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UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL LISANDRO ALVARADO DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA SECCIÓN DE MICROBIOLOGÍA. COCOS GRAM POSITIVO. Dra. Luisa J. Morantes C. Octubre, 2013. UNIDAD 6: Cocos Gram Positivo y Gram Negativo.
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UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL LISANDRO ALVARADO DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA SECCIÓN DE MICROBIOLOGÍA COCOS GRAM POSITIVO Dra. Luisa J. Morantes C. Octubre, 2013
UNIDAD 6: Cocos Gram Positivo y Gram Negativo Objetivo Terminal: Al finalizar la unidad el estudianteestará en capacidad de diferenciarporsuscaracterísticasmorfológicas, bioquímicas, estructuraantigénica y pruebas de identificación en el laboratorio a los géneros y especies de cocos Gram Positivo y Gram Negativo de importanciamédica.
COCOS GRAM POSITIVO CARACTERÍSTICAS COMUNES Forma esférica Dispuestos en forma irregular (racimos de uva) Ausencia de flagelos Gram positivo
COCOS GRAM POSITIVO GENEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA GÉNERO Staphylococcus GÉNERO Streptococcus GÉNERO Enterococcus
STAPHYLOCOCCUS Especies patógenas de interés clínico pertenecientes al género Staphylococcus Staphylococcusaureus Staphylococcusepidermidis Staphylococcussaprophyticus
Staphylococcusaureus PRESENTACIONES CLÍNICAS ASOCIADAS forúnculos abscesos síndrome de la piel escaldada Mastitis impétigo hidradenitis celulitis
COCOS GRAM POSITIVO GÉNERO Staphylococcusaureus • Coagulasa positivo • Beta hemolíticos • Fermentan Manitol • Anaerobios Facultativos • Algunos producen pigmentos • Parte de la Microbiotade la piel y mucosas
Staphylococcusaureus Factores de Patogenicidad • Componentes Estructurales: componentes de la pared celular • Componentes de Secreción: toxinas y enzimas
Staphylococcusaureus Factores de Patogenicidad Componentes Estructurales: Ácidos Politeicóicos • Adhesinas Péptidoglicano • Inducen la formación de pirógenos • Estimuladores de la Quimiotaxis PMN
Staphylococcusaureus Factores de Patogenicidad Componentes Estructurales: Proteína A: - Característica Principal: Unión a la fracción Fc • Cápsula o glicocálix: • - Propiedad Antifagocítica • - Adhesinas
Proteína A Cápsula: Inhibe la fagocitosis Peptidoglicano Ac. Politeicóico: Adherenciainespecífica IgG Pared celular Staphylococcusaureus Adhesinas: Proteínas de superficie que favorece al anclaje a la célula huésped.
Staphylococcusaureus ENZIMAS (Invasinas): Hialuronidasa Lipasas Nucleasa Coagulasa Estafiloquinasa Componentes de Secreción: toxinas y enzimas TOXINAS: Leucocidina Hemolisinas Toxina del sindrome del shock tóxico (TSST-1) Exfoliativa: sindrome de la “piel escaldada”
Staphylococcusepidermidis Características: • No contiene proteína A • Coagulasa negativo • No hemolíticos • No fermenta Manitol • Sensible a la Novobiocina Factores de Patogenicidad: • Presenta un glicocalix de protección • Adherencia a superficies plásticas y metálicas
Staphylococcussaprophyticus • CARACTERISTICAS : • No contiene proteína A • Coagulasanegativo • No hemolítico • No fermenta Manitol • Resistente a la Novobiocina • FACTORES DE PATOGENICIDAD: • Receptores oligosacáridos específicos de células de la uretra
DIAGNÓSTICO GÉNERO STAPHYLOCOCCUS MUESTRAS Pus, Heridas, Secreciones EXAMEN DIRECTO DE LA MUESTRA Gram: CocosGram Positivos en racimos AGAR SALADO MANITOL AGAR SANGRE 37º C – 24 horas COLONIAS AISLADAS GRAM Cocos Gram Positivos en racimos Catalasa (+) Manitol (+) Nitrato (+) Novobiocina (-) (+) COAGULASA Resistente Staphylococcus saprophyticus Sensible Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus
Género Streptococcus Celulitis Faringoamigdalitis Aguda Erisipela Piodermaestreptococcico • Septicemia • Fiebre Reumatica • Glomerulonefritis • Síndrome de Shock tóxico
Clasificación del Género Streptococcus • Patrones de hemólisis: Hemolisis de células rojas in vitro • Incompleta (α) • Completa (β) • No hemolíticos (γ) • Propiedades serológicas: Carbohidratos de la pared celular • Grupos de Lancefield (A-V) • Propiedades bioquímicas • Reacciones de Fermentación de azúcar • Pruebas para determinar la presencia de enzimas • Pruebas de susceptibilidad o resistencia a ciertos agentes químicos
Streptococcuspneumoniae Streptococcusviridans Streptococcusagalactiae Grupo D no Enterococcus (Streptococcusbovis) Streptococcuspyogenes Género Streptococcus CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS
+ Partículas de látex cubiertos de anticuerpos específicos Extracto soluble de la pared celular por acción enzimática CLASIFICACION DE LANCEFIELD PARA BETA HEMOLITICOS Género Streptococcus
Streptococcuspyogenes Características: • Cocos Gram positivo • Anaerobios facultativos • Parte de la Microbiota de la piel, vías respiratorias superiores, aparato digestivo y genital • Catalasa: Negativo • Reducción de Nitrato a Nitrito: Negativo • Exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos
Factores de Patogenicidad Capsula (Ácido Hialuronico) Sustancias Extracelulares Hemolisinas Toxina Eritrogenica Esteptoquinasa Membrana Celular Peptidoglicano (Pared Celular Grupo de carbohidratos (Sustancia C) Fimbrias Proteína M Acido Lipoteicoico Acido Lipoteicoico
Streptococcuspyogenes Factores de Patogenicidad Componentes de Secreción: • Hemolisinas • Toxina Eritrogénica • Estreptoquinasa
Streptococcuspneumoniae • Características: • Diplococos Gram positivo • Cápsula polisacáridos que permite tipificarlos • Lisis con sales biliares • Microflora normal de las vías respiratorias superiores
DIAGNÓSTICO GÉNERO STREPTOCOCCUS MUESTRAS Pus, Sangre, LCR, otros EXAMEN DIRECTO DE LA MUESTRA AGAR SANGRE Gram : CocosGram Positivosdispuestos en cadena 37º C – 24 horas 10% CO2 Catalasa(-) Nitratos (-) COLONIAS AISLADAS ObservarHemólisis GAMMA BETA ALFA Grupo A GruoD GrupoViridans Bacitricina Fermentación de Azucares Streptococcus pneumoniae GrupoViridans Grupo B Fermentación de Azucares Optoquina sensible Prueba CAMP
PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LA BACITRACINA Pruebas para diferenciar estreptococos Beta hemolíticos (Grupo A y Grupo C) Con crecimiento alrededor del disco de Bacitracina Sin crecimiento alrededor del disco de Bacitracina
Staphylococcusaureus Streptococcusagalactiae Streptococcus pyogenes PRUEBA DE CAMP Prueba de CAMP: Las especies del genero Streptococcus del grupo B ( BETA HEMOLITICOS) produce un factor que aumenta la beta hemólisis de una cepa indicadora de Staphylococcusaureus.
PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LA OPTOQUINA Pruebas para diferenciar Streptococcus pneumoniae y otros estreptococos Alfa hemolíticos (Streptococcus mitis) Streptococcus pneumoniae Streptococcus mitis DISCO DE OPTOQUINA DISCO DE OPTOQUINA Sin crecimiento alrededor del disco de Optiquina Con crecimiento alrededor del disco de Optiquina
Género Enterococcus Características: • Cocos Gram positivos • Catalasa: Negativos • Reducción de Nitratos a Nitritos: Negativo • Anaerobios facultativos • Crecen en altas concentraciones de NaCl (6,5%) y sales biliares
Enterococcus • Enterococcusfaecalis: 80 a 90% de aislamientos • Enterococccusfaecium: mayor incidencia como agente nosocomial
ENTEROCOCCUS MANIFESTACIONES CLÍNICAS ASOCIADAS • Causa mas común de infección nosocomial • Transmisión de un paciente a otro a través de las manos • Transmisión a través de dispositivos médicos • Pueden causar: • -Endocarditis • -Infección de tracto urinario