viral • Población Linfocitaria PCR PCR - PCR + PCR + PCR - PCR Carga Viral Población Linfocitaria PCR Carga Viral Población Linfocitaria PCR PCR PCR + PCR - PCR - infectado nueva PCR Infección poco probable nuevaPCR

21. Seguimiento en el laboratorio del niño nacido de madre VIH + • Diagnostico de no infección: 3 PCR – • 2 muestras negativas en dos momentos distintos en niños >1 mes de vida, más 1 muestra negativa en > 4 meses de vida • Diagnostico de infección: 3 PCR + • 3 muestras positivas en dos momentos distintos y al menos una de ellas en niños > 4 meses • Diagnostico de serorreversión: • 2 o más muestras con ELISA y Western Blot negativos entre los 6 y 18 meses de edad y dosificación de inmunoglobulinas normales En todos los casos seguir con ELISA hasta 18 meses de edad

22. El LABORATORIO de VIROLOGÍA EN LA INFECCIÓN POR VIH EN PEDIATRIA • Diagnostico de la Infección por VIH • Niños mayores de 18 meses: ELISA - Western Blot • Niños menores de 18 meses: Determinación Cualitativa • ADN proviral • ARN viral • Seguimiento de Niños infectados • Carga Viral : nº de copias de ARN v/ ml Inicio de tratamiento • Evaluación de tratamiento • Cambios de tratamiento • Estudio de Resistencia a drogas antirretrovirales

23. ADULTOS Y NIÑOS QUE VIVIAN CON EL VIH A FINES DEL 2006

24. Epidemia de SIDA en Uruguay 1983 inicio de la epidemia del VIH/SIDA 6.463 casos acumulados de VIH + (1983- 06/2006) 2.895 casos acumulados de SIDA (1983- 06/2006) 9.358 casos acumulados VIH/SIDA (1983-06/2006)

25. MECANISMO DE TRANSMISIÓNSIDA EN URUGUAY - 2006

26. RELACION H/M EN SIDA ANUALURUGUAY.- Años 1991-2005.

27. VIH Y SIDA POR GRUPOS ETARIOSURUGUAY.- Años 1983-2005.

28. Estado de Situación • Tendencia creciente del VIH /SIDA Prevalencia de 0,23% en el 2000 a 0,45% 2004 • Pico máxima incidencia en población joven, con aumento progresivo de las mujeres. JUVENILIZACIÓN Y FEMINIZACIÓN DE LA EPIDEMIA • La situación de vulnerabilidad de mujeres y adolescentes / jóvenes, y de las poblaciones con prevalencia mayor a 5%:usuarios de drogas, hombres que tienen sexo con hombres (HSH), personas privadas de libertad,

29. Uno de los riesgos de ésta epidemia es elSilencio Rompamos el silencio y derribemos los obstáculos que impiden una prevención y atención del VIH/SIDA eficaces.