1 / 51

HEMOFILIA

HEMOFILIA. ENFERMEDAD DE VON WILLEBRAND. PREVALENCIA. Hemofilia A 1/5000 - Hemofilia B 1/25000 - VWD 3% poblaci ón. FVIII-VWF. A1 A2. FVIIIa. C2 C1 A3. IIa, FXa. 372. A2. FVIII. 740. A1. C1. A3. B. VWF.

snana
Download Presentation

HEMOFILIA

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. HEMOFILIA ENFERMEDAD DEVON WILLEBRAND

  2. PREVALENCIA • Hemofilia A 1/5000- Hemofilia B 1/25000 - VWD 3% población

  3. FVIII-VWF A1 A2 FVIIIa C2 C1 A3 IIa, FXa 372 A2 FVIII 740 A1 C1 A3 B VWF C2 1689 N N C C S-S S-S Vlot et al., 1998

  4. protómero dominios funcionales ligandos Factor von Willebrand PropéptidoSubunidad Madura I S 1 2050 D1 D2 D’ D3 A1A2A3 D4BC1C2 S I S D’ D3 A1A2A3 D4BC1C2 S I RGD Colágeno GPIIb-IIIa FVIII GPIb Heparina Heparina Colágeno Sulfátidos

  5. Proteolisis aumentada (vWD2A) ADAMTS-13 kproteolisis Plasma Inicial vWFEnsamble y Catabolismo ksecreción kdepuración Depuración aumentada (vWD1 Vicenza) Sadler JE, 2005

  6. FVIII/VWF - Propiedades FVIII VWF Clínica Hemofilia vWD Producción S. Hepáticos C. Endoteliales Megacariocitos Gen Cromosoma X Cromosoma 12 Molécula Heterodímero Multímero Función Coagulación Procofactor Adhesión Endotelio/Sub Transporta FVIII

  7. FVIII/VWF - Nomenclatura ISTH

  8. VWDClasificación RevisadaSadler E, 1994 Tipo 1Deficiencia cuantitativa parcial Tipo 2Alteración cualitativa Tipo 3“Ausencia”de VWF

  9. VWDGenética VWF Cromosoma 12 (12p1212pter)

  10. Modificadires Ambientales edad, género, trauma Enfermedad primariamutación Chance Niveles Variables VWF ? Genes modificadores Difícil Diagnóstico VWFExpresión VariablePenetrancia Incompleta Ginsburg D, 2001

  11. VWF-Variabilidad • Individual • Familiar

  12. VWF-Variabilidad • Factores • 40% no genéticos • 60% genéticos

  13. VWF-Variabilidad • Factores no-genéticos • Edad • Estrés • Ejercicio • H. Tiroideas • Estrógenos • F.Aguda

  14. VWF-Variabilidad • Factores genéticos • Grupo ABO  20-30% variabilidad Grupo “O” VWF Hipótesis Glicosilación Alteración • procesamiento • estabilidad • secreción

  15. VWD Distribución según grupo ABO • “AB” 0,6%  difícil diagnóstico • “O” 70%  más sintomático > frecuencia de consulta Woods AI, 2001

  16. VWFPruebas Específicas Cuantitativa Cualitativa VWF:Ag SI NO VWF:RCo SI SI VWF:CB SI SI Multímeros SEMI SI

  17. VWF-ELISA 1 2 3 4 a-vWF vWF a-vWF-HRP Color-Abs 2. Incubación con muestra o control 1. Anti-VWF inmovilizado 3. Incubación con anti-VWF-conjugado 4. Incubación con sustrato cromogénico

  18. VWF:RCo Plaquetas normales Plasma del paciente

  19. VWF:RCo Plaquetas normales Plasma del paciente Ristocetina Agregometría Agregación c/Ristocetina

  20. VWF:RCo Plaquetas normales Plasma del paciente Ristocetina Agregometría Agregación c/Ristocetina PRP Plaquetas del paciente Plasma del paciente

  21. VWF:RCo Plaquetas normales Plasma del paciente Ristocetina Agregometría Agregación c/Ristocetina PRP Plaquetas del paciente Plasma del paciente Ristocetina Agregometría

  22. Normal Agregación c/Ristocetina vWD-Tipo 1 vWD-Tipo 2A vWD-Tipo 3 Kasper C, 2005

  23. VWF:CB Unión Colágeno 1 2 Colágeno Tipo III BSA a-vWFconejo 3 4 Muestra Esferas poliestireno IgG F(ab’)2* 1. Inmovilización 5 6 2. Bloqueo 3. Colágeno  VWF Citometría de flujo 4. VWF  a-VWF 5. a-VWF  IgGF(ab’)2fluoresceína 6. Adquisición

  24. Actividad VWF-ELISA 1 2 3 4 a-vWF vWF a-vWF-HRP Color-Abs 1. AcMo a-vWFepitope funcional inmovilizado 2. Incubación con muestra o control 3. Incubación con anti-vWF-conjugado 4. Incubación con sustrato cromogénico

  25. Agregación c/Ristocetina Kasper C, 2005

  26. vWD-Tipo 2Clasificación RevisadaSadler E, 1994 2M  función plaquetaria c/Multímeros APM 2N  afinidad VWF-FVIII* *símil Hemofilia A, autosómica 2A  función plaquetaria  Multímeros APM 2B  afinidad VWF-GPIb-IX

  27. VWF:FVIIIBEnlace FVIII  VWF 1 2 3 4 a-vWF vWF FVIII Color-Abs CaCl2 0,4M 1. Anticuerpo a-vWF inmovilizado 2. Incubación conmuestrao control 3. IncubaciónFVIIIpurificado/CaCl2 4. Incubación con sustrato cromogénico

  28. Referencia Paciente 1 Paciente 2 0.95 0.90 0.85 0.80 Absorbancia 405nm 0.75 0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 -3.50 -3.25 -3.00 -2.75 -2.50 -2.25 -2.00 VWF:FVIIIBEnlace FVIII  VWF

  29. 2N-Variante NormandyBiología Molecular- Secuenciación - Enz. restricción

  30. VWF- Arg19Trp (C2594T) Exón 18 Enzima BspMI 1-244 pb 2-148 pb 3-96 pb Normal 148 pb 96 pb Mutado 244 pb 1 2 3 Mutación Normal

  31. VWDEstrategia Diagnóstica * Screening • T. Sangría • APTT (fVIII) • Adhesividad • Tiempo de obstrucción (PFA) *no permiten excluir VWD

  32. VWDEstrategia Diagnóstica Diagnóstico -VWF plasma/plaquetas • VWF:Ag • VWF:RCo • VWF:CB -FVIII en plasma

  33. VWDEstrategia Diagnóstica Clasificación • Multímeros • RIPA • Unión GP plaquetarias • VWF:FVIIIB • Biología Molecular

  34. vWD- Importancia Dignóstica Castaman G, 2003

  35. vWD- Importancia Dignóstica Castaman G, 2003

  36. HEMOFILIA VON WILLEBRAND Diagnóstico Diferencial

  37. Enfermedad devon Willebrand • Cofactor de ristocetina * • Antígeno de factor vW  o N • Factor VIII  o N • Tiempo de Sangría  o N *excepto la variante 2N

  38. Hemofilia • Cofactor de ristocetina N • Antígeno de factor vW N • Factor VIII  • Tiempo de Sangría N

  39. Hemofilia-VWD 2N Hemofilia VWD2N VWF:RCo N N Factor VIII   VWF:FVIIIB N 

  40. VWDLaboratorio • Diagnóstico • Control de terapéutica

  41. COAGULPATIAS Orientación Diagnóstica

  42. V. INTRINSECA TTPA V. EXTRINSECA TP V. FINAL TT FC PRUEBAS XII XIIa XI XIa Ca2+ X Xa Va FL Ca2+ FT VIIa Ca2+ IX IXa VIIIa FL Ca2+ Fibrinógeno M. Fibrina Fibrina II IIa XIIIa Activación

  43. Pruebas DEFECTO (probable)  TP APTT, TT, TS Normales V. Extrínseca (FVII) Déficit de factores Vit K Dep. Hepatopatía • TP, APTT TT, TS Normales V. Común, Déficit de factores Vit K Dep., Hepatopatía TP, APTT, TT, TS Hepatopatía, CID ↑TP, APTT, TT TS Normal V. Final Fibrinógeno APTT TP, TT, TS Normal V. Intrínseca (FVIII, FIX, FXI, FXII) Hemofilia, VWD ↑APTT, TS TP, TT Normales VWD INTERPRETACION

  44. Pruebas DEFECTO (probable)  TP APTT, TT, TS Normales V. Extrínseca (FVII) Déficit de factores Vit K Dep. Hepatopatía • TP, APTT TT, TS Normales V. Común, Déficit de factores Vit K Dep., Hepatopatía TP, APTT, TT, TS Hepatopatía, CID ↑TP, APTT, TT TS Normal V. Final Fibrinógeno APTT TP, TT, TS Normal V. Intrínseca (FVIII, FIX, FXI, FXII) Hemofilia, VWD ↑APTT, TS TP, TT Normales VWD INTERPRETACION

  45. Pruebas DEFECTO (probable)  TP APTT, TT, TS Normales V. Extrínseca (FVII) Déficit de factores Vit K Dep. Hepatopatía • TP, APTT TT, TS Normales V. Común, Déficit de factores Vit K Dep., Hepatopatía TP, APTT, TT, TS Hepatopatía, CID ↑TP, APTT, TT TS Normal V. Final Fibrinógeno APTT TP, TT, TS Normal V. Intrínseca (FVIII, FIX, FXI, FXII) Hemofilia, VWD ↑APTT, TS TP, TT Normales VWD INTERPRETACION

  46. Pruebas DEFECTO (probable)  TP APTT, TT, TS Normales V. Extrínseca (FVII) Déficit de factores Vit K Dep. Hepatopatía • TP, APTT TT, TS Normales V. Común, Déficit de factores Vit K Dep., Hepatopatía TP, APTT, TT, TS Hepatopatía, CID ↑TP, APTT, TT TS Normal V. Final Fibrinógeno APTT TP, TT, TS Normal V. Intrínseca (FVIII, FIX, FXI, FXII) Hemofilia, VWD ↑APTT, TS TP, TT Normales VWD INTERPRETACION

  47. Pruebas DEFECTO (probable)  TP APTT, TT, TS Normales V. Extrínseca (FVII) Déficit de factores Vit K Dep. Hepatopatía • TP, APTT TT, TS Normales V. Común, Déficit de factores Vit K Dep., Hepatopatía TP, APTT, TT, TS Hepatopatía, CID ↑TP, APTT, TT TS Normal V. Final Fibrinógeno APTT TP, TT, TS Normal V. Intrínseca (FVIII, FIX, FXI, FXII) Hemofilia, VWD ↑APTT, TS TP, TT Normales VWD INTERPRETACION

  48. Pruebas DEFECTO (probable)  TP APTT, TT, TS Normales V. Extrínseca (FVII) Déficit de factores Vit K Dep. Hepatopatía • TP, APTT TT, TS Normales V. Común, Déficit de factores Vit K Dep., Hepatopatía TP, APTT, TT, TS Hepatopatía, CID ↑TP, APTT, TT TS Normal V. Final Fibrinógeno APTT TP, TT, TS Normal V. Intrínseca (FVIII, FIX, FXI, FXII) Hemofilia, VWD ↑APTT, TS TP, TT Normales VWD INTERPRETACION

  49. Pruebas DEFECTO (probable)  TP APTT, TT, TS Normales V. Extrínseca (FVII) Déficit de factores Vit K Dep. Hepatopatía • TP, APTT TT, TS Normales V. Común, Déficit de factores Vit K Dep., Hepatopatía TP, APTT, TT, TS Hepatopatía, CID ↑TP, APTT, TT TS Normal V. Final Fibrinógeno APTT TP, TT, TS Normal V. Intrínseca (FVIII, FIX, FXI, FXII) Hemofilia, VWD ↑APTT, TS TP, TT Normales VWD INTERPRETACION

More Related