FIZIOLOGIA TROMBOCITELOR

1. FIZIOLOGIA TROMBOCITELOR

2. = cele mai mici elemente figurate ale sângelui = fragmente citoplasmatice anucleate de megacariocite cu origine în măduva osoasă hematogenă. - au capacitatea de a adera la pereţii vaselor sanguine lezate şi de a forma agregate celulare => rol în hemostază. TROMBOCITOPOIEZA = 4-5 zile - înmăduva osoasă hematogenă. CSP Compartiment Celula stem mieloidă de proliferare CFU-Meg (unităţi formatoare de colonii megacariocitare)

3. Megacarioblastul Megacariocitul bazofil (promegacariocitul) Compartiment Megacariocitul granularde megacariocite Megacariocitul trombocitogen Citoplasma megacariocitului trombocitogen se fragmentează => Trombocitele adulte. • Un megacariocit trombocitogen eliberează între 2000-7000 de fragmente citoplasmatice. • Producţia zilnică de trombocite fiind de 2,5 x 109/kg corp (40000/l/zi).

4. Trombopoieza Megakarioblast Promegakariocit Megakariocit Metamegakariocit Trombocite

6. Reglarea trombocitopoiezei - este dependentă de masa şi numărul de trombocite circulante. - Scăderea numărului de trombocite circulante => • reglare rapidă - mobilizarea depozitului splenic de trombocite ce conţine 1/3 din numărul total de trombocite circulante; • reglare întârziată -cu durata de 3-5 zile; = stimularea formării de trombocite ca urmare a eliberării unor factori stimulatori ai trombocitopoiezei: 1. Trombopoietina (Tpo) - este produsă de ficat, rinichi, muşchi neted, splină, măduvă osoasă şi chiar din unele celule endoteliale şi fibroblaşti. - în circulaţie se fixează pe receptorii specifici de la nivelul trombocitelor circulante, după care este rapid inactivată. - scăderea numărului de trombocite => Tpo libera => activarea trombopoiezei.

7. - creşterea numărului de trombocite circulante => fixarea excesivă a Tpo, cu reducerea efectelor sale asupra trombocitopoiezei. - acţiunea Tpo asupra celulelor stem necesită prezenţa unor citokine (interleukinele Il-1 şi IL-6), iar efectul Tpo asupra celulelor progenitoare este potenţată de IL-11. 2. Citokine • Citokine cu efect de stimulare a trombocitopoiezei: - IL-3, GM-CSF cu efect de stimulare asupra cel. progenitoare; - IL-3 şi IL-6, împreună cu IL-1, IL-7 şi IL-11, potenţează efectul Tpo de “orientare” a celulelor stem spre linia megacariocitară. • Citokine cu efect de inhibare a trombocitopoiezei: - factorul de creştere şi transformare (TGF), - IL-2 - factorul de necroză tumorală (TNF) - interferon (IFN) .

8. CINETICA TROMBOCITARĂ - Numărul trombocitelor circulante = 150.000-400.000/mm3 - Durata de viaţă = 8-10 zile - La subiectul normal: • 2/3 din trombocite se găsesc în circulaţia generală • 1/3 sunt sechestrate în splină = rezervor de trombocite Numărul de trombocite este influenţat şi de schimburile continue dintre aceste două compartimente. La nivelul splinei: - trombocitele cu volum, densitate şi funcţii trombocitare diminuate, sunt degradate de către macrofagele splenice, din ficat şi plămân. - fiziologic, sunt distruse doar trombocitele îmbătrânite - patologic: în caz de splenomegalie - intensificarea distrucţiei plachetare splenice => splenectomia = manevră terapeutică

9. STRUCTURA MORFOFUNCŢIONALĂ - Trombocitele = fragmente citoplasmatice anucleate - F = 2 - 5 mm, grosimea = 0.5 - 1 mm, volumul mediu = 5.8 mm3 . La microscopul optic - zonă centrală - cromomerul/granulomerul, cu granulaţii azurofile - zonă periferică - hialomerul, clară, aparent omogenă. La microscopul electronic - 3 zone 1. Zona perifericăeste alcătuită din: • glicocalix = strat amorf de glicoproteine care au proprietăţi antigenice şi rol de receptori (pentru ADP, trombină, serotonină, adrenalină, PG, factori plasmatici ai coagulării (V şi X ). - Glicoproteinele plachetare au rol în procesele de activare şi agregare plachetară

10. atmosfera periplachetară- deasupra glicocalixului = strat de factori plasmatici ai coagulării adsorbiţi pe suprafaţa membranei plachetare + serotonină, catecolamine, albumină plasmatică. • membrana celulară • zona submembranoasă- conţine microfilamente de actină • sistemul de membrane - Sistemul canalicular deschis = invaginaţii tubulare ale membranei plachetare care se răspândesc în citoplasmă; are rolul de a permite pătrunderea intracelulară a unor constituenţi plasmatici şi eliminarea factorilor trombocitari secretaţi. - Sistemul tubular dens - este asociat celui canalicular deschis şi are rolul unui reticol endoplasmatic, de stocare a calciului intracelular.

12. 2. Zona citoplasmatică = zona contractilă • Reţea de microtubuli submembranari- din alfa şi beta tubulină - contribuie la menţinerea formei de disc a trombocitelor neactivate • Reţeaua de microfilamente contractile - Actina = principala proteină contractilă; filamentele de actină încorporează troponină şi tropomiozină - Miozina are situsuri de fosforilare sub acţiunea MLCK (miozin-light C kinaza) la nivelul lanţurilor uşoare. - Rol: intervin în modificarea formei trombocitelor activate dintr-o formă discoidală într-una sferică cu multiple prelungiri, rol în secreţia plachetară şi retracţia cheagului

13. 3. Zona organitelor= zona cu funcţia predominant secretorie Sistemul granulaţiilor plachetare- cuprinde: • Granulele dense = organite de stocare a factorilor agreganţi trombocitari (Ca2+, ADP, ATP, serotonină, catecolamine, Mg2+) • Granule alfa - conţin proteine biologic active : - proteine adezive (fibrinogen, fibronectină, f. von Willebrand); - modulatori de creştere şi factori procoagulanţi (fibrinogen, factori V şi XI, PAF, PAI-1) . • Granule cu glicogen . Lizozomii - conţin enzime (hidrolaze acide, catepsină, elastină, colagenază); conţinutul lizozomal este deversat în mediu numai în urma unei stimulări intense. Alte organite- peroxizomi ce conţin peroxidaze, - mitocondrii; - ribozomi.

14. 5. FUNCŢIILE TROMBOCITULUI 1. Rol în hemostaza primară - oprirea iniţială a sângerării şi formarea dopului hemostatic plachetar. - are la bază procesele de activare, aderare, agregare şi metamorfoză vâscoasă trombocitară 2. Rol în hemostaza secundară (coagulare) - activitatea procoagulantă - prin • adsorbţia la nivelul atmosferei periplachetare a factorilor plasmaticiactivaţi ce aparţin mecanismului intrinsec al coagulării (XII, XI, X, VIII, V) cu protejarea acestor factori de inactivarea lor de către proteazele plasmatice. • eliberarea factorilor trombocitari conţinuţi în compartimentul granular în cadrul procesuluidesecreţie plachetară .în funcţie de intensitatea stimulării (primele care se elimină sunt granulaţiile dense, apoi granulaţiile şi în final lizozomii).

15. Trombocite neactivate vWF Aderare ADERAREA TROMBOCITELOR

16. TxA2, ADP, Serotonin, Fibrinogen, Thrombospondin Eliberare Constituenţi tr. Agregare AGREGARE

17. AGREGARE TROMBOCITARĂ Tromb alb trombocitar

19. Prin factorii trombocitari,trombocitele intervin în : • consolidareadopului hemostatic plachetar şi favorizarea interacţiunii trombocitelor cu structurile subendoteliale (trombospondina) • susţinereamecanismul intrinsec al coagulării (Fp1, Fp2, Fp3, fibrinogenul) • retracţia cheagului (Fp7-trombostenina ) • repararealeziunii vasculare (PDGF, TGF-)

21. 3. Rol în reglarea fibrinolizei - pe suprafaţa plăcuţelor are loc interacţiunea dintre plasminogen şi activatorii acestuia - prin retracţia cheagului de fibrina încărcată cu plasminogen şi factor activator tisular este îndepărtată de mediul fluid, bogat în inhibitori ai fibrinolizei - în cursul secreţiei plachetare se eliberează PAI-1 4. Rol în menţinerea integrităţii peretelui vascular Trombocitul aprovizionează endoteliul cu metaboliţi ai acidului arahidonic şi furnizează factori de creştere (PDGF, TGF- ) care cresc viabilitatea celulelor endoteliale.

22. MODIFICĂRILE PATOLOGICE ALE TROMBOCITELOR 1. MODIFICĂRI CANTITATIVE • Trombocitopeniile- sub 100.000/mm3. => tendinţă crescută de sângerări spontane, mai ales hemoragii cutanate (peteşii, echimoze) şi mucoase (epistaxis, gingivoragii) • hipoplazie/aplazie medulară: radiaţii, medicamente, toxice • deficit de trombopoietină • distrucţie accelerată mediată imun sau prin consum exagerat de trombocite • splenomegalia congestivă, neoplazică, infiltrativă, infecţioasă 1.2. Trombocitozele - peste 400.000/mm3 => risc crescut de fenomene trombotice, poate fi: - fiziologică: în efortul fizic, la femei în perioada ovulaţiei şi lăuziei; - patologică: după intervenţii chirurgicale majore, în procese inflamatorii şi neoplazice, în anemii hemolitice, în splenectomie

23. 2. MODIFICĂRI CALITATIVE (TROMBOPATIILE) Trombopatiile pot fi ereditare sau câştigate (boli mieloproliferative cronice, renale, hepatice, după administrarea unor medicamente - aspirină, antiinflamatoare, antibiotice). • defecte de activare • defecte de aderare - boala von Willebrand • defecte de agregare - trombastenia Glanzmann • defecte de secreţie - a corpusculilor denşi sau a granulaţilor .