310 likes | 1.03k Views
تشخیص آزمایشگاهی کمپیلوباکتر:. Campylobacter. اهمیت کلینیکی: Campylobacter jejuni sub sp jejuni مهمترین پاتوژن انسانی در بین گونه های کمپیلوباکتر علائم بیماری: دردهای شکمی – اسهال، اسهال خونی، تب و لرز. علائم ثانویه: آرتریت عفونی، مننژیت، پروکتیت
E N D
تشخیص آزمایشگاهی کمپیلوباکتر: Campylobacter
اهمیت کلینیکی: Campylobacter jejuni subsp jejuni مهمترین پاتوژن انسانی در بین گونه های کمپیلوباکتر علائم بیماری: دردهای شکمی – اسهال، اسهال خونی، تب و لرز. علائم ثانویه: آرتریت عفونی، مننژیت، پروکتیت عفونت با کمپیلوباکتر سه برابر سالمونلا و شیگلا گزارش شده است سندرم گیلن بار (GBS) Guillain – barre Syndrome
عفونت خارج روده ای به دنبال اسهال ناشی از کمپلوباکتر • باکتریمی نفریت • هپاتیت پروستاتیت • Cholecystitis عفونت ادراری • پانکراتیت پریتونیت • سندروم اورمی همولیتیک میوکاردیت • سپتی سمی ممنژیت • آرتریت • آبسه
مخازن: - Zoonotic : جوندگان، خرگوش، پرندگان وحشی، گوسفند، اسب، گاو، خوک، مرغ و حیوانات خانگی - سبزی و صدف آلوده - آب
فاکتورهای مؤثر در بقای کمپیلوباکتر ججونی: • عدم رشد در دمای 30 درجه سانتی گراد • حساس بودن به خشکی • حساس به میزان اکسیژن زیاد • حساس به PH پائین (3/2) • آسکوربیک اسید در غلظت 05/0% اثر باکتریسیدال دارد. • در صفرا در 37 درجه سانتی گراد رشد می کند. • در مدفوع، شیر، آب، ادرار در 4 درجه سانتی گراد رشد بهتری نسبت به دمای 25 درجه سانتی گراددارد. • در دمای 4 درجه سانتی گراد سه هفته در مدفوع، 4 هفته در آب، 5 هفته در ادرار. • انجماد سبب کاهش جمعیت سلولی کمپیلوباکتر می شود.
جمع آوری – انتقال نمونه • نمونه مدفوع: کمتر از دو ساعت کشت شود • سواب رکتال • محیط های ترانسپورت • APW و تایوگلیکولات و Cyctin • محیط استوارت اصلاح شده • کری بلر (1.6 g/lit) نگهداری در 4 درجه سانتی گراد
آزمایش مستقیم • رنگ آمیز گرم – 15 دقیقه • کربول فوشین – 1 دقیقه • فوشین بازیک 1% 66 تا 94% حساسیت 95% اختصاصیت
تشخیص احتمالی کمپیلوباکتر در نمونه مدفوع:
جداسازی کمپیلوباکتر ججونی: • محیط های اختصاصی Campy-Thio – Campy-Bap • انکوباسیون در درجه حرارت 42 درجه سانتی گراد • آتمسفر مناسب 5% اکسیژن، 10% دی اکسید کربن، 85% نیتروژن
جداسازی کمپیلوباکتر ججونی با استفاده از محیط های اختصاصی: • نمونه مدفوع و یا سواب رکتال در محیط Cary – Blair • تهیه سوسپانسیون در 10 میلی لیتر محیط BHI • کشت یک یا دو قطره از سوسپانسیون بر روی محیط های اختصاصی • انکوباسیون در شرایط مناسب
جداسازی کمپیلوباکتر ججونی با استفاده از روش فیلتر (Filter Technique): A 1 – مخلوط یک گرم مدفوع در 10 میلی لیتر نرمال سالین استریل. (30 ثانیه به شدت تکان داده شود). 2 – قرار دادن فیلتر 47 میلی متری و 65/0 میکرومتر بر روی محیط بروسلاآگار 5% خون گوسفند 3 – قرار دادن 8 تا 10 قطره از سوسپانسیون مدفوع روی سطح فیلتر 4 – بعد از 30 دقیقه فیلتر برداشته شود. 5 – انکوباسیون در شرایط مناسب
B سانتریفوژ نمونه مدفوع به مدت 5 دقیقه برداشتن 5 میلی لیتر از محلول رویی با یک سرنگ فیلتر کردن محلول با استفاده از فیلتر 65/0 میکرون دور ریختن 3 میلی لیتر از مایع و کشت یک یا دو قطره بر روی محیط های سلکیتو و غیرسلکیتو انکوباسیون پلیت ها. در 72 و 48 و 24 ساعت
محیط های غنی کننده Enrichment broth: • Preston • Campythio • Campylobacter enrichment broth