Klinikai kipróbálás (3)

1. Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetéseaz Európai Unió új társadalmi kihívásainaka Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

2. Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetéseaz Európai Unió új társadalmi kihívásainaka Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011 Dr. Pongrácz Judit Háromdimenziós szövettenyésztés és „tissueengineering”- 25. Előadás Klinikai kipróbálás (3)

3. Tissue engineering útján készült vérerek (TEBV) • TE útján előállított vérerek az alacsony nyomású tüdő keringésben használatosak • Az ilyen vénák nem elég ellenállóak ahhoz, hogy az arteriális nyomásnak ellenálljanak Sejtek izolálása Sejtek felszaporítása Kisvénák kivétele Sejtek polimerre növesztése Tissue-engineering útján készült graft

4. TEBV előállítása • Teljesen biológiai módon, tissue-engineered humán véredények (Nicolas L'heureux, StéphaniePâquet, Raymond Labbé, LucieGermain, and François A. Auger) FASEB Journal 1998 • HUVEC-t és SMC-t használtak

5. Miokardiális infarktus • Őssejteket használnak olyan esetben, amikor nagy területet érint a károsodás • A legtöbb esetben javulás mutatkozik, de további vizsgálatokra van szükség

6. Húgyvezeték és húgyhólyag • Sejtmentes, kollagén-alapú mátrixok • Bélből vagy húgyhólyagból származó epitéliális sejtek • 4-7 évvel később 40 betegből 34 betegnél javulás volt észlelhető

7. Porc • Eddig két, többközpontú klinikai kipróbálás történt • A legtöbb esetben javulást tapasztaltak • Hosszú távú hatások még feldolgozás alatt állnak

8. Tüdő

9. Trachea - bronchusok - tüdő

10. Tüdőbetegségek, amelyekre a sejtes terápiák jótékony hatással lehetnek • COPD (chronicobstuctivepulmonarydisease) • ARDS (acuterespiratorydistresssyndrome) • Asztma • Mechanikai szöveti károsodás

11. Stratégiák sejtalapú tüdő terápiákhoz Embrionális őssejtek Sejtkultúra Tüdő epitélium Szelekció (genetikai, levegő-folyadék határ, mediumko-kultúra) Mezenchima Endotélium Tüdő epithéliumszerű sejtek Organoid Funkcióképes egység ESC-k, MSC-k, Fibrociták Tracheán belüli/Vaszkuláris infúzió Szerkezeti graft Engraftment Akut sejtvédelem/javítás (túlélési, növekedési faktorok) Engraftment Porc Géntranszfer Terápiás molekulák bevitele Ér Epithélium Stroma (fibroblaszt)

12. A tüdő komplex struktúráinak kifejlődése egérben Es Es T T Tüdő rügy I –es típusú sejt II-es típusú sejt Hengeres sejt Gobletsejt Csillós sejt Clarasejt Bazális sejt Fibroblasztok I. Embrionális E 9-12 II. Pszeudoglanduláris E 12-15 III. Canaliculáris E 15-E17 IV. Sacculáris E 17-Születésig (Sz) V. Alveoláris Sz-Sz. után 20 nap

13. Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetéseaz Európai Unió új társadalmi kihívásainaka Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011 Dr. Pongrácz Judit Háromdimenziós szövettenyésztés és „tissueengineering” – 26. Előadás Kutatásban való felhasználás, drog tesztelés

14. Kutatási felhasználás • Sejtek közötti interakció • Jelátvitel útvonalak vizsgálata (inter- és intra-celluláris) • Regenerációs folyamatok vizsgálata • Betegségek modellezése

15. Tímuszreaggregáció Deoxiguanozinnal kezelt kultúrák E15 egér embrió E15 tímusz lebenyek T-limfociták vagy limfoidprogenitorok Tímuszepitéliális sejtek Reaggregátum

16. Notch jelátvitel vizsgálata tímusz kultúrákban Stroma sejt Jagged/Delta-like Presenilin g-Szekretáz Limfocitaprogenitor IntracellulárisNotch (ICN) KoR Sejtmag KoA KoR CSL (ICN) CSL • Nincs T-sejt irányú elköteleződés • B-sejt irányú elköteleződés • T-sejt irányú elköteleződés • B-sejt irányú elköteleződés gátolt

17. Nyálmirigy aggregátum GFP-Ad FoxN1-Ad

18. Szövetspecifikus változások • Transzkripciós faktorok és más gének expressziója könnyen módosítható • A génexpresszió módosulások szövettípushoz kötöttek • A teljes szövetre kifejtett hatásokat morfológiai, sejt interakció és jelátvitel szintjén lehet vizsgálni

19. Drog tesztelés • Toxicitás tesztek • Hatékonyság tesztek

20. Máj toxicitási tesztek • Tisztított primer humán májsejtek 2D kultúrában • Komplex, 3D máj mikroszövetkék • Toxicitási vizsgálatok (akut és krónikus) • Viabilitási vizsgálatok • Epe termelés • Molekuláris markerek tesztelése (albumin stb.)

21. Drog tesztelés tüdőmodellen • Komplex sejt összetétel • Fiziológiáshoz közeli drog transzporterexpresszió • Reprodukálhatóság • AkalmasHTS-re