1 / 24

Chemia koloru cz.6

Chemia koloru cz.6. Luminescencja c.d. Prof. Daniel T. Gryko. Plan wykładu. Chemoluminescencja Bioluminescencja Sondy fluorescencyjne – obrazowanie optyczne Białka fluorescencyjne (Green fluorescent proteins). Podstawy zjawiska. Luminescencja

scout
Download Presentation

Chemia koloru cz.6

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Chemia koloru cz.6 Luminescencja c.d. Prof. Daniel T. Gryko

  2. Plan wykładu • Chemoluminescencja • Bioluminescencja • Sondy fluorescencyjne – obrazowanie optyczne • Białka fluorescencyjne (Green fluorescent proteins)

  3. Podstawy zjawiska Luminescencja Emisja fotonów (w zakresie ultrafioletu, widzialnym i podczerwonym) z elektronowych stanów wzbudzonych. Elektroluminescencja Pod wpływem prądu elektrycznego Chemiluminescencja Pod wpływem reakcji chem. Fotoluminescencja Pod wpływem światła

  4. Podstawy zjawiska Chemiluminescencja Emisja fotonów z elektronowych stanów wzbudzonych na które cząsteczka dostała się wskutek reakcji chemicznej 1838-1914

  5. Co i jak?

  6. ‘Lofina’ B. Radziszewski, Chem. Ber. 1885, 18, 355-358.

  7. Zastosowania chemiluminescencji • Rozrywka (latawce, ‘świecące patyki’) • Analiza gazów (np. NO 1ppb) • Analiza związków organicznych • Sekwencjonowanie DNA • Detekcja biomolekuł

  8. ‘Sticks’ • American Cyanamide Company 1960

  9. Wzmocniona chemiluminescencja • Peroksydaza chrzanowa jest przyłączana do interesującej nas biocząsteczki • Ten kompleks katalizuje przekształcenie chemiluminoforu w wzbudzony emiter, który dalej utleniany H2O2 przechodzi w stan trypletowy (C=O) • Ten ostatni przechodząc w stan podstawowy emituje światło

  10. Bioluminescencja Bioluminescencja Produkcja i emisja światła przez żywy organizm. Świetlik (Photinus pyralis) Common glowworm (Lampyris Noctiluca)

  11. Co i dlaczego? J. Am. Chem. Soc. 2010, Grzyb (Panellus stipticus)

  12. Sondy fluorescencyjne • Jedna z najważniejszych metod badania komórek • Znakowanie (labelling) • Możliwość wielokrotnego znakowania

  13. Sondy fluorescencyjne - wymagania • Selektywne wiązanie z pewnych typem komórek, organelli lub cząsteczek • Brak toksyczności • Wysoka • Fotostabilność • Pozostawanie w komórce… • Kompatybilność ze źródłłem wzbudzenia

  14. Sondy fluorescencyjne – potrójne znakowanie • Niebieskie (Oregon green), zielone/żółte (Alexa 588), Cy5 (czerwone)

  15. Przykładowe sondy fluorescencyjne

  16. Białka fluorescencyjne • Odkrycie w 1962 (Aequoreavictoria) • Nagroda Nobla w 2008 Osamu Shimomura Martin Chalfie Roger Tsien

  17. Białka fluorescencyjne "Roger Y. Tsien - Nobel Lecture". Nobelprize.org. 30 Oct 2010 http://nobelprize.org/nobel_prizes/chemistry/laureates/2008/tsien-lecture.html "Osamu Shimomura - Nobel Lecture". Nobelprize.org. 30 Oct 2010 http://nobelprize.org/nobel_prizes/chemistry/laureates/2008/shimomura-lecture.html

  18. GFP- jak to działa? • Właściwości spektroskopowe to rezultat interakcji chromoforu z resztami aminokwasowymi ‘dookoła’

  19. Dlaczego GFP • Właściwości spektroskopowe mogą być zmieniane za pomocą technik biologii molekularnych • Łatwo przyłączalne do innych białek • Tylko tlen niezbędny • Nieinwazyjne • Wzbudzenie 450-650 nm

  20. Modyfikacje genetyczne

  21. GFP – modyfikacje genetyczne

  22. GFP dziś

  23. GFP – zachód słońca

  24. GFP - zastosowania • Sensory • Wizualizacja związków biologicznie czynnych w komórkach • Mikroskopia fluorescencyjna • Polarność rozpuszczalnika • Pomiary gęstości cieczy

More Related