1 / 26

Alkohol Dehidrogenase

Alkohol Dehidrogenase. Gaby Almira (10509028) Masyitha Ambarwati (10509085). Definisi. Alkohol dehidrogenase (EC 1.1.1.1) Kelas : Oksidoreduktase Sub kelas : Dehidrogen a se Reaksi yang dikatalisis : CH 3 CH 2 OH + NAD +  → CH 3 CHO + NADH + H +

maude
Download Presentation

Alkohol Dehidrogenase

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Alkohol Dehidrogenase Gaby Almira (10509028) Masyitha Ambarwati (10509085)

  2. Definisi Alkohol dehidrogenase (EC 1.1.1.1) Kelas : Oksidoreduktase Sub kelas : Dehidrogenase Reaksi yang dikatalisis: CH3CH2OH + NAD+ → CH3CHO + NADH + H+ pengubahan alkohol menjadialdehidatauketon, reaksireversibel

  3. Reaksi

  4. Struktur • Dimer • Berat molekul ~80 kDa ADH5 • Sisi aktif: • Zn, His-67, Cys-174, Cys-46, Ser-48, His-51, Ile-269, Val-292, Ala-317, and Phe-319 • Zinc membentuk ikatan koordinasi dengan Cys-46, Cys-174, and His-67 • Phe-319, Ala-317, His-51, Ile-269 and Val-292 menstabilkan NAD+ dengan membentuk ikatan hidrogen. HLADH

  5. Struktur • Tetramer • Berat molekul ~150kDa ADH padaragi

  6. Alkohol Dehidrogenase

  7. Sumber Manusia (hati) Bakteri Ragi Hewan Tanaman

  8. ADH Manusia • CH3CH2OH + NAD+ → CH3CHO + NADH + H+

  9. Mekanisme ADH pada Manusia

  10. ADH BAKTERI DAN RAGI Glucose + 2 ADP + 2 Pi → 2 ethanol + 2 CO2 + 2 ATP + 2 H2O Pada bakteri dan ragi, ADH digunakan untuk proses fermentasi.

  11. Regulasi Gen

  12. Substrat ADH sangat selektif dalam pemilihan substrat.

  13. Substrat ADH dari hati kuda (HLADH) Digunakan untuk mereduksi senyawa siklik keton, 2-ketoester atau 3-ketoester. Thermoanaerobium bockii (TBADH) Digunakan untuk mereduksi metil dan etil keton rantai terbuka Rhodococcus erythropolis (READH) Digunakan untuk mereduksi keton dan menghasilkan (S)-alkohol Lactobacillus kefiri (LKADH) Digunakan untuk mereduksi keton dan menghasilkan (R)-alkohol

  14. Parameter Kinetik

  15. Isolasi dari hati manusia

  16. Isolasi dari Ragi atau Bakteri

  17. ADH Assays

  18. Aplikasi • pembuatan alkohol awalperkembanganbioteknologi fermentasi: degradasiguladenganproduksamping alkohol Fermentasi awalnyabanyak dipakai untuk memproduksi minuman beralkohol seperti bir dan wine.

  19. Aplikasi Contoh: obat antihipertensif, obat penyumbat kanal kalsium dan kalium, agen antiaritmik, agonis β-reseptor, obat antikolesterol, dan obat antiviral • biokatalis enzimbersifatselektif: kemoselektif, regioselektif, stereoselektif Industrifarmasetikasemakinmembutuhkansenyawa yang stereospesifikuntukobat.

  20. Aplikasi Sintesis senyawaobat: • pentoksifilin (PTX) • propentofilin (PPT) • denbufilin (DBF) menggunakanbiokatalis: (R)-alkohol dehidrogenase dari L. kefir (S)-aromatik alkohol dehidrogenase dari Thermoanaerobium sp. (S)-alkohol dehidrogenase dari Thermoanaerobium brockii

  21. Aplikasi • (R)-hidroksi dari PTX ((R)-OHPTXataulisofilin kandidat obat untuk sindrom distress pernapasan akut, luka paru-paru akut, septic shock, dan mukositis, serta efektif dalam pencegahan dan pengobatan diabetes tipe I • ((S)-OHPTX) tidak aktif secara farmakologis.

  22. Aplikasi

  23. Aplikasi

  24. Modifikasi • Metil pikolinimidat meningkatkan aktivitas enzim hingga 19 kali lipat, dan memodifikasi sekitar 50 dari 60 gugus amino. • Enzim yang sudah dimodifikasi memiliki 1% dari 53 kali lipat tetapan Michaelis-Menten yang lebih besar, dan turnover number yang 12-30 kali lipat lebih besar

  25. Aplikasi • Inhibisi produk menunjukkan bahwa reaksi yang dikatalisis oleh enzim native dan yang sudah dimodifikasi memiliki mekanisme yang sama, bi bi berurutan. • Tahap penentu laju pada reaksi yang maju atau kebalikannya adalah penguraian kompleks enzim-koenzim. Enzim yang sudah dimodifikasi mungkin memberikan laju yang lebih besar karena kompleksnya dapat berdisosiasi lebih cepat.

  26. DaftarPustaka • Edenberg, H. J. (2007). Role of Alcohol Dehydrogenase and Aldehyde Dehydrogenase Variants. Alcohol Research & Health , 5-13. • Machielsen, R. (2006). Production and Characterization of a Thermostable Alcohol Dehydrogenase That Belongs to the Aldo-Keto Reductase Superfamily. Applied and Environmental Microbiology , 233-238. • Nie, Y., Xu, Y., Mu, X. Q., Wang, H. Y., Yang, M., & Xiao, R. (2007). Purification, Charecterization, Gene Cloning, and Expression of a Novel Alcohol Dehydrogenase with Anti-Prelog Stereospecificity from Candida parapsilosis. Applied and Environmental Microbiology , 3759-3764. • Zanon, J. P. (2006). Colorimetric Assay of Ethanol Using ALcohol Dehydrogenase from Dry Baker's Yeast. Enzyme and Microbial Technology . • Bryce V. Pupp. Enhancement of the Activity of Horse Liver Alcohol Dehydrogenase by Modification of Amino Groups at the Active Sites. Journal of Biological Chemistry Vol. 245 no. 7. (1969) • Z. Liu, et al. Enzymes from Higher Eukaryotes for Industrial Biocatalysis, Food Technol. Biotechnol. 42 (4) 237–249 (2004). • Katja Goldberg, Kirsten Schroer , Stephan Lütz, dan Andreas Liese. Biocatalytic Ketone Reduction — A Powerful Tool for The Production of Chiral Alcohols — Part I: • Processes With Isolated Enzymes. Appl Microbiol Biotechnol (2007) 76 : 237–248. • Elżbieta Pękala dan Dorota Żelaszczyk. Alcohol Dehydrogenases as Tools for the Preparation of Enantiopure Metabolites of Drugs with Methyl Alkyl Ketone Moiety. Sci Pharm. 2009; 77: 9–17.

More Related