110 likes | 656 Views
UJI AKTIVITAS ENZIM PROTEOLITIK. Enzim Proteolitik. Enzim proteolitik tergolong dalam enzim hidrolitik (peptida hidrolase). Enzim ini dipakai dalam produksi keju, bir, pelunakan daging, dan modifikasi sifat-sifat protein sereal dalam pembuatan roti dan produk sereal lain. .
E N D
Enzim Proteolitik Enzim proteolitik tergolong dalam enzim hidrolitik (peptida hidrolase). Enzim ini dipakai dalam produksi keju, bir, pelunakan daging, dan modifikasi sifat-sifat protein sereal dalam pembuatan roti dan produk sereal lain.
Spesifisitassubstratuntukenzimproteolitikdiantaranyaadalah: A. Sifat R1 dan R2 Kebutuhanspesifikterhadapsifat R1 dan/atau R2 dapatdigunakanuntukmembedakanenzimproteolitik. -kimotripsinmenghidrolisisikatanpeptidadengancepathanyajika R1 merupakanrantaisisiberuparesidutirosil, fenilalanil, atautriptofanil.
B. Konfigurasi Asam Amino Spesifisitasenzimproteolitik juga harusdikontribusiolehkongfigurasiasam amino, yaitudalamkonfigurasi-L. Kadang-kadangresiduasam amino-D berikatan pada sisiaktif, tetapiikatanpeptidatidakterhidrolisis. C. UkuranSenyawa khususnyauntukproteaseaspartat,
D. Sifat X dan Y Kebutuhanenzimterhadap X dan Y sebagaigugushidrogen dan hidroksilatauuntukmenentukansifatenzimsebagaiendopeptidaseataueksopeptidase. E. KebutuhanterhadapIkatanPeptida Ikatanpeptidadapatdigantikandengangugus amida (-NH2), ester (-COOR), tiolester (-COSR), atauhidroksamat (-CONHOH).
Bahan : • enzim papain • susu skim • formaldehid • aquades • indikator pp • NaOH 0,1 N
Alat : • Water bath • Buret • neraca analitik • erlenmeyer • gelas ukur 50 ml • pipet volume 10 ml • gelas beker 250 ml • pengaduk • pipet tetes
Preparasi sampel • Buatlarutansusu skim 5%. • Buat larutan enzim papain konsentrasi 20, 30 dan 40% • Siapkan 4 erlenmeyer, isi masing-masing dengan 40 ml larutan susu skim, masukkan 3 erlenmeyer dalam waterbath suhu 37 C(kira-kira 10 menit). Erlenmeyer yang satu tidak perlu dimasukkan dalam water bath (untuk perlakuan kontrol/blangko)
Prosedur • Masukkan masing masing ke dalam erlenmeyer 10 ml larutan enzim dengan konsentrasi yang berbeda. Untuk perlakuan kontrol/blangko tidak ditambah enzim tetapi di tambah 10 ml akuades ( dan tidak perlu di inkubasi). • Ketiga erlenmeyer diinkubasi pada suhu 37 C selama 1 jam. • Sesudah itu ambil 10 ml sampel tambah dengan 2 ml formaldehid , tambah indikator pp 3 tetes, lalu titrasi dengan 0,1 N NaOH
RUMUS ts = titrasi sampel tb = titrasi blanko berat sampel = berat susu skim dalam gram FP = Faktor pengenceran , jika sesuai dengan prosedur maka FP = 50/10= 5 % N = (ts-tb) ml x N NaOH x 14,008 x FP x100% berat sampel (g) x 1000