PLASMA UMANO COME SUPPORTO PER LA GENERAZIONE DI PELLE AUTOLOGA

1. PLASMA UMANO COME SUPPORTOPER LA GENERAZIONE DI PELLE AUTOLOGA

2. BIOMATERIALI devono possedere le seguenti caratteristiche: • tollerabilità: devono essere immunologicamente inerti (biocompatibili) • impalcatura provvisoria: dopo integrazione il biomateriale deve essere sostituito dal tessuto originario (biodegradabili) • contenuto informativo: devono comunicare e scambiare segnali con le cellule ospite

3. LE MATRICI PIU’ IDONEE.. Per la crescita e differenziazione di cheratinociti e fibroblasti autologhi, le matrici più idonee, sono di tipo naturale e si suddividono in: - collagene - agarosio - acido ialuronico - colla di fibrina - PGA - PHBV - PEG Grande interesse è rivolto verso l’utilizzo del plasma umano come supporto di crescita per cheratinociti e fibroblasti

4. “Human plasma as a dermal scaffold for the generation of a completely autologous bioengineered skin” Llames SG, Del Rio M, Larcher F, García E, García M, Escamez MJ, Jorcano JL, Holguín P, Meana A. Centro Comunitario de Sangre y Tejidos del Principado de Asturias, Emilio Rodriguez Vigil s/n, Oviedo,Spain. • Plasma umano come supporto tridimensionale per la crescita di fibroblasti e cheratinociti

5. MATERIALI E METODI • Estrazione e amplificazione di cheratinociti e fibroblasti umani autologhi, prelevati da un’unica biopsia • Preparazione del supporto di plasma - 7,2 ml plasma umano - 7,2 mg acido tranexamico - 8,8 ml NaCl 0,9% - 2 ml CaCl2 • Aggiunta di fibroblasti e cheratinociti a diverse densità

6. Densità di semina fibroblasti 2X103/cm2 4X103/cm2 6X103/cm2 Densità di semina cheratinociti 8X104/cm2 15X104/cm2

7. MODALITA’ SEMINA Dopo 13 giorni i frammenti vengono prelevati per l’esame istologico

8. microscopio a contrasto di fase dopo 3 giorni

11. microscopio a contrasto di fase dopo 8 giorni

14. ematossilina-eosina

19. immunoistochimica: vimentina

21. immunoistochimica: citocheratine

22. immunoistochimica: MIB1