METODE MICROSCOPICE DE DIAGNOSTIC

1. METODEMICROSCOPICE DE DIAGNOSTIC Diagnosticul histopatologic; Citodiagnosticul.

2. DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC • Definiție : Este diagnosticul stabilit pe baza examinării microscopice a secțiunilor histologice. Se efectuează pe produse recoltate prin: • BIOPSIE (recoltarea unor fragmente de țesuturi / organe în timpul vieții); a. Microbiopsia: • Puncția – biopsie (pentruorganele profunde: ficat, splină, rinichi, măduvă osoasă); • Chiuretajul (pentru mucoase: endometru, col uterin, cavitatea bucalăsau leziuni superficiale: piele); • Endobiopsia (mucoasa gastrică, rectală, laringiană, bronșică). b. Biopsia chirurgicală: • Incizională (în scop diagnostic); • Excizională (în scop diagnostic și terapeutic). 2. EXEREZĂ CHIRURGICALĂ– piese de exereză chirurgicală. 3.PRELEVARE DE FRAGMENTE DE ȚESUTURI / ORGANE ÎN TIMPULNECROPSIEI • prelevate necropsice.

3. DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC Endoscop Endobiopsie colonică

4. Puncția biopsie hepatică

5. Produs de chiuretaj uterin Hiperplazie endometrială Vilozități coriale (placentare)

6. BILET DE TRIMITERE CĂTRE LABORATORUL DE ANATOMIE PATOLOGICĂ Serviciul medical în care s-a efectuat recoltarea............ Nr. de înregistrare / Data........... Către Laboratorul de Anatomie Patologică, Numele și prenumele bolnavului............................................................... Vârsta................Profesia.................Domiciliul............................................ Diagnostic clinic.......................................................................................... Antecedente fiziologice și patologice.........Tratamente efectuate............. Produsul de biopsie.............................Fixator............................................ Semnătura și parafa medicului (care a efectuat recoltarea)

7. DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC Timpii de prelucrare a prelevatului tisular: • Recoltarea (indicații): • leziuni întinse → biopsii multiple, • leziuni ulcerate → recoltare din margine • Fixarea: formol 10% tamponat, lichid Carnoy, Bouin • Includerea la parafină • Secționarea blocurilor tisulare la microtom (3 – 5μ) • Colorarea secțiunilor histologice.

8. DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC Tehnici de colorare: • Tehnici uzuale: • Hematoxilină-Eozină, • Tricromice (van Gieson, Simionescu, Masson); • Tehnici histochimice: • PAS (MPZ neutre, glicogen, membrane bazale, fungi); • Fontana/Grimelius (granule neurosecretorii); • Gordon-Sweets, Gomori (fibre de reticulină, membrane bazale); • Perls (hemosiderina – Fe3+); • Fontana (melanina); • von Kossa (calciu); • Negru Sudan, Sudan 3, Scharlach (lipide neutre); • Roșu Congo (amiloid); • Albastru Alcian (mucine acide).

9. Unitatea(Laboratorul de anatomie-patologică)................................... Nr. de înregistrare................................................................................. Data examinării..................................................................................... Buletinul de diagnostic anatomo-patologic Numele și prenumele bolnavului.............................Vârsta................... CNP ..............................Clinica (în care este internat pacientul).......... Diagnostic clinic.................................................................................... Descriere detaliată a modificărilor constatate la ex. microscopic........ ......................................................................................................... Concluzii finale (diagnostic histopatologic)........................................... Semnătura și parafa medicului anatomo- patolog

10. CITODIAGNOSTICUL • Definiție:Este diagnosticul stabilit pe baza examinării microscopice a modificărilor morfologice ale celulelor (izolate) conținute de diferite produse biologice etalate pe lame (frotiu). • Avantaje: • Oferă un diagnostic rapid; • Este ieftin; • Puțin traumatizant; • Ușor de repetat; • Util în acțiunile de screening.

11. CITODIAGNOSTICUL Tehnici de recoltare a produselor patologice • Exfoliere(spută, secreție prostatică, mamară, vaginală, cervicală); • Puncție-aspirațiedin revărsate seroase (lichid pleural, peritoneal, articular), conținut structuri chistice; • Grataj/periaj(col uterin, tract respirator); • Lavaj organe cavitare (căi respiratorii, vezică urinară); • Amprentare(leziuni cutanate, ganglioni limfatici); • Puncție aspirație cu ac fin (tiroidă, prostată, glandă mamară, pancreas), tumori solide profunde, măduvă osoasă.

12. BILET DE TRIMITERE CĂTRE LABORATORUL DE ANATOMIE-PATOLOGICĂ Serviciul medical în care s-a efectuat recoltarea............ Nr. de înregistrare / Data........... Către Laboratorul de Anatomie Patologică/Citodiagnostic, Numele și prenumele bolnavului................................................................... Vârsta............CNP..................Profesia.................Domiciliul........................... Diagnostic clinic.............................................................................................. Antecedente fiziologice și patologice.........Tratamente efectuate................ Felul produsului din care s-a efectuat frotiul..................Nr. de frotiuri......... Semnătura și parafa medicului (care a efectuat recoltarea)

13. CITODIAGNOSTICUL Timpii de execuție a frotiurilor • Etalarea • Directă:secreții naturale, puroi, produse obținute prin puncție-aspirație din organe solide, amprentare; • După centrifugare 5-10 minute, apoi etalarea sedimentului: lichide din revărsatele seroase, structuri chistice, lavaje și urină. 2. Fixarea • Agitare în aer câteva secunde și uscare (pentru colorația May-Grunwald-Giemsa); • Alcool 96% (pentru colorația Papanicolau); 3. Colorarea • MGG - foarte simplă • Papanicolau - pentru citologia cervico-vaginală, bronșică • Speciale pentru a evidenția lipidele, glicogenul, mucinele • Imunocitochimie

14. Frotiu de sânge MGG

15. Frotiu lavaj bronșic Frotiu inflamator Frotiu tumoral

16. Frotiu cervical

17. Amprentă tumorală ganglionară

18. Laboratorul care a efectuat citodiagnosticul.............. Nr. de înregistrare....................................................... Data examinării........................................................... Buletin de citodiagnostic Numele și prenumele pacientului ............................................. Vârsta............ CNP......................Clinica ...................... Medicul care a trimis ......................... Diagnostic clinic................................................................................................ Descrierea modificărilor constatate la examenul microscopic ........................ Concluzii (diagnostic sintetic) .......................................................................... Recomandări ..................................................................................................... Semnătura și parafa medicului citolog

19. Tehnici speciale de diagnostic Imunohistochimia • Imunofluorescența pentru detectarea (prin marcare cu coloranți fluorescenți) autoanticorpilor, antigenelor, complexelor antigen-anticorp sau fracțiunilor complementului. • Imunoperoxidaza (prin metoda peroxidază-antiperoxidază sau/și complex Avidin-Biotin) utilizează anticorpi monoclonali/policlonali pentru detectarea: • Originii celulelor neoplazice (diagnosticul diferențial între carcinom-sarcom-limfom): • Citokeratină-carcinom; • Antigen comun leucocitar-limfom; • Mioglobină-rabdiomiosarcom; • Vimentin-tumori conjunctive; • Antigenul factor VIII-tumori vasculare. • Antigenelor oncofetale în tumori (α-feto-proteina, antigenul carcinoembrionar); • Hormonilor /receptorilor hormonali; • Oncogenelor, genelor supresoare tumorale (p53); • Tiparea imunofenotipică a limfoamelor maligne.

20. Tehnici speciale de diagnostic Histoenzimologia detectarea enzimelor; Microscopia electronică pentru diferențierea între: Carcinom-melanom-sarcom; Adenocarcinom-mezoteliom; Timom-limfom-seminom; Tumori cu celule mici, tumori cu celule fusiforme; Tumori endocrine și non-endocrine; Nefropatii glomerulare cu mecanism imun. Tehnici de biologie moleculară: PCR (Polymerase Chain Reaction); Citometria în flux pentru analiza ADN (ploidia); Hibridizarea in situ pentru identificarea fragmentelor de ADN; Analiza rearanjării genelor.