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Techniken Mikroskopie, Gewebeaufschluß und Färbung. D-Praktikum Anatomie der Pflanzen Marcus Koch, Christoph Dobe š HIP, Abteilung Biodiversität und Pflanzensystematik. LICHTMIKROSKOPIE Köhlersche Beleuchtungsanordnung. Prinzip der konjugierten Ebenen Homogene Ausleuchtung der Präparateebene
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TechnikenMikroskopie, Gewebeaufschluß und Färbung D-Praktikum Anatomie der Pflanzen Marcus Koch, Christoph Dobeš HIP, Abteilung Biodiversität und Pflanzensystematik
LICHTMIKROSKOPIEKöhlersche Beleuchtungsanordnung Prinzip der konjugierten Ebenen Homogene Ausleuchtung der Präparateebene Keine Abbildung von Teilen der Mikroskopoptik in der Bildebene Einstellbarkeit der Apertur über die Kondensorblende Vermeidung von Streulicht (s.u.) durch Regulierbarkeit der Leuchtfeldfläche http://www.mikroskopie.de/kurse/koehlertheorie.htm
LICHTMIKROSKOPIEweitere Verfahren der Beleuchtung Kritische Beleuchtungsanordnung Projektion einer Mattscheibe in die Nähe der Objektebene Kontrasterhöhung Dunkelfeld Phasenkontrast Interferenzkontrast Färbungen http://www.mikroskopie-fuer-anfaenger.de/index.shtml
MaterialauswahlBewußte Auswahl des Objektes hinsichtlichtaxonomischer, phylogenetischer Zugehörigkeit Wahl des pflanzlichen Organes oder Gewebes Entwicklungszustand (Ontogenie) Schnittebene bzw. Perspektive der Betrachtung http://www.puc.edu/Faculty/Gilbert_Muth/art0059.jpg
GewebeaufschlußErzielen eines dünnen (mikroskopierbaren) PräparatesSchnittpräparat – Herstellung mittels Rasierklinge oder Mikrotom Quetschpräparat – gängige Methodefür zytologische Untersuchungen
Esau 1960 GewebeaufschlußMatzerationspräparat – Zytologie, HolzanatomieZupf- und Schabepräparat – z.B. Indument Aufhellungspräparat – ungeschnittene Pflanzenteile oder dicke Schnitte
Färbung– von Organellen, Zellwand, Ein- und Auflagerungen, SpeicherstoffenZiel: spezifischer Nachweis und Kontrastierung
FärbungSafranin-AstrablauKontrastfärbung von verholztenund unverholzten Zellwänden
FärbungPhloroglucinspezifische Anfärbung von Lignin, d.h. von verholzten Gewebenethanolische Phloroglucinlösung + HCl
FärbungKarminessigsäureSchnellfärbung von Zellkernen (Chromatin)kurzes, schonendes Aufkochen des Gewebesin KE
EinbettungObjektträger und 0,17 mm DeckglasMedien für die Einbettung: Wasser - Standardmedium Ethanol – luftreiches Gewebe Glycerin – Dauerpräparat, chemisch hydrophobe Objekte Kanadabalsam, Euparal – Dauerpräparat Zuckerlösung – Plasmolyse
DokumentationZeichnung Dauerpräparat Objekt: Taxon, Organ Name des Verfassers Datum Färbemethode Objekt: Taxon, Organ Name des Verfassers Schnittrichtung Datum Färbemethode Vergrößerung, Maßstab Überblicks- und Detailzeichnung