1 / 58

ANTIMIKROBNA TERAPIJA

ANTIMIKROBNA TERAPIJA. ISPITIVANJE OSJETLJIVOSTI PREMA KEMOTERAPEUTICIMA. Blaženka Hunjak, Hrvatski zavod za javno zdravstvo. Osnovni pojmovi :. antimikrobni lijekovi antibiotici kemoterapeutici anti –protiv bios – život “Nešto protiv života”. Povijesni pregled.

milo
Download Presentation

ANTIMIKROBNA TERAPIJA

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. ANTIMIKROBNA TERAPIJA ISPITIVANJE OSJETLJIVOSTI PREMA KEMOTERAPEUTICIMA Blaženka Hunjak, Hrvatski zavod za javno zdravstvo

  2. Osnovni pojmovi : • antimikrobni lijekovi • antibiotici • kemoterapeutici anti –protiv bios – život “Nešto protiv života”

  3. Povijesni pregled • 1.-3.st NAROD MAYA: “ljekovite plijesni” liječenje kožnih bolesti i intestinalnih infekcija • 12.st.TEMPLARI: “ljekovite plijesni” • 1896 Ernest Duchense proučava gljivu Penicillium crysogenum otkrio pozitivna djelovanja i terapijske mogućnosti gljive • 1907. – Paul Erlich : uveo termin KEMOTERAPIJA • ARSEFANAMIN tj. “ SALVARSAN”- uspješna terapija sifilisa • 1923. Picado Twight Kostarika – antibiotičko djelovanje gljive Penicillium criysogenum POČETAK ERE ANTIBIOTIKA 1929. A. Fleming- otkrio djelovanje plijesni Penicillium notatum na stafilokoke

  4. Povijesni pregled 1932. objavljeno 1935. Gerhard Domagk – iz sintetske boje prontosil razgradnjom dobiven produkt SULFANILNAMID - prvi sulfonamidi – UČINAK NA STREPTOKOKNE I GONOKOKNE INFEKCIJE 1939. / 1940. Florey i Chain pročistili ekstrakt plijesni, izolirali produkt Otkrili da je antibiotik dovoljno jak da preživi u čovječjem tijelu uz zadržavanje antibiotske mogućnosti i aktivno djelovanje protiv patogenih mikroorganizama NOBELOVA NAGRADA 1943. Selman A. Waksman - prvi aminoglikozid-streptomicin lijek protiv TBC

  5. SVOJSTVA IDEALNOG ANTIBIOTIKA • MORA DJELOVATI NA MIKROORGANIZME U VRLO NISKIM KONCENTRACIJAMA • NJEGOVO DJELOVANJE SE U UVJETIMA BOLESTI NE SMIJE SMANJIVATI: UPALA,PRISUTNOST IgG, MEDIJATORA UPALE, STANIČNIH ELEMENTATA • MORA DJELOVATI BRZO • NE SMIJE POTICATI REZISTENCIJU • NE SMIJE NARUŠAVATI IMUNI SUSTAV ORGANIZMA • POIZVODANJA MORA BITI MOGUĆA U INDUSTRIJSKIM MJERILIMA • CIJENA NE PREVISOKA

  6. VRSTE ANTIBIOTIKA I MEHANIZMI DJELOVANJA • A.PREMA MEHANIZMU DJELOVANJA NA : • 1. sintezu staničnog zida bakterije • 2. sintezu proteina bakterije • 3. sintezu nukleinske kiseline bakterije • 4. metabolizam bakterije • B.PREMA NAČINU DJELOVANJA • baktericidni - antibiotici koji potpuno uništavaju • mikroorganizam • bakteriostatski - antibiotici koji zaustavljaju rast • mikroroganizma. • C.PREMA KEMIJSKOJ STRUKTURI

  7. MEHANIZMI DJELOVANJA OMETANJE STVARANJA STANIČNOG ZIDA 1.BETALAKTAMSKI ANTIBIOTICI PENICILINI,CEFALOSPORINI,KARBAPENEMIMONOBAKTAMI 2.GLIKOPEPTIDI VANKOMICIN,TEIKOPLANIN INHIBICIJA SINTEZE BJELANČEVINA 1.AMINOGLIKOZIDI GENTAMICIN,TOBRAMICIN,AMIKACIN,NETILMICIN, STREPTOMICIN,SPEKTINOMICIN 2.KLORAMFENIKOL 3.TETRACIKLINI OKSITETRACIKLIN,TETRACIKLIN,DOKSICIKLIN,MINOCIKLIN 4.MAKROLIDI ERITOMICIN,AZITROMICIN,ROKSITROMICIN,KLARITROMICIN

  8. MEHANIZMI DJELOVANJA INHIBICIJA SINTEZE NUKLEINSKIH KISELINA INHIBICIJA DNA-GIRAZE KINOLONI NALIDIKSIČNA KISELINA NORFLOKSACIN,OFLOKSACIN,LEVOFLOKSACIN,PEFLOKSACIN, CIPROFLOKSACIN KOMPETITIVNI ANTAGONIZAM SULFONAMIDI

  9. MEHANIZAM DJELOVANJA ANTIMIKROBNOG LIJEKA ODREĐUJE MEHANIZAM REZISTENCIJE MIKROORGANIZMA.

  10. Penicilini su antibiotici koji se dobivaju iz filtrata kulture plijesni Penicillium notatum i Penicillium chrysogenum. • Kemijska osnova svih penicilina jest 6-aminopenicilanska kiselina. • Mijenjanjem supstituenta na aminoskupini dobivamo sve ostale peniciline.

  11. 1.PENICILINIA. PRIRODNI • benzilpenicilin-kalij (penicilinG) • prokainpenicilin G • benzatin benzilpenicilin • benzatin fenoksimetilpenicilin(penicilin V) Spektar • Gram-pozitivni uzročnici:streptokoki i stafilokoki , menigokoki,gonokoki,aktinomicete,leptospire, anaerobni Gramm pozitivni koki, klostridji (osim Clostridium difficile) anaerobni gram negativni štapići ( osim Bacteroides fragilis)Corynebacterium diphteriae, Treponema pallidum, Pasterella multocida,Borreliaburgdorferi, Erysipelotrix rusiopathiae, Spirrilum minus

  12. 1.PENICILINIB. OTPORNI NA PENICILINAZU • oksacilin • kloksacilin • dikloksacilin • meticilin Spektar • Staphylococcus aureus koji stvara penicilinazu,koagulaza negativni stafilokoki • MRSA - meticilin rezistentni Staphylococcus aureus OTPORAN NA METICILIN, ALI I NA SVE ČLANOVE OVE SKUPINE

  13. 2. AMINOPENICILINI • ampicilin • amoksicilin • penicilini širokog spektra • djeluju i na G - negativne bakterije Spektar • streptokoki,stafilokoki, Neisseria meningitidis, Haemophylus influenzae, gonokok , enterokoki /u kombinaciji s amnoglikozidima/, klostridije, Listeria monocytogenes • slabiji učinak na:E.coli,Proteus mirabilis, salmonele i šigele.

  14. 3.UREIDOPENICILINI • azlocilin • mezlocilin • piperacilin Spektar • Pseudomonas aeruginosa,E. coli,Proteus mirabilis,Haemophylus influenzae, enterokok,salmonele, šigele.

  15. 4.ß -LAKTAMI + INHIBITORI ß - LAKTAMAZA • amoksicilin + klavulanska kiselina • ampicilin + sulbaktam • tikarcilin + klavulanska kiselina • piperacilin + tazobaktam Spektar • mikroroganizmi koji luče beta-laktamaze:-S.aureus,M.catarrhalis,H.influenzae,Klebsiella, P.vulgaris,P.mirabilis E.coli,gonokoki,B.fragilis

  16. CEFALOSPORINI • Podjela cefalosporina na generacije • 1.prema učinku na gram-negativne • bakterije 2. otpornosti prema ß-laktamazama • SVAKA NOVA GENERACIJA IMA BOLJA SVOJSTVA

  17. CEFALOSPORINI I GENERACIJA cefaleksin cefazolin cefalotin Spektar streptokoki, ß-laktamaza negativni sojevi Staphylococcusaureus, N. gonorrhoeae, Neisseria meningitidis,E.coli, Klebsiella pneumoniae

  18. CEFALOSPORINI II GENERACIJA cefuroksim aksetil cefuroksim cefaklor cefmetazol cefotetan umjerena otpornost prema širokom spektru beta-laktamaza gram-negativnihbakterijâ; Spektar E.coli, Klebsiellaspp. gram-pozitivni koki,Shigella,Proteus, N.gonorrhoeae,H.influenzae

  19. CEFAMICINI Cefoksitin Spektar kao cefalosporini + anaerobi

  20. CEFALOSPORINI III GENERACIJA cefotaksim ceftriakson ceftazidim cefoperazon cefiksim,ceftibuten – PERORALNA PRIMJENA Spektar otporni na širok spektar ß - laktamaza. E.coli, Klebsiellasp., H.influenzae,pseudomonas, pneumokok,menigokok, gonokok

  21. CEFALOSPORINI IV GENERACIJA Cefpirom Cefepim Spektar • Zbrojeni učinak I i II generacije

  22. MONOBAKTAMI • Aztreonam Spektar • Gram - negativni uzročnici: enterobakterije, gonokok, meningokok, Haemophylus influenzae,Pseudomonas aeruginosa,jersinija,aeromonas. • Lijek izbora kod bolesnika preosjetljivih na penicilne i cefalosporine.

  23. KARBAPENEMI • imipenem s cilastatinom • meropenem Spektar • djeluju na većinu G+ i G- bakterija, uključuju i anaerobe • cilastatin - onemogućava razgradnju imipenema, sprječava toksični učinak imipenema • meropenem - nije potreban inhibitor cilastatin

  24. GLIKOPEPTIDI • vankomicin • teikoplanin Spektar • MRSA,E.faecium,Corynebacterium jeikeum, • Clostridium difficile,propionibakterije,listerije

  25. AMINOGLIKOZIDI • gentamicin • netilmicin • kanamicin • amikacin • tobramicin • spektinomicin • streptomicin Spektar • - enterobakterije, pseudomonas, za gram pozitivne bakterije u kombinaciji s ß-laktamskim antibioticima

  26. KLORAMFENIKOLTETRACIKLINI • KLORAMFENIKOL SPEKTAR • pneumokok,menigokok, Haemophylus influenzae,streptokoki.Slabije djelovanje na stafilokoke, enterokoke,salmonele,šigele,enterobaktere. • TETRACIKLINI • tetraciklin • oksitetraciklin • metaciklin • doksiciklin • minociklin Spektar • bruceloza,kolera, tularemija, kuga,rikecioza,leptospiroza, klamidijske i mikoplazmatske infekcije, pertusis sindrom. Sekundarni izbor za liječenje gonoreje, sifilisa, aktinomikoze, listerioza.

  27. MAKROLIDI/AZALIDI • eritromicin • midekamicin • azitromicin • klaritromicin • roksitromicin Spektar • sličan benzilpenicilinu uz dodatak djlovanja na legionele, mikoplazme,rikecije, helikobakter,klamidije,većina G+ uzročnika, Neisseriaspp,Haemophylus,influenzae, moraksele, anaerobi.

  28. LINKOZAMINI • linkomicin • klindamicin Spektar • anaerobi, stafilokoki,streptokoki. • klindamicin-alternativni lijek kod bolesnika preosjetljivih na ß-laktame.

  29. KINOLONI FLUORIRANI KINOLONI: • norfloksacin • pefloksacin • ofloksacin • enoksacin • ciprofloksacin • sparfloksacin • grapfloksacin Spektar • učinak na višestruko rezistentne enterobakterije:E.coli,proteus,klebsijela,enterobakter,salmonela, šigela,kampilobakter,gonokok, mikoplazme,klamidije,legionelu,mikobakterije.

  30. SULFONAMIDI U KOMBINACIJAMA • sulfametoksazol+trimetoprim Spektar • enterobakterije,Pneumocystis jiroveci (prije:carinii),salmonele, šigele,nokardije,Stenotrophomonas maltophilia, Pseudomonas spp. (osim Ps. aeruginosa)

  31. OSTALI ANTIBIOTICI • metronidazol • mebendazol • tinidazol • ornidazol Spektar • B.fragilis i ostali anaerobi,Garderella vaginalis,kampilobakter, anaerobni G+ koki,Trichomonas vaginalis, amebe, enterobijusi

  32. ANTITUBERKULOTICI • izoniazid+piridoksin • rifampicin • etambutol • pirazinamid • streptomicin • etionamid • PAS • kapreomicin • cikloserin • klofaztimin Spektar • Mycobacteriumtuberculosis,M cansasii,M.avium intracelluare • rifampicin : ima djelovanje na stafilokok, legionelu, klamidije, M.leprae, meningokok,gonokok i H.influenzae • streptomicin: antibakterijsko djelovanje: M.tbc,brucele, Yersinia pestis, Francisellatularensis, stafilokok, streptokok

  33. Određivanje osjetljivosti mikroorganizama na antimikrobne lijekove TEMELJEM REZULTATA TESTOVA ODREĐUJE SE DA LI JE MIKROORGANIZAM Osjetljiv Umjereno osjetljiv ili umjereno otporan Otporan NA DJELOVANJE IZABRANOG ANTIBIOTIKA

  34. Testiraju se : DA!!! KLINIČKI ZNAČAJNI IZOLATI BAKTERIJE KOJE NEMAJU PREDVIDLJIVU OSJETLJIVOST NE!!! FIZIOLOŠKA FLORA KONTAMINANTE IZBOR ANTIBIOTIKA OVISI O: MIKROORGANIZMU: vrsti poznatoj rezistenicji ANTIBIOTIKU: vrsti mehanizmu djelovanja načinu izlučivanja djelotvornosti Određivanje osjetljivosti mikroorganizama na antimikrobne lijekove

  35. METODE DILUCIJE 1. dilucija u bujonu mikrodilucija makrodilucija 2. dilucija u agaru ODREĐUJU NAJNIŽU KONCENTRACIJU ANTIBIOTIKA KOJA SPRJEČAVA RAST BAKTERIJA DIFUZIJSKA METODA 1.disk difuzija DOBRO STANDARDIZIRANA ZA BRZO RASTUĆE FAKULTATIVNO,ANAEROBNE BAKTERIJE Kombinacija difuzijske metode i određivanja MIK-a E-TEST Metoda prijelomne točke “BREAK_POINT” METODE ISPITIVANJA OSJETLJIVOSTI BAKTERIJA NA ANTIBIOTIKE

  36. METODE ISPITIVANJA OSJETLJIVOSTI BAKTERIJA NA ANTIBIOTIKE • METODE DILUCIJE 1.dilucija u bujonu • - epruvete ili bazenčići-identični volumen • bujona s inokulumom bakterije • - identičnim volumenom otopine • antibiotika, čije se koncentracije • povećavaju geometrijski • CILJ METODE • - utvrditi MIK -najnižu koncentracije antibiotika, koja sprečava rast bakterija, tj. minimalnu inhibitornukoncentraciju

  37. Metoda mikro - dilucije

  38. Metoda makro - dilucije

  39. Određivanje MIK-a • MIK koncentracija antibiotika koja se nalazi u prvoj epruveti u kojoj nema vidljivog rasta bakterija

  40. Određivanje MBK POSTUPAK: iz epruveta u kojima nema vidljivog rasta bakterija subkultivacija na krutu podlogu bez antibiotika MBK- minimalna baktericidna koncentracija koncentracija antibiotika na prvoj ploči na kojoj nema vidljivog rasta bakterija je MBK najmanja koncentracija koja ubija određenu bakteriju

  41. KONCENTRACIJE ANTIBIOTIKA 64 32 16 8 4 2 MBK - prva ploča na kojoj nema porasta nakon subkultivacije

  42. METODE DILUCIJE 2.dilucija u agaru • u krutu / polukrutu podlogu - antimikrobni lijek čije se koncentracije geometrijski povećavaju • –identični bakterijski inokulum • CILJ METODE • određivanje MIK-a najniže koncentracije antibiotika koja sprečava rast bakterija MIK - koncentracija antibiotika koja se nalazi u prvoj podlozi na kojoj nema vidljivog rasta bakterija

  43. METODA PRIJELOMNE TOČKE („ BREAK-POINT“) • specifične vrijednosti parametara poput MIK-ova ili promjera zone inhibicije. • antibiotici se testiraju samo u specifičnim koncentracijama koje omogućavaju svrstavanje u kategorije"S","I","R". • Kada se izaberu dvije koncentracije (viša i niža), interpretiraju se rezultati: • bakterija rezistentna - rast bakterije na obje koncentracije • bakterija intermedijarno osjetljiva - rast samo na nižoj • koncentraciji • bakterija osjetljiva - nema porasta niti na jednoj koncentraciji.

  44. METODA DISK - DIFUZIJE PRINCIP METODE omogućava testiranje osjetljivosti pomoću očitavanja inhibicijskih zona oko diskova impregniranih antibioticima DIJAMETRI ZONA INHIBICIJE KORELIRAJU sa MIK- ovima BAKTERIJA.

  45. Dispenzori za aplikaciju diskova na Petrijevu ploču

  46. METODA DISK - DIFUZIJE ZONA INHIBICIJE • područje bez rasta bakterija, • rezultat je inhibitornog učinka antibiotika na bakteriju, koji je difundirao u medij iz apliciranog izvora. • dijametar zone inhibicije mjeri se u mm. mjeriti prozirnim ravnalom zone kompletne inhibicije uključujući dijametar diska • očitane vrijednosti svrstati u kategorije osjetljiv- S, intermedijaran - I, rezistentan -R • interpretirati prema NCCLS standardu

  47. IZRADA TESTA OSJETLJIVOSTI BAKTERIJA NA ANTIBIOTIKE METODOM DISK - DIFUZIJE Priprema inokuluma • uzeti sterilnom ezom 3-5 kolonija iste morfologije i prirediti suspenziju u • fiziološkoj otopini gustoće 0,5 Mc Farlanda (usporediti sa standardom ) Inokulacija • unutar 15 minuta od priređivanja suspenzije, sterilni vateni štapić umočiti • u suspenziju, • prisloniti ga uz stijenke da se ocijedi višak tekućine, te inokulirati ploču • agara tako da se pokrije čitava površina. Tijekom inokulacije okretati • ploču za 60° nekoliko puta. • ploče ostaviti poluotvorene 3-5 minuta, ali ne dulje od 15 minuta, kako bi • suspenzija natopila agar

  48. Nanošenje antibiotskih diskova dispenzorom ili ručno nanijeti diskove tako da je razmak između diskova 24 mm, mjereći od centra do centra diska • unutar 15 minuta od postavljanja diskova, ploče okrenuti i staviti u temostat na 37º C testiranje bakterija s posebnim zahtjevima rasta (Haemophylus spp, Neisseria spp.) • inkubacija u atmosferi sa 5-7% CO2

  49. Očitavanjetestova osjetljivosti • - nakon 16 - 18 sati (osim za izolate stafilokoka i • enterokoka nakon 24 sata, zbog rezistencije • na vankomicin i oksacilin ) očitati zone oko diskova • - očitavati obrnutu stranu ploče iznad crne, nereflektirajuæe • površine, koja je odozgo osvjetljena • - ako je podlozi dodana krv, očitavati pravu stranu ploče s otkrivenim • poklopcem • - mjeriti prozirnim ravnalom zone kompletne inhibicije uključujući • dijametar diska • - očitane vrijednosti svrstati u kategorije • (osjetljiv- S, intermedijaran - I, rezistentan -R) • - interpretirati prema NCCLS standardu

  50. Očitavanje antibiogramamjerenjam zona

More Related