561 likes | 5.59k Views
KAEDAH PENSTERILAN . Disediakan oleh : Mohd Hafiz Bin Mansor Bahagian Mikrobiologi Dan Genetik Institut Sains Biologi Fakulti Sains Universiti Malaya. TUJUAN /OBJEKTIF.
E N D
KAEDAH PENSTERILAN Disediakanoleh: Mohd Hafiz Bin Mansor BahagianMikrobiologi Dan Genetik InstitutSainsBiologi FakultiSains Universiti Malaya
TUJUAN /OBJEKTIF • Mengenalipelbagaiteknikpensterilanuntukmembasmimikroorganismadenganmenggunakanpelbagaiteknikpensterilaniaitudenganmenggunakan • Habakering (Api) • Habalembab(Autoklaf) • Kimia(Derivatifhidrokloritdanfenolik) • Pancaran(Cahaya UV) • Penapisan(Kertasturas)
Pengenalan: Definisi: • Pensterilanmerupakansatuprosesuntukmembasmisemuaorganismatermasukbakteria, kulat,yis,actinomycetedan virus. • Prosesiniadalahpentingdalambidangpengajianmikrobiologi. • Melaluikaedahiniakandapatmemusnahkankesemuamikroorganismahidup.
HabaKering • Merupakancarapensterilandenganmenggunakanapidenganmenggunakanpenunubunsen. • Penunu Bunsen (bahasa Inggeris:Bunsen burner), dinamakan bersempena Robert Bunsen, ialah radas makmal biasa yang menghasilkan nyalaan gas terbuka tunggal, digunakan untuk pemanasan, pensterilan, dan pembakaran. • Tujuankaedahiniadalahbagimensterilkankeadaansekelilingsemasamengendalikanmikroorganisma agar tidakterkontaminasi. • Disampingitukaedahinidigunakandalamteknikantiseptikbagimendapatkanketulenanbakteria.
Penunu Bunsen Incinerator
Teknik streaking single colony Streak 3 • Sterilkan inoculating loop denganmenggunakanapi. • Lakukan streak 1 • panaskan inoculating loop semula • Lakukan streak 2 danulangcara yang samadiatas. Streak 2 Streak 1
HabaLembap(Autoclave) • Kaedahinimenggunakanwapdantekananhabauntukpensterilan. • Kaedahinisesuaiuntukbahantarakultur(media),danlarutancecair(broth). • Pensterilanbergantungkepadasuhu, masa, tekanan, • Udaradalamalatautoklafdigantidenganwap,kemudiandipanaskandengantekanansuhu 121°C selama 20 minit. • Autoklaf tape digunakansebagaipenandaarassekiranyaautoklafberjayagarisanhitamakantimbul.Inkhitamtersebutmengandungi 30.1% lead thiosulfate, 0.6% magnesium carbonate, 20.1% neocryl B814, 30.1% ethanol, 22.7% ethyl acetate and 49% ink solids.
Autoklaf(Autoclave) Autoclave-Makmal Autoclave- Hospital
KIMIA • Bahankimiabolehmengugatkehadiranmikroorganisma.Akantetapiianyaperludidedahkan lama untukpensterilan yang sempurna.contohnya tube atau tips yang dicemariolehmikroorganismaperlulahdibuangkankedalamsavlon,clorox,dll(agendisinfektant). • Derivatifhiplokloritsepertisabundan detergent digunakandalammembunuhmikroorganisma. • Derivatiffenolikseperti phenol digunakanoleh Lister(1867) sebagaidisinfektantdantelahdigunakansebagaipiawai.
Ujianbahankimiakeatas plate Control Savlon Dettol Clorox Clorox Control Savlon Dettol Kaedahkertasturas Direndamdalamagenkimiadandiujikeataspiring yang mempunyaiorganismahidupkulturS.aureusujianzonperencatan(Inhibition) diukur.
PANCARAN • Terdapatpelbagaibentukpancaranseperti UV,X-ray,gelombangmikrodanelektron yang bolehmengawalpertumbuhanmikroorganismacontohnya: • Sinaruv,sinar gamma x ray,elektronberupayamembunuhbakteriavegatif(bakteriaberubahbentuk),sporakulat,yis,danvirus.Inikeranakesanantimikrobolehgelombang UV akibatkesancahayanya. • UV yang berukuran (220-300nm)berupayamemecahkanstruktur DNA danmembunuhmikroorganisma. • Pancaranmampumeleraikan RNA,DNA mengikutmasasemakin lama semakinberkesan.
Laminar flow,Fume cupboard & Biosafety cabinet. Biosafety cabinet Fume cupboard Laminar flow
Prinsip Laminar flow,Fume cupboard & Biosafety cabinet. Laminar Flow Fume cupboard Biosafety cabinet
PENAPISAN • Terdapatjugabahan-bahan yang tidakdapatmenahandanmusnahpadasuhu yang tinggiseperti serum darah,sesetengahguladanlarutanantibiotik.Untukmesterilkanbahan-bahantersebutkertasturas yang mengandungimeliliang yang kecildigunakanbagimenapismikorganismadanmensterilkanlarutancecairdan media kulturcontohyaantibiotikchloromphenicoldidalamrosbengaldigunakanbagimembunuhsesetengahbakteriabagimendapatkankulatdanactinobakteria. • Kebiasaannya filter jenis methyl cellulase 0.22mm digunakanuntukmenapisbakteriamanakala 0.45mm digunakanuntukmenapissampel filter air sepertilumut(algae). • Filter jenis PPFE digunakanuntukmenapisalkohol,alkali,aciddll.
Penapisan(Filtration) Kertas Turas(Filter paper). Alat penapisan S.aureus bacteria Swenex
KESIMPULAN • Kaedahpensterilanpentingdidalambidangmikrobiologibagitujuanpenyelidikkandankawalanbagimembunuhmikroorganismadalamkerja-kerjapenyelidikkanmikrobiologi. • Melaluikaedahpensterilaninikerja-kerjadidalammikrobiologidapatdijalankandengansempurnatanpaadakontaminasi. • Pencemarandanpenyakitdapatdielakkandenganmenggunakanteknikpensterilan. • Tidaksemua media dapatdisterilkandenganmenggunakanautoklaf.
RUJUKAN • BukuPengenalanMikrobiologi. • J.Heritage,E.G.V Evan & R.A Kelington • Internet